詳細(xì)介紹
名稱 DT40 (雞淋巴瘤細(xì)胞)
別稱 DT-40; DT 40; DT40B; LSCC-DT40
年齡(性別) 1日齡
組織來源 法氏囊,,淋巴瘤
生長特性 懸浮細(xì)胞
細(xì)胞形態(tài) 淋巴母細(xì)胞樣
背景描述 DT40細(xì)胞是Hyline SC雞法氏囊淋巴細(xì)胞株經(jīng)鳥類白血病病毒誘導(dǎo)建株的細(xì)胞系。原始淋巴瘤用羅氏相關(guān)病毒1(RAV-1)感染出生1天的小雞得到,,法氏囊中生成的腫瘤制成細(xì)胞懸液后通過靜脈注射輸入同基因型的受體小雞,。經(jīng)過一次體內(nèi)移植后,建立了DT40細(xì)胞,。DT40細(xì)胞包含的前病毒基因整合在c-myc原癌基因的上游,,表達(dá)的c-myc RNA水平較高。DT40細(xì)胞缺少一個(gè)正常c-myc基因,,但含有兩個(gè)拷貝ALV去調(diào)控的myc基因,。DT40細(xì)胞保留了重排免疫球蛋白輕鏈基因(IgL)的能力,。在IgL位點(diǎn),DT40包含一個(gè)重排和一個(gè)胚系同源基因,。c-rel基因和v-rel癌基因在DT40細(xì)胞中都能誘導(dǎo)組織相容性(MHC)Ⅱ類抗原表達(dá),。v-rel誘導(dǎo)的MHCⅡ表達(dá)比c-rel誘導(dǎo)快,且其有效性在數(shù)周后達(dá)到c-rel的50倍,。DT40細(xì)胞呈淋巴母細(xì)胞表型,;傳染性檢測(cè)表明,DT40細(xì)胞釋放低水平的傳染性RAV-1,,DT40細(xì)胞株可以用于穩(wěn)轉(zhuǎn)研究,。
生物安全等級(jí) 1
生長培養(yǎng)基 DMEM+0.05mM β-mercaptoethanol+10% Tryptose Phosphate Broth+5% Chicken Serum+10% FBS+1% P/S
推薦傳代比例 1:3-1:4
推薦換液頻率 2~3次/周
倍增時(shí)間 ~48 hours
凍存條件
凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
溫度:液氮
培養(yǎng)條件
氣相:空氣,95%,;CO2,,5%
溫度:37℃
保藏機(jī)構(gòu) ATCC; CRL-2111 DSMZ; ACC-636
我司全程提供細(xì)胞生物體,、生長特性,、來源、器官,、類型,、形態(tài)、培養(yǎng)條件,、應(yīng)用,、組織、凍存條件等復(fù)蘇及凍存細(xì)胞株說明書信息,,我們專業(yè)您的細(xì)胞系實(shí)驗(yàn),,讓您實(shí)驗(yàn)再無煩擾!產(chǎn)品僅用于科研
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X0543 |
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn):
1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過程中,,根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力,,并可長時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況,,包括活細(xì)胞的形態(tài),、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等,。
2.研究條件可以人為控制
pH,、溫度、氧氣,、二氧化碳,、張力等物理化學(xué)的條件,可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制,,同時(shí),,可以施加化學(xué),、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察,,這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下,。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞,,需要時(shí),,可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察,、檢測(cè)和記錄
采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡,、熒光顯微鏡、電子顯微鏡,、流式細(xì)胞術(shù),、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué),、原位雜交,、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備。
使用方法:
收到細(xì)胞后,,請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作,。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,,拆下封口膜,,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過夜,,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,,用PBS清洗細(xì)胞一次,;
2) 添加0.125%消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右,;倒置顯微鏡下觀察,,待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入*培養(yǎng)液終止消化,;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,,按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,然后補(bǔ)充新鮮的*培養(yǎng)基至5mL,,放入37℃,,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4) 待細(xì)胞*貼壁后,,培養(yǎng)觀察,。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基,。
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),,90%,;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%,。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,,95%;二氧化碳,,5%,。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3)凍存液:90%血清,,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,,液氮儲(chǔ)存,。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
反曲毛殼 嬰兒雙歧桿菌 乳制品發(fā)酵,;食品飲料;模式菌株.厭氧
河流弧菌 普通變形桿菌
玫瑰紅表面培養(yǎng)基60mm/25cm2 光滑念珠菌KTCC0001凍干粉
丁醇梭菌(丁醇桿菌) 抗輻射鏈霉菌
蠟蚧輪枝孢菌 香蕉炭疽盤長孢菌
大鼠白介素7受體(IL-7R)elisa分析檢測(cè)試劑盒
大鼠白介素7(IL-7)elisa分析檢測(cè)試劑盒
大鼠白介素6受體(IL-6R)elisa分析檢測(cè)試劑盒
大鼠白介素6(IL-6)elisa分析檢測(cè)試劑盒
大鼠白介素5(IL-5)elisa分析檢測(cè)試劑盒
DT40 (雞淋巴瘤細(xì)胞)蛋白上樣緩沖液非還原,,5× 10ml
蛋白上樣緩沖液還原,,5× 10ml
蛋白示蹤上樣緩沖液非還原,5× 5ml
蛋白示蹤上樣緩沖液還原,,5× 5ml
蛋白提取/檢測(cè)