細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：
1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力,，并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控,、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況,，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu),、生命活動(dòng)等,。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度,、氧氣,、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件,，可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制,，同時(shí)，可以施加化學(xué),、物理,、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀(guān)察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下,。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類(lèi)型的細(xì)胞，需要時(shí),，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化,。
4.研究?jī)?nèi)容便于觀(guān)察、檢測(cè)和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡,、熒光顯微鏡,、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù),、激光共焦顯微鏡,、免疫組織化學(xué)、原位雜交,、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備,。

名稱(chēng)    GH3 (大鼠垂體瘤細(xì)胞)（種屬鑒定正確）
別稱(chēng) GH 3

種屬 大鼠

年齡（性別） 7月齡

組織來(lái)源 垂體

生長(zhǎng)特性 半貼半懸

細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣

背景描述 GH3細(xì)胞是由Tashjian·A·H等人于1965年7月從一只7月齡的雌性Wistar-Furth大鼠的垂體腫瘤中分離建立的。GH3細(xì)胞不是直接來(lái)源于GH1細(xì)胞的克隆,，而是從原代培養(yǎng)的GH1細(xì)胞在大鼠身上傳代兩次形成的腫瘤中建立的,。上皮細(xì)胞樣的GH3細(xì)胞比GH1細(xì)胞分泌更高水平的生長(zhǎng)激素，也可產(chǎn)生催乳素,。對(duì)調(diào)控GH3細(xì)胞分泌蛋白類(lèi)激素的研究表明,，氫化可以刺激GH3細(xì)胞生長(zhǎng)激素的分泌,、抑制催乳素的產(chǎn)生。

生物安全等級(jí) 1

生長(zhǎng)培養(yǎng)基 Ham's F-12K＋15% HS＋2.5% FBS＋1% P/S

推薦傳代比例 1:2-1:4

推薦換液頻率 2~3次/周

倍增時(shí)間 ~60-90小時(shí)

凍存條件

凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度：液氮

培養(yǎng)條件

氣相：空氣,，95%,；CO2，5%

溫度：37℃

基因表達(dá)情況 prolactin; growth hormone (somatotrophin)

保藏機(jī)構(gòu) ATCC; CCL-82.1 DSMZ; ACC-469 ECACC; 87012603

使用方法：
收到細(xì)胞后,，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作,。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒,，拆下封口膜,，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過(guò)夜,，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,，用PBS清洗細(xì)胞一次,；
2) 添加0.125%消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右,；倒置顯微鏡下觀(guān)察,，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入*培養(yǎng)液終止消化,；
3) 用吸管輕輕吹打混勻,，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的*培養(yǎng)基至5mL,，放入37℃,，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細(xì)胞*貼壁后,，培養(yǎng)觀(guān)察,。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基。

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO,，貨號(hào)21875-091),，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清,，10%,。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%,；二氧化碳，5%,。 溫度：37℃,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配,，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍,，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液,，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞,，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。

肺炎克雷伯菌CMCC46117凍干粉   毛殼

葡萄芽假絲酵母   干酪棒桿菌(乳酪棒桿菌)

短小芽孢桿菌   枯草芽孢桿菌CMCC63501凍干粉南京便診

松生擬層孔菌   生孢梭菌(產(chǎn)芽孢梭狀芽孢桿菌)

兩型孢毛霉   納地青霉
大鼠腸堿性磷酸酶(ALPI)elisa檢測(cè)試劑盒

大鼠叉頭框蛋白O1(FOXO1)elisa檢測(cè)試劑盒

大鼠叉頭框蛋白M1(FOXM1)elisa檢測(cè)試劑盒

大鼠層粘連蛋白β1(LAMβ1)elisa檢測(cè)試劑盒

大鼠層粘連蛋白α1(LAMα1)elisa檢測(cè)試劑盒
GH3 (大鼠垂體瘤細(xì)胞)（種屬鑒定正確）鮭魚(yú)補(bǔ)體蛋白3(C3)elisa分析檢測(cè)試劑盒

鮭魚(yú)補(bǔ)體蛋白3(C3)elisa檢測(cè)試劑盒

鮭魚(yú)補(bǔ)體蛋白4(C4)elisa分析檢測(cè)試劑盒

鮭魚(yú)補(bǔ)體蛋白4(C4)elisa檢測(cè)試劑盒

鮭魚(yú)促胰液素/胰泌素(SCT)elisa分析檢測(cè)試劑盒
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