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INS-1 (大鼠胰島細(xì)胞瘤細(xì)胞)

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更新時(shí)間:2022-04-06 14:56:56瀏覽次數(shù):128

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號(hào) GOY-01X0366 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 僅供科研使用    
INS-1 (大鼠胰島細(xì)胞瘤細(xì)胞)公司其它各種產(chǎn)品D激酶衰減蛋白2抗體 葡萄糖神經(jīng)酰胺合成酶抗體
0酸化D激酶衰減蛋白2抗體 葡萄糖激酶調(diào)節(jié)蛋白抗體
0酸化雙皮質(zhì)素抗體 葡萄糖激酶抗體
0酸化Disabled 1抗體 葡萄糖合成酶2抗體
多巴胺,、cAMP調(diào)節(jié)0蛋白抗體 葡萄糖合成酶1抗體

詳細(xì)介紹

冷凍保存細(xì)胞之方法?
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4 30~60 分鐘-20 30 分鐘* → -80 16~18 小時(shí)(或隔夜)液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存,。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 –80 以下, 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 不可超過(guò)1 小時(shí),, 以防止冰晶過(guò)大,造成細(xì)胞大量死亡,,亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80 冰箱中,,惟存活率稍微降低一些。

圖片2.jpg

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

INS-1 (大鼠胰島細(xì)胞瘤細(xì)胞)

規(guī)格

1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

貨號(hào)

GOY-01X0366

名稱    INS-1 (大鼠胰島細(xì)胞瘤細(xì)胞) (種屬鑒定正確)
別稱 INS1

生長(zhǎng)特性 貼壁細(xì)胞

細(xì)胞形態(tài) 不規(guī)則形

背景描述 INS-1細(xì)胞源自X射線照射的移植胰島瘤的大鼠,,胰島素陽(yáng)性,,可合成胰島素原III,,可用于胰島β細(xì)胞功能研究。

生長(zhǎng)培養(yǎng)基 RPMI-164010% FBS50μmol/L β-mercaptoethanol1% P/S

推薦換液頻率 2~3/

凍存條件

凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度:液氮

培養(yǎng)條件

氣相:空氣,,95%,;CO25%

溫度:37

培養(yǎng)操作:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37水浴中迅速搖晃解凍,,加 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻,。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,,補(bǔ) 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)?/span> 細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,,培養(yǎng)過(guò)夜),。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2
)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
1.
棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣,、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次,。
2.
1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化,。
3.
6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,,在 1000RPM 條件下離心 4 鐘,,棄去上清液,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻,。
4.
將細(xì)胞懸液按 12 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3
)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面 T25 瓶為類,;
1.
細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,,細(xì)胞變圓 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),。
2. 4 min 1000rpm
離心去掉上清,。加 1ml 血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,,輕輕混勻,,DMSO 終濃度為 10%,細(xì)胞密度不低于1x106/ml,,每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液,,注意凍 存管做好標(biāo)識(shí)。
3.
將凍存管置于程序降溫盒中,,放入-80 度冰箱,,2 個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取,。
肺炎鏈球菌ATCC49619凍干粉   長(zhǎng)根菇

點(diǎn)頭根霉   停乳鏈球菌

鼠傷寒沙門(mén)氏菌   豬霍亂沙門(mén)氏菌豬霍亂亞種

改良馬丁瓊脂培養(yǎng)基200ml   痤桿菌

意大利青霉   酮叢毛單胞菌
大鼠超氧化物歧化酶(SODelisa檢測(cè)試劑盒

大鼠成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子2FGF2/bFGFelisa檢測(cè)試劑盒

大鼠雌二醇(E2elisa檢測(cè)試劑盒

大鼠雌激素(Eelisa檢測(cè)試劑盒

大鼠雌一醇(E1elisa檢測(cè)試劑盒
INS-1 (
大鼠胰島細(xì)胞瘤細(xì)胞)過(guò)氧化氫檢測(cè)試劑盒500T

過(guò)氧化氫檢測(cè)試劑盒50T

過(guò)氧化氫酶(CAT)測(cè)試盒

過(guò)氧化氫酶(CAT)試劑盒

過(guò)氧化氫酶CAT測(cè)試盒鉬酸銨法 100/96 分光光度法
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
產(chǎn)品僅用于科研一,、分離與培養(yǎng):
1
、無(wú)菌條件下,,取出1-3d SD大鼠心房組織,,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
2
、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 0.1% I型膠原酶),,混懸10s,,置37條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4放置;
3
,、剩下的組織再加入34mL酶消化液,,混懸10s,置37消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4放置,重復(fù)此步驟2-3次,,直至組織*被消化,;
4
、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,,1200r/min 離心10min,,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10 FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,,放置于37 ,,5CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5
,、差速貼壁1h后,,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;
二,、免疫熒光鑒定:
1
、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),,棄去培養(yǎng)基,,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,;
2
PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后在4條件下,用0.1Triton X-100透膜15min,;
3
,、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,,然后在室溫條件下,,用4% BSA封閉細(xì)胞30min
4
,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,,然后將其放在4冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5
,、PBS沖洗細(xì)胞3次,,每次10min,按1150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37條件下放置1h,;
6
、用PBS沖洗3次,,每次10min,,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。


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