培養(yǎng)操作：
1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻,。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液,，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?/span> 細胞懸液加入 10cm 皿中,，加入約 8ml 培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過夜）,。第二天換液并 檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng),。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣,、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次,。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化,。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存,。下面 T25 瓶為類,；
1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后,，PBS 清洗一遍后加入 1ml ,，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,，可使用血球計數(shù)板計數(shù),。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,，根據(jù)細胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%,，細胞密度不低于1x106/ml,，每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液，注意凍 存管做好標識,。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中,，放入-80 度冰箱，2 個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存,。記錄凍存管位置以便下次拿取,。

產(chǎn)品屬性：

名稱    小鼠骨細胞
2.組織來源：骨組織

3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

4.細胞簡介：

小鼠骨細胞分離自骨組織；骨組織的細胞成分包括骨原細胞,、成骨細胞,、骨細胞和破骨細胞。只有骨細胞存在于骨組織內(nèi),，其他三種細胞均位于骨組織的邊緣,。骨細胞（Osteocyte）是人體骨骼中主要的細胞成分。在成年人骨骼中,，骨細胞占細胞總數(shù)量的90%～95%,，大約是成骨細胞數(shù)量的20倍。骨細胞生長在骨骼內(nèi)部的骨基質(zhì)中。骨細胞的細胞體呈梭形或類圓形,，位于基質(zhì)構成的骨陷窩內(nèi),。與神經(jīng)細胞類似，每個骨細胞具有大量向外延伸的突觸,，而這些突觸均位于由骨基質(zhì)構成的骨小管結(jié)構中,。通過這些突觸，骨細胞能夠與骨表面的細胞,、周圍其它的骨細胞進行“交流",。普遍認為，骨細胞起源于成骨細胞,。在骨形成的終末階段,，成骨細胞將可能有3種不同的歸宿：分化成為骨細胞、轉(zhuǎn)移至骨表面成為暫不活動的成骨細胞,、進入程序死亡過程（凋亡）,。骨細胞為扁橢圓形多突起的細胞，核亦扁圓,、染色深,。胞質(zhì)弱嗜堿性。電鏡下,，胞質(zhì)內(nèi)有少量溶酶體,、線粒體和粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，高爾基復合體亦不發(fā)達,。骨細胞夾在相鄰兩層骨板間或分散排列于骨板內(nèi),。相鄰骨細胞的突起之間有縫隙連接。在骨基質(zhì)中,，骨細胞胞體所占據(jù)的橢圓形小腔,，稱為骨陷窩，其突起所在的空間稱骨小管,。相鄰的骨陷窩借骨小管彼此通連,。骨陷窩和骨小管內(nèi)均含有組織液，骨細胞從中獲得養(yǎng)分,。

5.方法簡介：

公司實驗室分離的小鼠骨細胞采用膠原酶消化法制備而來,，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測：

公司實驗室分離的小鼠骨細胞經(jīng)骨鈣素免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體,、細菌、酵母和真菌等,。

7.培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 梭形,、多角形

傳代特性 屬于終末分化細胞；屬于不增殖細胞群

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%,；CO2，5%

實驗報告：
產(chǎn)品僅用于科研一,、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下,，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,，然后用PBS將此組織塊清洗2次，后將成1mm3左右大??；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶）,，混懸10s,，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液,，自然沉淀并收集上清,，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3,、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液,，混懸10s，置37℃消化10 min后,，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化,；
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min,，棄去上清,，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶,，放置于37℃ ,，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
5、差速貼壁1h后,，吸出培養(yǎng)基,，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二,、免疫熒光鑒定：
1,、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基,，用溫育的PBS沖洗細胞2次,，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min,；
2,、PBS沖洗細胞2次，每次10min,，然后在4℃條件下,，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3,、PBS沖洗細胞2次,，每次10min，然后在室溫條件下,，用4% BSA封閉細胞30min,；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜,；
5、PBS沖洗細胞3次,，每次10min,，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h,；
6,、用PBS沖洗3次，每次10min,，后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
蘇云金芽胞桿菌蠟螟亞種Bacillusthuringiensissubsp.galleriae   金頭曲霉

假芝   孢囊桿菌

屎腸球菌(屎鏈球菌)   改良馬丁培養(yǎng)基100ml

異型酒香酵母   綠色木霉=木素木霉

雪白根霉   粘液玫瑰單胞菌
犬胃動素（MTL）elisa檢測試劑盒

犬烯醇化酶（NSE）elisa檢測試劑盒

犬血管活性腸肽（VIP）elisa檢測試劑盒

犬脂肪酸結(jié)合蛋白（FABP）elisa檢測試劑盒

犬脂肪酸結(jié)合蛋白elisa檢測試劑盒
小鼠骨細胞小鼠S100鈣結(jié)合蛋白A10(S100A10)elisa檢測試劑盒

小鼠S100鈣結(jié)合蛋白A11(S100A11)elisa檢測試劑盒

小鼠S100鈣結(jié)合蛋白A4(S100A4)elisa檢測試劑盒

小鼠S100鈣結(jié)合蛋白A6(S100A6)elisa檢測試劑盒

小鼠S100鈣結(jié)合蛋白A7(S100A7)elisa檢測試劑盒

冷凍保存細胞之方法？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存,。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下,， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時,， 以防止冰晶過大,，造成細胞大量死亡,，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些,。