AH109 酵母感受態(tài)細(xì)胞10×100μL供應(yīng)產(chǎn)品及特點(diǎn)：

本產(chǎn)品是采用特殊工藝處理得到的大腸桿菌 DH10 Bac 感受態(tài)細(xì)胞，適用于昆蟲桿狀病毒 Bac-to-Bac 系統(tǒng)中同源重組的菌株,，用于產(chǎn)生重組 Bacmid,。使用 pUC19 質(zhì)粒檢測，本產(chǎn)品轉(zhuǎn)化效率可達(dá) 107CFU/μg,。 DH10Bac 細(xì)胞包含親本 Bacmid bMON14272 和輔助質(zhì)粒 pMON7124,。親本 Bacmid 包含一個(gè) mini-F 復(fù)制子、卡那霉素抗性基因,、att Tn7 位點(diǎn)和 lac Zα-互補(bǔ)因子,。輔助質(zhì)粒包含 tns ABCD 區(qū)域，該區(qū)域提供了 mini-Tn7 從供體質(zhì)粒插入親本 Bacmid 靶位點(diǎn)所需要的轉(zhuǎn)座蛋白,。供體如 pFastBac 系列質(zhì)粒（pFastBac1,，pFastBacDual 等）含有 Tn7R 和 Tn7L 同源重組臂，Tn7R 和 Tn7L 之間包含慶大霉素抗性基因,、昆蟲病毒多角體基因啟動(dòng)子,、多克隆位點(diǎn)和 SV40 病毒的 PolyA 加尾信號。當(dāng)含有靶基因 pFastBac 的重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化到 DH10Bac 細(xì)胞后,，發(fā)生重組后就可產(chǎn)生重組 Bacmid,，提取純化重組 Bacmid 轉(zhuǎn)染昆蟲細(xì)胞 Sf9 或 Sf21 就可以包裝產(chǎn)生昆蟲病毒。此外,，DH10Bac 細(xì)胞中的 The φ80dlacZDM15 基因的產(chǎn)物可以實(shí)現(xiàn)β-半乳糖苷酶的α-互補(bǔ)現(xiàn)象,，用于重組 bacmid 的藍(lán)白斑篩選。菌株基因型為：F- mcrA Δ(mrrhsdRMSmcrBC) φ80lacZΔM15 ΔlacX74 recA1 endA1 araD139 Δ(ara,leu)7697 galU galK λ- rpsL nupG/pMON14272/pMON7124 ,。
AH109 酵母感受態(tài)細(xì)胞10×100μL供應(yīng)規(guī)格及成分：

AH109 酵母感受態(tài)細(xì)胞10×100μL供應(yīng)使用方法：
1. 制備含有如下抗生素的 LB 固體平板：50 μ g/mL Kanamycin,，7 μ g/mL gentamicin,，10 μg/mL tetracycline，100 μg/mL X-gal,，40 μg/mL IPTG,。
2. 取感受態(tài)細(xì)胞置于冰浴中。一次轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞的建議用量為 50-100 μL,，可以根據(jù)實(shí)際情況分裝使用,。以下實(shí)驗(yàn)以 100 μL 感受態(tài)細(xì)胞為例。
3. 待感受態(tài)細(xì)胞融化后,，向感受態(tài)細(xì)胞懸液中加入 1-10 ng 重組質(zhì)粒,，用移液器輕輕吹打混勻，冰浴 30 分鐘,。
4. 42℃熱擊 90 秒,，迅速將離心管轉(zhuǎn)移到冰浴中，冰上靜置 2-3 分鐘,。
5. 每個(gè)離心管中加入 900 μL 無菌的 SOC（不含抗生素）,，混勻后置于 37℃ 搖床， 200rpm 振蕩培養(yǎng) 4 小時(shí),。
6. 用 SOC 培養(yǎng)基進(jìn)行 10 倍梯度稀釋,，如分成 3 個(gè)稀釋梯度 10-1,10-2,10-3。
7. 取 100 μL 的各個(gè)梯度的培養(yǎng)物用于涂布,。等平板中的液體*吸收后,，倒置平板， 37℃培養(yǎng) 24-48 小時(shí),。 8. 保留剩余的菌液保存于 4℃,，視平板上菌落生長情況決定去留。

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum
BE(2)-M17(人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
植物桿菌 Lactobacillus plantarum
根瘤菌 Rhizobium sp.
大鼠腸平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
熱帶假絲酵母 Candida tropicalis
猴菌
去甲斑蟊素規(guī)格：20mg/支,；98%
大鼠卵巢顆粒細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
涇陽鏈霉菌 Streptomyces jingyangensis
P3X63Ag8.653(小鼠骨髓瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2pMSEx-3(pMSEx3)
pNL3.2.NF-kB-RE[NlucP NF-kB-RE Hygro]
pOZ-FH-C-puro（pOZFHCpuro）
pPD95.77-wVenus（pPD95.77wVenus）
pPLc28
pQCXIN X2/pSM2(CMV/TO) empty(pQCXINX2pSM2CMVTOempty) (w334-1)
pRB374
pRK2013(60908-5911)
pRSVgpt
pSF-pA-PromMCS-FLuc
pSLIK-Zeo（pSLIKZeo）
pSUMO（60908-6335y）
pTacNeo1.3
pTimer-1(pTimer1)
pTriEx-7(pTriEx7)
植物桿菌 Lactobacillus plantarum
AH109 酵母感受態(tài)細(xì)胞10×100μL供應(yīng)苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti
Ni-Agarose Resin for 6x His-Tagged ProteinsNi瓊脂糖凝膠100ml國產(chǎn)gersion
嗜酸桿菌 Lactobacillus acidophilus
戴爾根霉
人結(jié)腸細(xì)胞英文名稱：LOVO
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
哈茨木霉 Mesorhizobium huakuii