細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中,，根據(jù)要求可始終保持細胞活力,，并可長時間監(jiān)控,、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態(tài),、結(jié)構(gòu),、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH,、溫度,、氧氣、二氧化碳,、張力等物理化學的條件,，可以根據(jù)實際需要進行人為的控制，同時,，可以施加化學,、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下,。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,，需要時,，可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察,、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡,、熒光顯微鏡,、電子顯微鏡、流式細胞術(shù),、激光共焦顯微鏡,、免疫組織化學、原位雜交,、同位素標記等各種儀器設(shè)備,。

名稱    胚肺成纖維細胞
2.組織來源：胚胎；肺組織

3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

4.細胞簡介：

人胚肺成纖維細胞分離自胚肺組織,；肺是機體的呼吸器官,，位于胸腔，左右各一,，覆蓋于心之上,。肺有分葉，左二右三,，共五葉,。肺經(jīng)肺系（指氣管、支氣管等）與喉,、鼻相連,，故稱喉為肺之門戶，鼻為肺之外竅,。成纖維細胞（Fibroblast）是疏松結(jié)締組織的主要細胞成分,，由胚胎時期的間充質(zhì)細胞分化而來。成纖維細胞較大,，輪廓清楚,，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu)，其細胞核呈規(guī)則的卵圓形,，核仁大而明顯,。成纖維細胞功能活動旺盛，細胞質(zhì)嗜弱堿性,，具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動,，在一定條件下，它可以實現(xiàn)跟纖維細胞的互相轉(zhuǎn)化,；成纖維細胞對不同程度的細胞變性,、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的胚肺成纖維細胞呈圓形,、折光性良好,，懸浮于培養(yǎng)基中。30min細胞貼壁,，其中部分開始伸出偽足,，表現(xiàn)為小的突起,；6h后細胞基本貼壁*,，伸展成梭形,，胞核清晰，分布較均勻,，散在生長,，不聚集成團；細胞生長迅速,，5-7天即呈融合狀態(tài),，細胞排列緊密，有的交叉重疊生長,，平坦,、胞體較大，細胞質(zhì)透明,，細胞核較大,，呈橢圓形，顏色淡,。細胞融合,，并彼此連接成網(wǎng)狀；細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布,。細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布,。該細胞在合成和分泌細胞因子、維持血管內(nèi)外和凝血和纖溶的的動態(tài)平衡中起重要作用,。

5.方法簡介：

公司實驗室分離的人胚肺成纖維細胞采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測：

公司實驗室分離的人胚肺成纖維細胞經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細菌,、酵母和真菌等,。

7.培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%,；CO2,，5%

使用方法：
收到細胞后，請按照以下方法進行操作,。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,，75%酒精消毒，拆下封口膜,，放入37℃,，5% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜，以穩(wěn)定細胞狀態(tài),。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng),。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細胞一次,；
2) 添加0.125%胰消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察,，待細胞回縮變圓后吸棄消化液,，再加入*培養(yǎng)液終止消化,；
3) 用吸管輕輕吹打混勻,，按1:2或1:3等適當?shù)谋壤M行接種傳代,，然后補充新鮮的*培養(yǎng)基至5mL,，放入37℃，5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
4) 待細胞*貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基,。

細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO,，貨號21875-091)，90%,；優(yōu)質(zhì)胎牛血清,，10%,。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%,；二氧化碳,，5%,。 溫度：37℃,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清,，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍,，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液,，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度,。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng),。
對于懸浮細胞,，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM,，常溫條件下離心5分鐘,，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。

清酒乳桿菌清酒亞種   銅綠假單胞菌

枯草芽孢桿菌黑色變種凍干粉   厚孢根霉

米氏硫胺素芽孢桿菌   卡爾斯伯酵母

蠟狀芽孢桿菌   枯草芽孢桿菌枯草亞種

玉蕈、真姬菇   鳳尾菇,、漏斗狀側(cè)耳
大鼠腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)elisa檢測試劑盒免費代測

大鼠腫瘤壞死因子γ(TNF-γ)elisa檢測試劑盒

大鼠腫瘤壞死因子β(TNF-β)elisa檢測試劑盒

大鼠腫瘤壞死因子α(TNF-α)elisa檢測試劑盒

大鼠腫瘤壞死因子(配體)超家族成員14(TNFSF14)elisa檢測試劑盒免費代測
胚肺成纖維細胞人黑色素瘤相關(guān)抗原D4(MAGED4/MAGED4B)elisa分析檢測試劑盒

人黑色素濃縮激素(MCH)elisa分析檢測試劑盒

人黑色素細胞抗體(MC Ab)elisa分析檢測試劑盒

人亨廷頓相關(guān)蛋白1(HAP1)elisa分析檢測試劑盒

人橫紋肌輔肌動蛋白α(sm Actinin-α )elisa分析檢測試劑盒
我司全程提供細胞生物體,、生長特性、來源,、器官,、類型、形態(tài),、培養(yǎng)條件,、應(yīng)用、組織,、凍存條件等復(fù)蘇及凍存細胞株說明書信息,，我們專業(yè)您的細胞系實驗，讓您實驗再無煩擾,！產(chǎn)品僅用于科研