細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細胞活力,，并可長時間監(jiān)控,、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,，包括活細胞的形態(tài),、結構、生命活動等,。
2.研究條件可以人為控制
pH,、溫度、氧氣,、二氧化碳,、張力等物理化學的條件，可以根據(jù)實際需要進行人為的控制,，同時,，可以施加化學、物理,、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,，需要時，可采用克隆化等方法使細胞達到純化,。
4.研究內容便于觀察,、檢測和記錄
采用各種研究技術：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡,、電子顯微鏡,、流式細胞術、激光共焦顯微鏡,、免疫組織化學,、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備,。

名稱    視網膜微血管內皮細胞
2.組織來源：視網膜組織

3.產品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

4.細胞簡介：

人視網膜微血管內皮細胞分離自視網膜組織,；視網膜居于眼球壁的內層，是一層透明的薄膜,。視網膜由色素上皮層和視網膜感覺層組成，兩層間在病理情況下可分開，稱為視網膜脫離,。色素上皮層與脈絡膜緊密相連,，由色素上皮細胞組成，它們具有支持和營養(yǎng)光感受器細胞,、遮光,、散熱以及再生和修復等作用。組織學上視網膜分為10層,，由外向內分別為：色素上皮層,、視錐、視桿細胞層,、外界膜,、外顆粒層、外叢狀層,、內顆粒層,、內叢狀層、神經節(jié)細胞層,、神經纖維層,、內界膜。視網膜內層為襯于血管膜內面的一層薄膜,，有感光作用,；后部鼻側有一視神經乳頭。視網膜上的感覺層是由三個神經元組成,。神經元是視細胞層,，專司感光，它包括錐細胞和桿細胞,。視桿細胞主要在離中心凹較遠的視網膜上,，而視錐細胞則在中心凹處多。第二層叫雙節(jié)細胞,，約有10到數(shù)百個視細胞通過雙節(jié)細胞與一個神經節(jié)細胞相聯(lián)系,，負責聯(lián)絡作用。第三層叫節(jié)細胞層,，專管傳導,。視網膜是一層菲薄的但又非常復雜的結構，它貼于眼球的后壁部,，傳遞來自視網膜感受器沖動的神經纖維跨越視網膜表面,，經由視神經到達出口。視網膜的分辨力是不均勻的,，在黃斑區(qū),，其分辨能力強,。它是組成血管腔面單層扁平上皮樣細胞，它所產生和分泌的生物活性物質對維持血管張力,、調節(jié)血壓,、抗血栓形成等有重要作用，在視網膜血管疾病的發(fā)病機制中有重要病理生理學意義,。由于從不同的組織和器官獲得的內皮細胞具有不同的特性,，在腦和視網膜中，這些內皮細胞具有內屏障的功能,，在調節(jié)血管生理狀態(tài),，釋放血管活性物質以及新生血管的形成中發(fā)揮著重要作用，體外分離培養(yǎng)RCEC對研究視網膜血管性疾病發(fā)生發(fā)展的病理生理機制以及疾病的早期防治具有重要臨床意義,。

5.方法簡介：

公司實驗室分離的人視網膜微血管內皮細胞采用膠原酶-中性混合消化法結合密度梯度離心法,、后通過內皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶,。

6.質量檢測：

公司實驗室分離的人視網膜微血管內皮細胞經CD31免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息：

包被條件 PLL（0.1mg/ml）,，明膠（0.1%）

培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 內皮細胞樣

傳代特性 可傳2-3代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%；CO2,，5%

使用方法：
收到細胞后,，請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,，75%酒精消毒,，拆下封口膜，放入37℃,，5% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜,，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng),。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,，用PBS清洗細胞一次,；
2) 添加0.125%胰消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右,；倒置顯微鏡下觀察,，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入*培養(yǎng)液終止消化,；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當?shù)谋壤M行接種傳代,，然后補充新鮮的*培養(yǎng)基至5mL,，放入37℃，5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
4) 待細胞*貼壁后,，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基,。

細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO,，貨號21875-091)，90%,；優(yōu)質胎牛血清,，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%,；二氧化碳，5%,。 溫度：37℃,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清,，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存,。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍,，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細胞密度,。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng),。
對于懸浮細胞,，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞,，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘,，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。

免疫調節(jié)蛋白AIRE抗體

磷酸化蛋白AKT1抗體

脫氫酶2型抗體

γ-氨基醛脫氫酶抗體

4號染色體開放閱讀框42抗體
大鼠血管細胞粘附分子 VCAM-1 elisa檢測試劑盒

大鼠血管性血友病因子抗原vWF:Agelisa檢測試劑盒

大鼠血紅蛋白elisa檢測試劑盒

大鼠血紅素氧合酶1（HO-1）elisa檢測試劑盒

大鼠血清淀粉樣蛋白A SAA elisa檢測試劑盒
視網膜微血管內皮細胞人電壓門控鉀通道(VGKC)elisa檢測試劑盒

人電壓門控鉀通道抗體(VGKC-ab)elisa分析檢測試劑盒

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人電子轉移黃素蛋白β肽(ETFB)elisa分析檢測試劑盒

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