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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 |
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貨號 | GOY-01X1132 | 應用領域 | 化工 |
主要用途 | 僅供科研使用 |
產品屬性:
產品名稱 | |
規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 |
貨號 | GOY-01X1132 |
名稱 甲狀腺癌組織源細胞
2.組織來源:甲狀腺癌組織
3.產品規(guī)格:5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
4.細胞簡介:
人甲狀腺癌組織源細胞分離自癌組織,;癌(cancer)是指起源于上皮組織的惡性腫瘤,是惡性腫瘤中常見的一類,。相對應的,,起源于間葉組織的惡性腫瘤統(tǒng)稱為肉瘤。有少數惡性腫瘤不按上述原則命名,,如腎母細胞瘤,、惡性畸胎瘤等。一般人們所說的“癌癥"習慣上泛指所有惡性腫瘤,。癌癥具有細胞分化和增殖異常,、生長失去控制、浸潤性和轉移性等生物學特征,,其發(fā)生是一個多因子,、多步驟的復雜過程,分為致癌,、促癌,、演進三個過程,與吸煙,、感染,、職業(yè)暴露、環(huán)境污染,、不合理膳食,、遺傳因素密切相關。癌細胞,,是一種變異的細胞,,是產生癌癥的病源。癌細胞與正常細胞不同,,有無限增殖,、可轉化和易轉移三大特點,能夠無限增殖并破壞正常的細胞組織,。癌細胞除了分裂失控外(能進行多極分裂),,還會局部侵入周圍正常組織甚至經由體內循環(huán)系統(tǒng)或淋巴系統(tǒng)轉移到身體其他部分。分惡性和良性兩種,。
5.方法簡介:
公司實驗室分離的癌組織源細胞采用膠原酶消化,、經Percoll離心純化制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶,。
6.質量檢測:
公司實驗室分離的人甲狀腺癌組織源細胞經檢測,,純度可達90%以上,且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌等。
7.培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 梭形,、多角形
傳代特性 可傳5代左右,;3代以內狀態(tài)佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%,;CO2,,5%
冷凍保存細胞之方法?
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存,。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下,, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時,, 以防止冰晶過大,,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,,惟存活率稍微降低一些,。
培養(yǎng)操作:
1)復蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻,。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或將 細胞懸液加入 10cm 皿中,,加入約 8ml 培養(yǎng)基,,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度,。
2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,,即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣,、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,,可進行細胞凍存,。下面 T25 瓶為類;
1. 細胞凍存時,,棄去培養(yǎng)基后,,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 脫 落后,,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,,可使用血球計數板計數。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清,。加 1ml 血清重懸細胞,,根據細胞數量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,,DMSO 終濃度為 10%,,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,,注意凍 存管做好標識,。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,,2 個小時以后轉入液氮灌儲存,。記錄凍存管位置以便下次拿取,。
實驗報告:
產品僅用于科研一、分離與培養(yǎng):
1,、無菌條件下,,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,后將成1mm3左右大??;
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復此步驟2-3次,,直至組織*被消化;
4,、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,,1200r/min 離心10min,棄去上清,,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
5,、差速貼壁1h后,,吸出培養(yǎng)基,,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二,、免疫熒光鑒定:
1,、待心房肌細胞生長至80%融合時,,棄去培養(yǎng)基,,用溫育的PBS沖洗細胞2次,,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min,;
2、PBS沖洗細胞2次,,每次10min,,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3,、PBS沖洗細胞2次,,每次10min,,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min,;
4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5,、PBS沖洗細胞3次,每次10min,,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h;
6,、用PBS沖洗3次,每次10min,,后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
擬熱帶假絲酵母 生孢梭菌凍干粉
許旺酵母變種 棉花立枯菌
玫瑰紅瓊脂培養(yǎng)基90mm 伴放線放線桿菌
煙酸芽孢桿菌 頂頭孢霉
長野解普魯蘭桿菌 黃色短桿菌
大鼠吲哚胺2,3-雙加氧酶(IDO)elisa檢測試劑盒
大鼠抑制素結合蛋白(INHBP)elisa檢測試劑盒
大鼠抑制素B(INH-B)elisa檢測試劑盒
大鼠抑制素A(INH-A)elisa檢測試劑盒
大鼠抑胃肽(GIP)elisa檢測試劑盒
甲狀腺癌組織源細胞人甘油二酯(DAG)elisa分析檢測試劑盒
人甘油二酯(DAG)elisa檢測試劑盒
人甘油醛-3 - 磷酸脫氫酶(GAPDH/G3PDH)elisa分析檢測試劑盒
人甘油醛-3 - 磷酸脫氫酶(GAPDH/G3PDH)elisa檢測試劑盒
人甘油三酯(TG)elisa分析檢測試劑盒
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