培養(yǎng)操作：
1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中,，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）,。第二天換液并 檢查細胞密度,。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣,、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落,，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出,，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液,，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時,，可進行細胞凍存,。下面 T25 瓶為類；
1. 細胞凍存時,，棄去培養(yǎng)基后,，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后,，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清,。加 1ml 血清重懸細胞,，根據細胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻,，DMSO 終濃度為 10%,，細胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,，注意凍 存管做好標識,。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱,，2 個小時以后轉入液氮灌儲存,。記錄凍存管位置以便下次拿取。

產品屬性：

名稱    小鼠脊髓星形膠質細胞
2.組織來源：脊髓組織

3.產品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

4.細胞簡介：

小鼠脊髓星形膠質細胞分離自脊髓組織,；脊髓是細細的管束狀的神經結構,，位于脊柱的椎管內且被脊椎保護,；是源自腦的中樞神經系統(tǒng)延伸部分。中樞神經系統(tǒng)的細胞依靠復雜的聯(lián)系來處理傳遞信息,。脊髓的主要功能是傳送腦與外周之間的神經信息。人和脊椎動物中樞神經系統(tǒng)的一部分,，在椎管里面,，上端連接延髓，兩旁發(fā)出成對的神經,，分布到四肢,、體壁和內臟。脊髓的內部有一個H形（蝴蝶型）灰質區(qū),，主要由神經細胞構成,；在灰質區(qū)周圍為白質區(qū)，主要由有髓神經纖維組成,；脊髓是許多簡單反射的中樞,。脊髓兩旁發(fā)出許多成對的神經（稱為脊神經）分布到全身皮膚、肌肉和內臟器官,。脊髓是周圍神經與腦之間的通路,，也是許多簡單反射活動的低級中樞。按脊神經的出入可把脊髓也分為相應的31節(jié),，31對脊神經就是由不同的脊椎發(fā)出的,。神經系統(tǒng)基本的結構和功能單位是神經元，即神經細胞,，其大小和外觀在中樞神經系統(tǒng)中差異很大,。但都具有胞體和樹突、軸突,。胞體又叫核周體,，內含神經絲、微管,、內質網,、游離核糖體和一個有明顯核仁的核。一些大神經元突起的粗面內質網可用Nissl染色顯示,，在光鏡下是灰藍色斑塊狀,，稱為尼氏小體。樹突和軸突是神經元的突起,，能在神經元之間傳遞電沖動,，突起的大小和形態(tài)各不相同，很難用常規(guī)的顯微鏡鑒別,。

5.方法簡介：

公司實驗室分離的小鼠脊髓星形膠質細胞采用消化法制備而來,，細胞總量約為5×10?cells/瓶,。

6.質量檢測：

公司實驗室分離的小鼠脊髓星形膠質細胞經GFAP免疫熒光鑒定，純度可達90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細菌、酵母和真菌等,。

7.培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 梭形,、多角形

傳代特性 可傳3代左右

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%,；CO2,，5%

實驗報告：
產品僅用于科研一、分離與培養(yǎng)：
1,、無菌條件下,，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次,，后將成1mm3左右大?。?/span>
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶）,，混懸10s，置37℃條件下消化10min,，之后用滴管吹打制成單細胞懸液,，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,；
3,、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s,，置37℃消化10 min后,，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次,，直至組織*被消化,；
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min,，棄去上清,，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶,，放置于37℃ ,，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5,、差速貼壁1h后,，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),；
二、免疫熒光鑒定：
1,、待心房肌細胞生長至80%融合時,，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次,，每次10min,，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2,、PBS沖洗細胞2次,，每次10min，然后在4℃條件下,，用0.1％Triton X-100透膜15min,；
3、PBS沖洗細胞2次,，每次10min,，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min,；
4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜,；
5,、PBS沖洗細胞3次，每次10min,，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗,， 37℃條件下放置1h；
6,、用PBS沖洗3次,，每次10min，后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
蘇云金芽胞桿菌庫爾斯塔克亞種 Bacillus thuringiensis subsp. kurstaki   匍枝根霉

卷枝毛霉   馬克斯克魯維酵母

忍冬木層孔菌   銅綠假單胞菌(綠膿桿菌)

毛木耳(紫木耳,、黃背木耳)   綠色鏈霉菌

嗜熱鏈球菌   枯草芽孢桿菌黑色變種凍干粉
犬α-3干擾素(IFN-α3)elisa檢測試劑盒免費代測

犬α1微球蛋白(α1-MG)elisa檢測試劑盒

犬α-1/2干擾素(IFN-α1/2)elisa檢測試劑盒

犬S100鈣結合蛋白A12/鈣粒蛋白C(S100A12)elisa檢測試劑盒

犬S100B蛋白(S100B)elisa檢測試劑盒免費代測
小鼠脊髓星形膠質細胞小鼠M型肌酸激酶(CKM)elisa檢測試劑盒

小鼠NADH脫氫酶1(ND1)elisa檢測試劑盒

小鼠NADPH氧化酶1(NOX1)elisa分析檢測試劑盒

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小鼠NAD依賴性蛋白脫乙酰酶sirtuin-1(SIRT1)elisa分析檢測試劑盒

冷凍保存細胞之方法,？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下,， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存,。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大,，造成細胞大量死亡,，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些,。