詳細介紹
我司全程提供細胞生物體、生長特性,、來源,、器官,、類型,、形態(tài),、培養(yǎng)條件、應用,、組織,、凍存條件等復蘇及凍存細胞株說明書信息,我們專業(yè)您的細胞系實驗,,讓您實驗再無煩擾,!產(chǎn)品僅用于科研
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X1347 |
名稱 小鼠口腔粘膜成纖維細胞
2.組織來源:口腔黏膜組織
3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
4.細胞簡介:
小鼠口腔粘膜成纖維細胞分離自口腔粘膜組織;口腔(oral cavity)是消化道的起始部分,。前借口裂與外界相通,,后經(jīng)咽峽與咽相續(xù)??谇粌?nèi)有牙、舌等器官,??谇坏那氨跒榇健缺跒轭a,、頂為腭,、口腔底為黏膜和肌等結構??谇唤枭?、下牙弓分為前外側部的口腔前庭(oral vestibule)和后內(nèi)側部的固有口腔(oral cavity proper);當上,、下頜牙咬合時,,口腔前庭與固有口腔之間可借第三磨牙后方的間隙相通。成纖維細胞(Fibroblast)是疏松結締組織的主要細胞成分,,由胚胎時期的間充質(zhì)細胞分化而來,。成纖維細胞較大,輪廓清楚,,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構,,其細胞核呈規(guī)則的卵圓形,核仁大而明顯,。成纖維細胞功能活動旺盛,,細胞質(zhì)嗜弱堿性,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動,,在一定條件下,,它可以實現(xiàn)跟纖維細胞的互相轉化,;成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用,。剛分離的表皮成纖維細胞呈圓形,、折光性良好,懸浮于培養(yǎng)基中,。30min細胞貼壁,,其中部分開始伸出偽足,表現(xiàn)為小的突起,;6h后細胞基本貼壁*,,伸展成梭形,胞核清晰,,分布較均勻,,散在生長,不聚集成團,;細胞生長迅速,,5-7天即呈融合狀態(tài),細胞排列緊密,,有的交叉重疊生長,,平坦、胞體較大,,細胞質(zhì)透明,,細胞核較大,呈橢圓形,,顏色淡,。細胞融合,并彼此連接成網(wǎng)狀,;細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布,。
5.方法簡介:
公司實驗室分離的小鼠口腔粘膜成纖維細胞采用-膠原酶混合酶消化后差速貼壁制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶,。
6.質(zhì)量檢測:
公司實驗室分離的小鼠口腔粘膜成纖維細胞經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,,純度可達90%以上,且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌等。
7.培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%,;CO2,,5%
細胞培養(yǎng)的優(yōu)點:
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中,根據(jù)要求可始終保持細胞活力,,并可長時間監(jiān)控,、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態(tài),、結構,、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH,、溫度,、氧氣、二氧化碳,、張力等物理化學的條件,,可以根據(jù)實際需要進行人為的控制,同時,,可以施加化學,、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,,這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,,需要時,可采用克隆化等方法使細胞達到純化,。
4.研究內(nèi)容便于觀察,、檢測和記錄
采用各種研究技術:如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡,、電子顯微鏡,、流式細胞術、激光共焦顯微鏡,、免疫組織化學,、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備,。
使用方法:
收到細胞后,,請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,,75%酒精消毒,,拆下封口膜,,放入37℃,5% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜,,以穩(wěn)定細胞狀態(tài),。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,,用PBS清洗細胞一次,;
2) 添加0.125%胰消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右,;倒置顯微鏡下觀察,,待細胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入*培養(yǎng)液終止消化,;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,,按1:2或1:3等適當?shù)谋壤M行接種傳代,然后補充新鮮的*培養(yǎng)基至5mL,,放入37℃,,5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4) 待細胞*貼壁后,,培養(yǎng)觀察,。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基。
糖蛋白染色試劑盒10 次 Rapamycin(FRAP/mTOR 抑制劑 )100μg
0酸蛋白染色試劑盒10 次 Quin-2AM1mg
標簽蛋白染色試劑盒10 次 PMSF 溶液,,10mg/mL5mL
Bradford 法蛋白定量試劑盒100mL PMA/TPA (PKC 激活劑 )1mg
Bradford 法蛋白定量試劑盒200mL Pifithrin-a(p53 抑制劑 )5mg
人CCAAT增強子結合蛋白ε(C/EBPε)elisa檢測試劑盒
人CCAAT增強子結合蛋白δ(C/EBPδ)elisa檢測試劑盒
人CCAAT增強子結合蛋白α(C/EBPα)elisa檢測試劑盒
人cAMP和cAMP抑制cGMP 3',5'循環(huán)磷酸二酯酶10A(PDE10A)elisa檢測試劑盒免費代測
人cAMP反應元件結合蛋白(CREB)elisa檢測試劑盒
小鼠口腔粘膜成纖維細胞小鼠白介素15(IL-15)elisa檢測試劑盒
小鼠白介素16(IL-16)elisa分析檢測試劑盒
小鼠白介素16(IL16)elisa檢測試劑盒
小鼠白介素16(IL-16)elisa檢測試劑盒
小鼠白介素16(IL-16)elisa檢測試劑盒免費代測
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,,貨號21875-091),90%,;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,,95%,;二氧化碳,5%,。 溫度:37℃,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,,10%DMSO,,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存,。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度,。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。