細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：
1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控,、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況,，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu),、生命活動(dòng)等,。
2.研究條件可以人為控制
pH,、溫度、氧氣,、二氧化碳,、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制,，同時(shí),，可以施加化學(xué)、物理,、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察,，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞,，需要時(shí)，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化,。
4.研究?jī)?nèi)容便于觀察,、檢測(cè)和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡,、電子顯微鏡,、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡,、免疫組織化學(xué),、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備,。

名稱    源NK細(xì)胞
2.組織來(lái)源：外周血

3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介：

人NK細(xì)胞分離自人外周血單個(gè)核細(xì)胞,；NK細(xì)胞即自然殺傷細(xì)胞（natural killer cell，NK）是機(jī)體重要的免疫細(xì)胞,，不僅與抗腫瘤,、 抗病毒感染和免疫調(diào)節(jié)有關(guān)，而且在某些情況下參與超敏反應(yīng)和自身免疫性疾病的發(fā)生,，能夠識(shí)別靶細(xì)胞,、殺傷介質(zhì)。NK細(xì)胞來(lái)源于骨髓淋巴樣干細(xì)胞,，其分化,、發(fā)育依賴于骨髓及胸腺微環(huán)境,，主要分布于骨髓,、外周血、肝,、脾,、肺和淋巴結(jié),。NK細(xì)胞不同于T、B細(xì)胞,，是一類無(wú)需預(yù)先致敏就能非特異性殺傷腫瘤細(xì)胞和病毒感染細(xì)胞的淋巴細(xì)胞,。由于NK細(xì)胞的殺傷活性無(wú)MHC限制，不依賴抗體,，因此稱為自然殺傷活性,。NK細(xì)胞胞漿豐富，含有較大的嗜天青顆粒,，顆粒的含量與NK細(xì)胞的殺傷活性呈正相關(guān),。NK細(xì)胞作用于靶細(xì)胞后殺傷作用出現(xiàn)早，在體外1小時(shí),、體內(nèi)4小時(shí)即可見(jiàn)到殺傷效應(yīng),。NK細(xì)胞的靶細(xì)胞主要有某些腫瘤細(xì)胞（包括部分細(xì)胞系）、病毒感染細(xì)胞,、某些自身組織細(xì)胞（如血細(xì)胞）,、寄生蟲(chóng)等，因此NK細(xì)胞是機(jī)體抗腫瘤,、抗感染的重要免疫因素,，也參與第Ⅱ型超敏反應(yīng)和移植物抗宿主反應(yīng)。

5.方法簡(jiǎn)介：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的人外周血NK細(xì)胞采用取外周血,、通過(guò)密度梯度離心,、差速貼壁、細(xì)胞因子誘導(dǎo)法制備而來(lái),，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。

6.質(zhì)量檢測(cè)：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的人源NK細(xì)胞經(jīng)CD56免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。

7.培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含IL-2,、IL-15、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性 懸浮

細(xì)胞形態(tài) 短梭形

傳代特性 可傳5代左右,；3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%,；CO2,，5%

使用方法：
收到細(xì)胞后,，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,，75%酒精消毒,，拆下封口膜，放入37℃,，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過(guò)夜,，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2) 添加0.125%胰消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,，37℃溫浴3min左右,；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,，再加入*培養(yǎng)液終止消化,；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,，然后補(bǔ)充新鮮的*培養(yǎng)基至5mL,，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
4) 待細(xì)胞*貼壁后,，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基,。

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO,，貨號(hào)21875-091)，90%,；優(yōu)質(zhì)胎牛血清,，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%,；二氧化碳，5%,。 溫度：37℃,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清,，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍,，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM,，常溫條件下離心5分鐘,，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。

熱帶念珠菌ATCC750凍干粉   直立毛霉

泡盛曲霉   蘇云金芽胞桿菌湯普遜亞種Bacillusthuringiensissubsp.thompsoni

水螺菌   ATCC43300凍干粉

改良馬丁瓊脂培養(yǎng)基90mm   珊瑚色諾卡氏菌

熏衣草灰鏈霉菌   紅串紅球菌
多聚半乳糖醛酸酶(PG)測(cè)試盒

果膠酯酶（PE）含量測(cè)試盒-NaOH滴定法

ⅠNAD(H)含量測(cè)試盒

ⅠNAD(H)含量測(cè)試盒

ⅠNAD(H)含量測(cè)試盒
源NK細(xì)胞人絨毛膜促性腺激素（HCG）elisa檢測(cè)試劑盒

人絨毛膜促性腺激素β（β-HCG）elisa檢測(cè)試劑盒

人乳酸脫氫酶（LDH）elisa檢測(cè)試劑盒

人乳鐵蛋白（LTF）elisa檢測(cè)試劑盒

人沙眼衣原體樣活性因子（CPAF）elisa檢測(cè)試劑盒
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