細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細胞活力,，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,，包括活細胞的形態(tài),、結構、生命活動等,。
2.研究條件可以人為控制
pH,、溫度、氧氣,、二氧化碳,、張力等物理化學的條件,，可以根據(jù)實際需要進行人為的控制,，同時，可以施加化學,、物理,、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下,。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時,，可采用克隆化等方法使細胞達到純化,。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術：如倒置生物顯微鏡,、熒光顯微鏡,、電子顯微鏡、流式細胞術,、激光共焦顯微鏡,、免疫組織化學、原位雜交,、同位素標記等各種儀器設備,。

名稱    大鼠口腔上皮細胞
2.組織來源：口腔黏膜組織

3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

4.細胞簡介：

大鼠口腔上皮細胞分離自口腔黏膜組織；口腔上皮細胞是一種上皮細胞,，呈扁平,、多邊形，形狀不規(guī)則,?？谇桓鞅诙加叙つじ采w，口腔上皮細胞主要分布在口腔兩側頰部,。上皮的垂直切面上,，細胞形狀不一。緊靠基膜的一層基底細胞為矮柱狀，為具有增殖分化能力的干細胞,，部分子細胞向淺層移動,。基底層以上是數(shù)層多邊形細胞,，再上為幾層梭形或扁平細胞,。僅靠近表面幾層細胞為扁平狀，基底層細胞能不斷分裂增生,，以補充表層衰老或損傷脫落的細胞,。復層扁平上皮深層的結締組織內(nèi)有豐富的毛細血管，有利于復層扁平上皮的營養(yǎng),。

5.方法簡介：

公司實驗室分離的大鼠口腔上皮細胞先中性消化,、后-膠原酶混合消化法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶,。

6.質量檢測：

公司實驗室分離的大鼠口腔上皮細胞經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息：

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 上皮細胞樣

傳代特性 可傳1-2代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%,；CO2，5%

使用方法：
收到細胞后,，請按照以下方法進行操作,。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒,，拆下封口膜,，放入37℃，5% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜,，以穩(wěn)定細胞狀態(tài),。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,，用PBS清洗細胞一次,；
2) 添加0.125%胰消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察,，待細胞回縮變圓后吸棄消化液,，再加入*培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻,，按1:2或1:3等適當?shù)谋壤M行接種傳代,，然后補充新鮮的*培養(yǎng)基至5mL，放入37℃,，5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
4) 待細胞*貼壁后，培養(yǎng)觀察,。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基,。

細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091),，90%,；優(yōu)質胎牛血清，10%,。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%,；二氧化碳,，5%。 溫度：37℃,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配,，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍,，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液,，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度,。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞,，1000RPM,，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

天凈沙非同位素探針雜交試劑盒5次  即用型 PCR 試劑盒 3.09 mL

天凈沙非同位素探針雜交試劑盒5次  即用型 PCR 試劑盒 3.01 mL

DAB 法雜交試劑盒5次  即用型 PCR 試劑盒 2.0 9 mL

TMB 法雜交試劑盒5次  即用型 PCR 試劑盒 2.0 1 mL

ECL 法雜交檢測試劑盒5次  環(huán)狀 DNA 全基因組擴增試劑盒30 次
人CD8分子(CD8)elisa檢測試劑盒

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人CD73分子(CD73)elisa檢測試劑盒

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大鼠口腔上皮細胞小鼠白介素22(IL-22)elisa分析檢測試劑盒

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