名稱    小鼠支氣管平滑肌細胞
2.組織來源：支氣管組織

3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

4.細胞簡介：

小鼠支氣管平滑肌細胞分離自支氣管組織；支氣管（Bronchi）,，是指由支氣管分出的各級分枝,，由支氣管分出的一級支氣管，即左,、右主支氣管,。左主支氣管與右主支氣管相比較，前者較細長,，走向傾斜；后者較粗短,，走向較前者略直,，所以經(jīng)支氣管墮入的異物多進入右主支氣管。支氣管和支氣管還有以區(qū)別就是,，支氣管是以“C"型的支氣管軟骨為支架,，而支氣管不是。支氣管平滑肌細胞主要功能：①支氣管平滑肌細胞能維持支氣管張力,，保持支氣管形態(tài),；②支氣管平滑肌特異的超微結(jié)構特點和調(diào)節(jié)機制是支氣管正常生理功能的基礎；③支氣管平滑肌通過分泌細胞因子和趨化因子等促炎介質(zhì),，發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)功能,。支氣管平滑肌細胞原代分離培養(yǎng)3天后，可見細胞貼壁伸展,，細胞形態(tài)大小不一,，呈梭形、不規(guī)則形,、三角形或扇形,，核卵圓形、居中,；2周后細胞匯合,，多數(shù)細胞伸展呈長梭形，胞漿豐富,，有分枝狀突起,，細胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長，高低起伏,；細胞密度低時,，常交織成網(wǎng)狀,；密度高時，則排列為旋渦狀或柵欄狀,。傳代后細胞生長較快,，4-6天即可匯合,，并保持上述形態(tài)學特征和生長特點,。

5.方法簡介：

公司實驗室分離的小鼠支氣管平滑肌細胞采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶,。

6.質(zhì)量檢測：

公司實驗室分離的小鼠支氣管平滑肌細胞經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細菌,、酵母和真菌等,。

7.培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳3代左右

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%,；CO2,，5%
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細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細胞活力,，并可長時間監(jiān)控,、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態(tài)、結(jié)構,、生命活動等,。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度,、氧氣,、二氧化碳、張力等物理化學的條件,，可以根據(jù)實際需要進行人為的控制,，同時，可以施加化學,、物理,、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下,。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時,，可采用克隆化等方法使細胞達到純化,。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術：如倒置生物顯微鏡,、熒光顯微鏡、電子顯微鏡,、流式細胞術,、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學,、原位雜交,、同位素標記等各種儀器設備。

使用方法：
收到細胞后,，請按照以下方法進行操作,。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒,，拆下封口膜,，放入37℃，5% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜,，以穩(wěn)定細胞狀態(tài),。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,，用PBS清洗細胞一次,；
2) 添加0.125%胰消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察,，待細胞回縮變圓后吸棄消化液,，再加入*培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻,，按1:2或1:3等適當?shù)谋壤M行接種傳代,，然后補充新鮮的*培養(yǎng)基至5mL，放入37℃,，5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
4) 待細胞*貼壁后，培養(yǎng)觀察,。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基,。

細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091),，90%,；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%,。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%；二氧化碳,，5%,。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3）凍存液：90%血清,，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配,，液氮儲存,。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng),。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞,，1000RPM,，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。

清酒酵母   亞麻刺盤孢

玫瑰紅表面培養(yǎng)基60mm/25cm2   保加利亞乳桿菌

粘質(zhì)沙雷氏菌   枯草芽孢桿菌深黑變種

過渡原囊菌   香茅醇假單胞菌

多形魯氏酵母   土曲霉
大鼠腫瘤壞死因子α(TNFα)elisa檢測試劑盒

大鼠腫瘤蛋白p53(TP53)elisa檢測試劑盒

大鼠中性鞘磷脂酶(NSMASE)elisa檢測試劑盒

大鼠中性粒細胞明膠酶關聯(lián)脂質(zhì)運載蛋白(NGAL)elisa檢測試劑盒

大鼠中性粒細胞激活蛋白3(NAP3)elisa檢測試劑盒
小鼠支氣管平滑肌細胞人核因子κB受體活化劑配體（RANKL）elisa檢測試劑盒

人核因子κB受體活化因子（RANK）elisa檢測試劑盒

人核因子κB抑制物α(IKK-α)elisa分析檢測試劑盒

人核因子κB抑制物β(IKK-β)elisa分析檢測試劑盒

人核轉(zhuǎn)錄因子κB（NFκB）elisa檢測試劑盒