產(chǎn)品簡(jiǎn)介
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 |
---|---|---|---|
貨號(hào) | GOY-01X0208 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
主要用途 | 僅供科研使用 |
雙特異性0酸酶2抗體 前列腺特異膜抗原抗體
多巴胺受體相互作用蛋白1抗體 前列腺酸性0酸酶抗體
腦表皮生長(zhǎng)因子跨膜蛋白DNER抗體 前列腺素氧化環(huán)化酶1抗體
DUX3蛋白抗體 前列腺素脫氫酶1抗體
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上海谷研實(shí)業(yè)有限公司 |
—— 銷售熱線 ——
15026555973 |
參考價(jià) | 面議 |
更新時(shí)間:2022-04-06 14:44:18瀏覽次數(shù):256
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 |
---|---|---|---|
貨號(hào) | GOY-01X0208 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
主要用途 | 僅供科研使用 |
培養(yǎng)操作:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻,。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,,棄去上清液,補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)?/span> 細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過(guò)夜),。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度,。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次,。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化,。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,,棄去上清液,,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類,;
1. 細(xì)胞凍存時(shí),,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,,細(xì)胞變圓 脫 落后,,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清,。加 1ml 血清重懸細(xì)胞,,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,,DMSO 終濃度為 10%,,細(xì)胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液,,注意凍 存管做好標(biāo)識(shí),。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,,2 個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存,。記錄凍存管位置以便下次拿取。
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | |
規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 |
貨號(hào) | GOY-01X0208 |
名稱 SHZ-88 (大鼠乳腺癌細(xì)胞) (種屬鑒定正確)
種屬 大鼠
年齡(性別) 不詳
組織來(lái)源 乳房癌
生長(zhǎng)特性 貼壁細(xì)胞
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
背景描述 SHZ-88細(xì)胞源自DMBA誘導(dǎo)的大鼠乳房癌。大多數(shù)SHZ-88細(xì)胞是上皮細(xì)胞樣的,也可以見(jiàn)到巨大細(xì)胞團(tuán)和病態(tài)有絲分裂的SHZ-88細(xì)胞,;電鏡下可見(jiàn)SHZ-88細(xì)胞表面和橋粒上有微絲,。第3天的有絲分裂指數(shù)是59%,移植到同源動(dòng)物中可以成活。
生長(zhǎng)培養(yǎng)基 RPMI-1640+10% FBS+1% P/S
推薦傳代比例 1:2-1:4
推薦換液頻率 2~3次/周
凍存條件
凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
溫度:液氮
培養(yǎng)條件
氣相:空氣,95%;CO2,,5%
溫度:37℃
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
產(chǎn)品僅用于科研一、分離與培養(yǎng):
1,、無(wú)菌條件下,,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,最后將成1mm3左右大?。?/span>
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),,混懸10s,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;
3,、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,,置37℃消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復(fù)此步驟2-3次,,直至組織*被消化,;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,,1200r/min 離心10min,,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
5,、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;
二、免疫熒光鑒定:
1,、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min,;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min,;
4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜,;
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h,;
6、用PBS沖洗3次,,每次10min,,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
肺形側(cè)耳,、柳樹(shù)菌,、樹(shù)窩 丁香假單胞菌
大孢綠僵菌=金龜子綠僵菌大孢變種 白色噬瓊膠菌
宛氏擬青霉 木醋桿菌
膜醭畢赤酵母 肺炎克雷伯菌ATCC700603凍干粉
厭氧消化鏈球菌 霉
大鼠不對(duì)稱二甲基(ADMA)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠補(bǔ)體因子H(CFH)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠補(bǔ)體因子D(adipsin)(CFD)elisa檢測(cè)試劑盒免費(fèi)代測(cè)
大鼠補(bǔ)體片斷5a(C5a)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠補(bǔ)體片斷5(C5)elisa檢測(cè)試劑盒
SHZ-88 (大鼠乳腺癌細(xì)胞)谷丙轉(zhuǎn)氨酶GPT/ALT測(cè)試盒IFCC推薦方法 150ml 紫外比色法
谷丙轉(zhuǎn)氨酶GPT/ALT測(cè)試盒賴氏法 96T 100管/50樣 微板法
谷草轉(zhuǎn)氨酶(GOT)測(cè)試盒
谷草轉(zhuǎn)氨酶GOT/AST測(cè)試盒IFCC推薦方法 150ml 紫外比色法
谷草轉(zhuǎn)氨酶GOT/AST測(cè)試盒賴氏法 96T 100管/50樣 微板法
冷凍保存細(xì)胞之方法?
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(shí)(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存,。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下,, 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí),, 以防止冰晶過(guò)大,,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,,惟存活率稍微降低一些,。