產(chǎn)品屬性：

名稱    大鼠棕色前脂肪細胞
2.組織來源：脂肪組織

3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

4.細胞簡介：

大鼠棕色前脂肪細胞分離自棕色脂肪組織,；動物體內(nèi)存在棕色和白色兩種脂肪,，白色脂肪堆積在皮下，負責儲存多余熱量；棕色脂肪負責分解引發(fā)肥胖的白色脂肪，將后者轉(zhuǎn)化成二氧化碳、水和熱量,，本身不儲存熱量。棕色脂肪組織呈棕色,，其特點是組織中有豐富的毛細血管,，脂肪細胞內(nèi)散著許多小脂滴，線粒體大而豐富,，核圓形,，位于細胞中央，這種脂肪細胞也稱為多泡脂肪細胞,。棕色脂肪組織在成年動物極少,，新生兒及冬眠動物較多,，在新生兒主要分布在肩胛間區(qū)、腋窩及頸后部等處,。棕色脂肪組織僅在嬰兒時期發(fā)揮作用,，它們堆積在新生兒肩胛處，幫助維持體溫,。隨著年齡增長,，棕色脂肪會逐漸消失。終,，動物體內(nèi)只殘存少量棕色脂肪細胞,，分布于頸部和鎖骨,。脂肪組織在體內(nèi)含有兩種主要的細胞：一種是在胞漿內(nèi)積聚脂滴的成熟脂肪細胞,；另一種是雖未在胞漿內(nèi)積聚脂滴但有這種潛能的前脂肪細胞。前脂肪細胞呈梭形,，有分裂和增殖的能力,；成熟的脂肪細胞呈圓形，已經(jīng)失去了分裂及增殖的能力,。由于前脂肪細胞是一類具有增殖和向脂肪細胞分化能力的特異化前體細胞,，與肥胖有著非常密切的關(guān)系。前脂肪細胞是一種類成纖維細胞,，在演變的過程中不斷吸收脂質(zhì),，終成為成熟的脂肪細胞。前脂肪細胞對外界機械損傷的抵抗力較強,，可望成為軟組織缺損的有益填充物,。

5.方法簡介：

公司實驗室分離的大鼠棕色前脂肪細胞采用膠原酶消化法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶,。

6.質(zhì)量檢測：

公司實驗室分離的大鼠棕色前脂肪細胞經(jīng)油紅O染色檢測,，純度可達90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳5代左右,；3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%,；CO2，5%

冷凍保存細胞之方法,？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存,。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存,。*-20 ℃不可超過1 小時,， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡,，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,，惟存活率稍微降低一些。
培養(yǎng)操作：
1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻,。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液,，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?/span> 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過夜）,。第二天換液并 檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng),。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣,、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次,。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化,。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出,，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類,；
1. 細胞凍存時,，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ,，細胞變圓 脫 落后,，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù),。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清,。加 1ml 血清重懸細胞，根據(jù)細胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,，輕輕混勻,，DMSO 終濃度為 10%，細胞密度不低于1x106/ml,，每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,，注意凍 存管做好標識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中,，放入-80 度冰箱,，2 個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取,。
實驗報告：
產(chǎn)品僅用于科研一、分離與培養(yǎng)：
1,、無菌條件下,，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次,，后將成1mm3左右大?。?/span>
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶）,，混懸10s，置37℃條件下消化10min,，之后用滴管吹打制成單細胞懸液,，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,；
3,、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s,，置37℃消化10 min后,，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次,，直至組織*被消化,；
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min,，棄去上清,，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶,，放置于37℃ ,，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5,、差速貼壁1h后,，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),；
二,、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,，棄去培養(yǎng)基,，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min,，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min,；
2、PBS沖洗細胞2次,，每次10min,，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min,；
3,、PBS沖洗細胞2次，每次10min,，然后在室溫條件下,，用4% BSA封閉細胞30min；
4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5,、PBS沖洗細胞3次,，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗,， 37℃條件下放置1h,；
6、用PBS沖洗3次，每次10min,，后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
炭疽桿菌致死因子LF抗體

磷酸化相關(guān)死亡促進因子抗體

肌動蛋白樣蛋白6A抗體

磷酸化紅細胞陰離子交換蛋白1抗體

障礙自整合蛋白BAF抗體
人B群鏈球菌多糖抗體(IgG)elisa分析檢測試劑盒

人B-淋巴細胞趨化因子1(BLC-1/CXCL13)elisa分析檢測試劑盒

人B淋巴細胞抗原(CD20)elisa分析檢測試劑盒

人blca-4 elisa分析檢測試劑盒

人blca-1 elisa分析檢測試劑盒
大鼠棕色前脂肪細胞小鼠癌胚抗原(CEA/CD66)elisa檢測試劑盒

小鼠氨基端前腦鈉素(NT-ProBNP)elisa檢測試劑盒

小鼠氨基端前心鈉肽(NT-ProANP)elisa檢測試劑盒

小鼠氨基己糖苷酶Aα(HEXα)elisa檢測試劑盒

小鼠氨基己糖苷酶Bβ(HEXβ)elisa檢測試劑盒