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我司全程提供細胞生物體,、生長特性,、來源、器官,、類型,、形態(tài)、培養(yǎng)條件,、應用,、組織、凍存條件等復蘇及凍存細胞株說明書信息,,我們專業(yè)您的細胞系實驗,,讓您實驗再無煩擾!產(chǎn)品僅用于科研
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X1422 |
名稱 大鼠肺小動脈平滑肌細胞
2.組織來源:肺小動脈組織
3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
4.細胞簡介:
大鼠肺小動脈平滑肌細胞分離自肺小動脈組織,;小動脈(smallartery),,管徑在0.3~1mm之間,小動脈包括粗細不等的幾級分支,,也屬肌性動脈,。較大的小動脈,內(nèi)膜有明顯的內(nèi)彈性膜,,中膜有幾層平滑肌,,外膜厚度與中膜相近,一般沒有外彈性膜,。小動脈是決定周圍循環(huán)阻力大小的主要因素,,也是調(diào)節(jié)微循環(huán)灌注量的“總開關"。典型的小動脈,,其管壁的厚度與管徑相比約為1∶2,。中膜的肌層相對比其他動脈為厚,當平滑肌在神經(jīng)支配下強力收縮時,其管腔可以*閉塞,,而使血液不能流入它所分布的毛細血管內(nèi),,從而增加了周圍血液循環(huán)的阻力。如果有許多小動脈同時收縮,,可使血壓顯著上升,。反之,當小動脈的平滑肌舒張時,,則可使大量的血液流入毛細血管,,外周阻力明顯下降,血壓降低,。終末小動脈(terminal arteri-ole)的口徑為20~30μm,;后小動脈(metar-teriole),又稱毛細血管前小動脈(precapil-lary arteriole)的口徑為12~15μm,。管壁內(nèi)均有較稀疏的平滑肌,,在毛細血管前小動脈分支的起始部分,管壁平滑肌成分增厚,,叫做毛細血管前括約?。?/span>precapillary sphinc-ter),其收縮或舒張,,可調(diào)節(jié)真毛細血管的血流量,,是調(diào)節(jié)微循環(huán)灌注量的“分開關"。
5.方法簡介:
公司實驗室分離的大鼠肺小動脈平滑肌細胞采用中性-膠原酶聯(lián)合消化法制備而來制備而來,,細胞總量約為5×10?cells/瓶,。
6.質(zhì)量檢測:
公司實驗室分離的大鼠肺小動脈平滑肌細胞經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,,且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細菌、酵母和真菌等,。
7.培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次,;
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%,;CO2,,5%
細胞培養(yǎng)的優(yōu)點:
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中,,根據(jù)要求可始終保持細胞活力,并可長時間監(jiān)控,、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,,包括活細胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu),、生命活動等,。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度,、氧氣,、二氧化碳、張力等物理化學的條件,,可以根據(jù)實際需要進行人為的控制,,同時,可以施加化學,、物理,、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴格控制之下,。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,,需要時,,可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察,、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡,、熒光顯微鏡、電子顯微鏡,、流式細胞術(shù),、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學,、原位雜交,、同位素標記等各種儀器設備。
使用方法:
收到細胞后,,請按照以下方法進行操作,。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,,拆下封口膜,,放入37℃,5% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜,,以穩(wěn)定細胞狀態(tài),。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次,;
2) 添加0.125%胰消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,,待細胞回縮變圓后吸棄消化液,,再加入*培養(yǎng)液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,,按1:2或1:3等適當?shù)谋壤M行接種傳代,,然后補充新鮮的*培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,,5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
4) 待細胞*貼壁后,培養(yǎng)觀察,。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基,。
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人β-肌動蛋白(β-actin)elisa分析檢測試劑盒
人β-黑色素細胞刺激素(β-MSH)elisa分析檢測試劑盒
人β甘露糖苷酶(β Manase)elisa分析檢測試劑盒
人β-防御素3 elisa分析檢測試劑盒
大鼠肺小動脈平滑肌細胞小鼠二肽基肽酶8(DPP8)elisa檢測試劑盒
小鼠二肽基肽酶9(DPP9)elisa檢測試劑盒
小鼠二肽基肽酶Ⅳ(DPP4)elisa檢測試劑盒
小鼠二肽基肽酶Ⅳ(DPPⅣ)elisa分析檢測試劑盒
小鼠二肽基肽酶Ⅳ(DPPⅣ)elisa檢測試劑盒
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,,貨號21875-091),,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,,10%,。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%,;二氧化碳,,5%。 溫度:37℃,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,,現(xiàn)用現(xiàn)配,,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度,。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,,即可進行傳代培養(yǎng),。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,,1000RPM,,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。