大鼠臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞公司其它各種產(chǎn)品小鼠核轉(zhuǎn)錄因子－1（AP－1）elisa檢測試劑盒
小鼠環(huán)磷酸鳥苷（cGMP）elisa檢測試劑盒
小鼠環(huán)氧化酶2（COX-2）elisa檢測試劑盒
小鼠肌鈣蛋白I（cTnI）elisa檢測試劑盒
小鼠肌生成抑制素（MSTN）elisa檢測試劑盒

培養(yǎng)操作：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻,。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?/span> 細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）,。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度,。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次,。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化,。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類,；
1. 細(xì)胞凍存時(shí),，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ,，細(xì)胞變圓 脫 落后,，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清,。加 1ml 血清重懸細(xì)胞,，根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻,，DMSO 終濃度為 10%,，細(xì)胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液,，注意凍 存管做好標(biāo)識,。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱,，2 個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取,。

產(chǎn)品屬性：

名稱    大鼠臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞
2.組織來源：臍帶組織

3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

4.細(xì)胞簡介：

大鼠臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞分離自臍帶,；臍帶是哺乳類的連接胎兒和胎盤的管狀結(jié)構(gòu)。原來是由羊膜包卷著卵黃囊和尿膜的柄狀伸長部而形成的,。臍帶中通過尿膜的血管即臍動脈和臍靜脈,，卵黃囊的血管即臍腸系膜動脈及臍腸系膜靜脈。當(dāng)卵黃囊及其血管退化,，臍動脈和臍靜脈就發(fā)達(dá)起來,，在這些間隙中可以看到疏松的膠狀的間充質(zhì)。在子宮中,，子宮動脈在胎盤的母體部分出的毛細(xì)血管,，與胎盤的子體部胎兒毛細(xì)血管靠近，在此處母體和胎兒的血液間進(jìn)行CO2和O2,，代謝產(chǎn)物即代謝廢物和營養(yǎng)物質(zhì)的交換,。臍動脈將胎兒來的廢物運(yùn)送至胎盤，臍靜脈將O2和營養(yǎng)物質(zhì)從胎盤運(yùn)送給胎兒,。后由子宮靜脈將來自胎兒的代謝廢物運(yùn)走,，某種激素和抗體等也通過臍帶從母體移交給胎兒。臍帶中含有大量的干細(xì)胞,，干細(xì)胞是生命的種子,，它會分化成機(jī)體的各種細(xì)胞，結(jié)出各種不同的果實(shí)——血液細(xì)胞,、神經(jīng)細(xì)胞,、骨骼細(xì)胞等。干細(xì)胞是具有自我更新,、高度增殖和多項(xiàng)分化潛能的細(xì)胞群體,；這些細(xì)胞可以通過分裂維持自身細(xì)胞的特性和數(shù)量，又可進(jìn)一步分化為各種組織細(xì)胞,，從而在組織修復(fù)等方面發(fā)揮積極作用,。間充質(zhì)干細(xì)胞（MSC）是一種具有高度自我更新和多向分化潛能的干細(xì)胞,。在不同的誘導(dǎo)條件下，可分化為多種造血細(xì)胞以外的組織細(xì)胞,，并具有造血支持,、免疫調(diào)節(jié)、組織修復(fù)等作用,；目前,，多用于風(fēng)濕免疫疾病的治療。間充質(zhì)干細(xì)胞（MSCs）是一種具有自我更新和多向分化潛能的成體干細(xì)胞,，存在于骨髓,、脂肪組織、臍血及多種胎兒組織,。它可分泌多種細(xì)胞因子及生長因子,，促進(jìn)造血干細(xì)胞（HSC）的增殖與分化。MSCs還具有免疫調(diào)節(jié),、抗炎和組織修復(fù)作用,，可減輕移植物抗宿主病（GVHD）及其他移植相關(guān)并發(fā)癥,。

5.方法簡介：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞采用組織貼塊法制備而來,，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞經(jīng)CD90免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。

7.培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣

傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%,；CO2，5%

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
產(chǎn)品僅用于科研一,、分離與培養(yǎng)：
1,、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,，然后用PBS將此組織塊清洗2次,，后將成1mm3左右大?。?/span>
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶）,，混懸10s，置37℃條件下消化10min,，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,；
3,、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s,，置37℃消化10 min后,，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次,，直至組織*被消化；
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,，1200r/min 離心10min，棄去上清,，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ,，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
5、差速貼壁1h后,，吸出培養(yǎng)基,，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二,、免疫熒光鑒定：
1,、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基,，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,；
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min,，然后在4℃條件下,，用0.1％Triton X-100透膜15min,；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min,，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min,；
4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜,；
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min,，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗,， 37℃條件下放置1h；
6,、用PBS沖洗3次,，每次10min，后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
頭狀絲孢酵母   臭曲霉

寄生曲霉   鮮橙曲霉

腸膜明串珠菌   金頂側(cè)耳,、榆黃磨、金頂磨

乙型副傷寒沙門菌CMCC50094凍干粉南京便診   尿腸球菌

發(fā)根土壤桿菌(發(fā)根植物單胞菌)   哈茨木霉
人Podocin elisa檢測試劑盒

人PL7抗體/抗蘇氨酰tRNA合成酶(PL7)elisa檢測試劑盒

人PL12抗體/抗丙氨酰tRNA合成酶(PL12/AlaRS)elisa檢測試劑盒

人PC4,SFRS1互動蛋白1(PSIP1)elisa檢測試劑盒免費(fèi)代測

人P53抗體elisa檢測試劑盒
大鼠臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞小鼠叉頭框蛋白O3(FOXO3)elisa檢測試劑盒

小鼠叉頭框蛋白P3(FOXP3)elisa檢測試劑盒

小鼠腸型脂肪酸結(jié)合蛋白(FABP2)elisa檢測試劑盒

小鼠腸脂肪酸結(jié)合蛋白(iFABP)elisa分析檢測試劑盒

小鼠腸脂肪酸結(jié)合蛋白(iFABP)elisa檢測試劑盒

冷凍保存細(xì)胞之方法,？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存,。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存,。*-20 ℃不可超過1 小時(shí),， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡,，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,，惟存活率稍微降低一些。