細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細胞活力,，并可長時間監(jiān)控,、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,，包括活細胞的形態(tài)、結構,、生命活動等,。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度,、氧氣,、二氧化碳、張力等物理化學的條件,，可以根據(jù)實際需要進行人為的控制,，同時，可以施加化學,、物理,、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下,。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時,，可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內容便于觀察,、檢測和記錄
采用各種研究技術：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡,、電子顯微鏡,、流式細胞術,、激光共焦顯微鏡,、免疫組織化學、原位雜交,、同位素標記等各種儀器設備,。

名稱    小鼠骨骼肌成纖維細胞
2.組織來源：骨骼肌組織

3.產品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

4.細胞簡介：

小鼠骨骼肌成纖維細胞分離自四肢肌肉組織,；骨骼肌又稱橫紋肌，肌肉中的一種,，約占全身重量的40%,。骨骼肌纖維為長柱形的多核細胞，肌膜的外面有基膜緊密貼附,。屬于橫紋肌,，橫紋肌還包括心肌與內臟橫紋肌，其中骨骼肌主要分布于四肢,。每塊肌肉都是具有一定形態(tài)、結構和功能的器官,，有豐富的血管,、淋巴分布，在軀體神經支配下收縮或舒張,，進行隨意運動。肌肉可根據(jù)共形狀,、大小,、位置、起止點,、纖維方向和作用等命名,。依形態(tài)命名的如斜方肌、菱形肌,、三角肌,、梨狀肌等。骨骼肌成纖維細胞呈纖維狀,，不分支,，有明顯橫紋，核很多,，且都位于細胞膜下方,。骨骼肌間質中有很多成纖維細胞。成纖維細胞是結締組織的主要細胞成分,，由胚胎時期的間充質細胞分化而來,。成纖維細胞較大，輪廓清楚,，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構,，其細胞核呈規(guī)則的卵圓形，核仁大而明顯,。成纖維細胞功能活動旺盛,，細胞質嗜弱堿性,，具明顯的蛋白質合成和分泌活動，在一定條件下,，它可以實現(xiàn)跟纖維細胞的互相轉化,；成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用,。剛分離的成纖維細胞呈圓形,、折光性良好，懸浮于培養(yǎng)基中,。30min細胞貼壁,，其中部分開始伸出偽足，表現(xiàn)為小的突起,；6h后細胞基本貼壁*,，伸展成梭形，胞核清晰,，分布較均勻,，散在生長，不聚集成團,；細胞排列緊密,，有的交叉重疊生長，平坦,、胞體較大,，細胞質透明，細胞核較大,，呈橢圓形,，顏色淡。細胞融合,，并彼此連接成網(wǎng)狀,；細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。

5.方法簡介：

公司實驗室分離的小鼠骨骼肌成纖維細胞采用膠原酶消化法結合差速貼壁法制備而來,，細胞總量約為5×105cells/瓶,。

6.質量檢測：

公司實驗室分離的小鼠骨骼肌成纖維細胞經Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細菌、酵母和真菌等,。

7.培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳1-3代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%,；CO2，5%

使用方法：
收到細胞后,，請按照以下方法進行操作,。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒,，拆下封口膜,，放入37℃，5% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜,，以穩(wěn)定細胞狀態(tài),。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,，用PBS清洗細胞一次,；
2) 添加0.125%胰消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右,；倒置顯微鏡下觀察,，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入*培養(yǎng)液終止消化,；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當?shù)谋壤M行接種傳代,，然后補充新鮮的*培養(yǎng)基至5mL,，放入37℃，5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
4) 待細胞*貼壁后,，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基,。

細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO,，貨號21875-091)，90%,；優(yōu)質胎牛血清,，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%,；二氧化碳，5%,。 溫度：37℃,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配,，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍,，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液,，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度,。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞,，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘,，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。

土曲霉   粉紅寄生菌

玫瑰紅瓊脂培養(yǎng)基70mm   蛾微桿菌   ATCC 8365

北京棒桿菌   樹狀微桿菌 ATCC 4358

纖維纖維微菌   變異鏈球菌 ATCC 25175

郎比可假絲酵母   施氏假單胞菌
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小鼠骨骼肌成纖維細胞小鼠促甲狀腺激素(TSH)elisa檢測試劑盒

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