我司全程提供細(xì)胞生物體,、生長(zhǎng)特性,、來(lái)源、器官,、類(lèi)型,、形態(tài)、培養(yǎng)條件,、應(yīng)用,、組織、凍存條件等復(fù)蘇及凍存細(xì)胞株說(shuō)明書(shū)信息,，我們專(zhuān)業(yè)您的細(xì)胞系實(shí)驗(yàn),，讓您實(shí)驗(yàn)再無(wú)煩擾！產(chǎn)品僅用于科研

名稱(chēng)    大鼠椎間盤(pán)纖維環(huán)細(xì)胞
2.組織來(lái)源：椎間盤(pán)組織

3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介：

大鼠椎間盤(pán)纖維環(huán)細(xì)胞分離自椎間盤(pán)組織,；椎間盤(pán)是位于脊柱兩椎體之間,，由軟骨板、纖維環(huán),、髓核組成的一個(gè)密封體,。上下有軟骨板，是透明軟骨復(fù)蓋于椎體上,，下面骺環(huán)中間的骨面,。上下的軟骨板與纖維環(huán)一起將髓核密封起來(lái)。纖維環(huán)由膠原纖維束的纖維軟骨構(gòu)成,，位于髓核的四周,。纖維環(huán)的纖維束相互斜行交叉重疊，使纖維環(huán)成為堅(jiān)實(shí)的組織,，能承受較大的彎曲和扭轉(zhuǎn)負(fù)荷,。纖維環(huán)的前側(cè)及兩側(cè)較厚，而后側(cè)較薄,。纖維環(huán)的前部有強(qiáng)大的前縱韌帶,，后側(cè)的后縱韌帶較窄、較薄,。纖維環(huán)細(xì)胞密度為9000個(gè)細(xì)胞/mm3,，其外層的細(xì)胞呈梭型,，主要屬于纖維細(xì)胞，內(nèi)層細(xì)胞呈圓形,，主要屬于軟骨細(xì)胞,。在培養(yǎng)的情況下，用透射電鏡觀察則有許多共同的超微結(jié)構(gòu)表現(xiàn),，它們的核較圓,，核仁較明顯。細(xì)胞質(zhì)內(nèi)可見(jiàn)大量的附有核糖體顆粒的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和滑面內(nèi)質(zhì)網(wǎng),。細(xì)胞質(zhì)內(nèi)線粒體多,，為橢圓形，有的可看到雙層單位膜,，由單位膜包繞初級(jí)深酶體和次級(jí)深酶體,。細(xì)胞質(zhì)內(nèi)有一系列的扁平囊及小泡主成的高爾基復(fù)合體和分泌顆粒，纖維環(huán)細(xì)胞合成分泌蛋白多糖及膠原纖維的能力很旺盛,，保證纖維環(huán)生理代謝活動(dòng)所需的構(gòu)造物質(zhì)的供給,。一但這種供給減少，纖維環(huán)的生物性能就會(huì)減弱,，椎間盤(pán)開(kāi)始退變,。

5.方法簡(jiǎn)介：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠椎間盤(pán)纖維環(huán)細(xì)胞采用膠原酶-中性聯(lián)合消化法并結(jié)合軟骨細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。

6.質(zhì)量檢測(cè)：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠椎間盤(pán)纖維環(huán)細(xì)胞經(jīng)Ⅰ型膠原蛋白免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS,、生長(zhǎng)添加劑,、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 梭形,、多角形

傳代特性 可傳5代左右,；3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%,；CO2,，5%
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：
1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控,、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況,，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu),、生命活動(dòng)等,。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度,、氧氣,、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件,，可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制,，同時(shí),，可以施加化學(xué),、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察,，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下,。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類(lèi)型的細(xì)胞,，需要時(shí),，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究?jī)?nèi)容便于觀察,、檢測(cè)和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡,、熒光顯微鏡、電子顯微鏡,、流式細(xì)胞術(shù),、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué),、原位雜交,、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備。

使用方法：
收到細(xì)胞后,，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作,。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒,，拆下封口膜,，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過(guò)夜,，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次,；
2) 添加0.125%胰消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察,，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,，再加入*培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻,，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,，然后補(bǔ)充新鮮的*培養(yǎng)基至5mL，放入37℃,，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
4) 待細(xì)胞*貼壁后，培養(yǎng)觀察,。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基,。
施氏假單胞菌   膜醭畢赤酵母

白色念珠菌AS2.2086凍干粉南京便診   巴西毛殼

裂褶菌   焦曲霉

酪梭菌   豌豆根瘤菌

擬熱帶假絲酵母   蘇云金芽胞桿菌蠟螟亞種Bacillusthuringiensissubsp.galleriae
馬(cAMP)elisa分析檢測(cè)試劑盒

馬環(huán)磷酸鳥(niǎo)苷(cGMP)elisa分析檢測(cè)試劑盒

馬過(guò)氧化氫酶(CAT)elisa分析檢測(cè)試劑盒

馬甘肽還原酶(GSR)elisa分析檢測(cè)試劑盒

馬睪酮(T)elisa分析檢測(cè)試劑盒
大鼠椎間盤(pán)纖維環(huán)細(xì)胞細(xì)菌膜蛋白提取試劑盒（2D電泳用）100T

細(xì)菌膜蛋白提取試劑盒（2D電泳用）50T

細(xì)菌膜蛋白提取試劑盒100T

細(xì)菌膜蛋白提取試劑盒50T

細(xì)菌外膜蛋白提取試劑盒100T
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091),，90%,；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%,。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%；二氧化碳,，5%,。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3）凍存液：90%血清,，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配,，液氮儲(chǔ)存,。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM,，常溫條件下離心5分鐘,，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。