我司全程提供細(xì)胞生物體,、生長(zhǎng)特性,、來(lái)源、器官,、類型、形態(tài)、培養(yǎng)條件,、應(yīng)用,、組織、凍存條件等復(fù)蘇及凍存細(xì)胞株說(shuō)明書(shū)信息,，我們專業(yè)您的細(xì)胞系實(shí)驗(yàn),，讓您實(shí)驗(yàn)再無(wú)煩擾！產(chǎn)品僅用于科研

名稱    小鼠腹膜間皮細(xì)胞
2.組織來(lái)源：腹膜組織

3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介：

小鼠腹膜間皮細(xì)胞分離自腹膜組織,；腹膜是存在于高等脊椎動(dòng)物腹腔中的一層黏膜,，主要由間皮細(xì)胞構(gòu)成，藉由結(jié)締組織的支持所形成的一層膜狀組織,。腹膜包覆大部分腹腔內(nèi)的器官,，能分泌黏液潤(rùn)濕臟器的表面，減輕臟器間的摩擦,。腹腔臟器的血液,、淋巴和神經(jīng)組織經(jīng)由腹膜與外界相連；腹膜也具有吸收撞擊保護(hù)內(nèi)臟的效果,。腹膜（peritoneum）為全身面積大,、配布復(fù)雜的漿膜，由皮及少量結(jié)締組織構(gòu)成,，薄而光滑,，呈半透明狀。襯于腹,、盆腔壁內(nèi)表面的腹膜稱為壁腹膜（parietal-peritoneum）或腹壁薄層,；覆蓋腹、盆腔器表面的部分稱為臟腹膜（visceral-peritoneum）腹膜或腹膜臟層,。臟腹膜與壁腹膜互相延續(xù),、移行，共同圍成不規(guī)則的潛在性腔隙,，稱為腹膜腔（peritoneal-cavity）,。腹膜腔是臟、壁兩層腹膜之間相互移行圍成的潛在性間隙,。腹膜腔內(nèi)有少量漿液,，在臟器活動(dòng)時(shí)可減少摩擦。腹膜間皮細(xì)胞屬于上皮組織中的單層扁平上皮,，是覆蓋于腹膜表面的一層細(xì)胞,。間皮細(xì)胞是構(gòu)成間皮的細(xì)胞，正常大小約為15-25微米,，細(xì)胞常呈圓形或者卵圓形,。其功用是提供潤(rùn)滑，使器官與器官、器官與胸膜與腹膜間都能得到良好的保護(hù),，不會(huì)互相磨損受傷,。而間皮所的潤(rùn)滑和保護(hù)作用就是靠間皮細(xì)胞所分泌的物質(zhì)來(lái)達(dá)成，分泌物多半為細(xì)胞外基質(zhì),、玻尿酸類物質(zhì),。

5.方法簡(jiǎn)介：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠腹膜間皮細(xì)胞采用混合膠原酶消化法制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。

6.質(zhì)量檢測(cè)：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠腹膜間皮細(xì)胞經(jīng)PCK,、Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。

7.培養(yǎng)信息：

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養(yǎng)基 含FBS,、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣

傳代特性 可傳3代左右

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%；CO2,，5%
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：
1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力,，并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控,、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài),、結(jié)構(gòu),、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
pH,、溫度,、氧氣、二氧化碳,、張力等物理化學(xué)的條件,，可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制，同時(shí),，可以施加化學(xué),、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察,，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下,。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時(shí),，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化,。
4.研究?jī)?nèi)容便于觀察、檢測(cè)和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡,、熒光顯微鏡,、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù),、激光共焦顯微鏡,、免疫組織化學(xué)、原位雜交,、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備,。

使用方法：
收到細(xì)胞后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作,。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,，75%酒精消毒，拆下封口膜,，放入37℃,，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過(guò)夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次,；
2) 添加0.125%胰消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察,，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,，再加入*培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻,，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,，然后補(bǔ)充新鮮的*培養(yǎng)基至5mL，放入37℃,，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
4) 待細(xì)胞*貼壁后，培養(yǎng)觀察,。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基,。
忍冬木層孔菌   干酪乳桿菌干酪亞種

煙草疫霉   紫色小單孢菌(絳紅小單孢菌)

灰色鏈霉菌   解淀粉芽孢桿菌

紅平紅球菌   ATCC6538凍干粉

枯草芽孢桿菌黑色變種AS1.433凍干粉南京便診   木素木霉
高密度脂蛋白(HDL-C)檢測(cè)試劑盒100T

乙酰酯酶（T-CHE）檢測(cè)試劑盒50T

DHE-ROS活性氧檢測(cè)試劑盒200T

細(xì)胞培養(yǎng)

細(xì)胞消化液（含EDTA）0.25%；0.02% 100ml
小鼠腹膜間皮細(xì)胞人胰島素抗體（Anti-Ins）elisa檢測(cè)試劑盒

人胰島素生長(zhǎng)因子1（IGF-1）elisa檢測(cè)試劑盒

人胰島素生長(zhǎng)因子Ⅱ（IGF-Ⅱ）elisa檢測(cè)試劑盒

人胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋1（IGFBP-1）elisa檢測(cè)試劑盒

人胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋2（IGFBP-2）elisa檢測(cè)試劑盒
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091),，90%,；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%,。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%；二氧化碳,，5%,。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3）凍存液：90%血清,，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配,，液氮儲(chǔ)存,。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞,，1000RPM,，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。