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XL10-Gold 感受態(tài)細胞0.1 mL×10供應(yīng)

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更新時間:2017-02-12 08:44:02瀏覽次數(shù):541次

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XL10-Gold 感受態(tài)細胞0.1 mL×10供應(yīng)運輸及保存 干冰運輸、-80℃保存,,避免反復(fù)凍融,,有效期半年,。

XL10-Gold 感受態(tài)細胞0.1 mL×10供應(yīng)規(guī)格及成分:

XL10-Gold 感受態(tài)細胞0.1 mL×10供應(yīng)產(chǎn)品及特點:


本產(chǎn)品是采用特殊工藝處理得到的大腸桿菌 DH10 Bac 感受態(tài)細胞,,適用于昆蟲桿狀病毒 Bac-to-Bac 系統(tǒng)中同源重組的菌株,,用于產(chǎn)生重組 Bacmid,。使用 pUC19 質(zhì)粒檢測,,本產(chǎn)品轉(zhuǎn)化效率可達 107CFU/μg。 DH10Bac 細胞包含親本 Bacmid bMON14272 和輔助質(zhì)粒 pMON7124,。親本 Bacmid 包含一個 mini-F 復(fù)制子,、卡那霉素抗性基因、att Tn7 位點和 lac Zα-互補因子,。輔助質(zhì)粒包含 tns ABCD 區(qū)域,,該區(qū)域提供了 mini-Tn7 從供體質(zhì)粒插入親本 Bacmid 靶位點所需要的轉(zhuǎn)座蛋白。供體如 pFastBac 系列質(zhì)粒(pFastBac1,,pFastBacDual 等)含有 Tn7R 和 Tn7L 同源重組臂,,Tn7R 和 Tn7L 之間包含慶大霉素抗性基因,、昆蟲病毒多角體基因啟動子、多克隆位點和 SV40 病毒的 PolyA 加尾信號,。當含有靶基因 pFastBac 的重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化到 DH10Bac 細胞后,,發(fā)生重組后就可產(chǎn)生重組 Bacmid,提取純化重組 Bacmid 轉(zhuǎn)染昆蟲細胞 Sf9 或 Sf21 就可以包裝產(chǎn)生昆蟲病毒,。此外,,DH10Bac 細胞中的 The φ80dlacZDM15 基因的產(chǎn)物可以實現(xiàn)β-半乳糖苷酶的α-互補現(xiàn)象,用于重組 bacmid 的藍白斑篩選,。菌株基因型為:F- mcrA Δ(mrrhsdRMSmcrBC) φ80lacZΔM15 ΔlacX74 recA1 endA1 araD139 Δ(ara,leu)7697 galU galK λ- rpsL nupG/pMON14272/pMON7124 ,。
XL10-Gold 感受態(tài)細胞0.1 mL×10供應(yīng)使用方法:
1. 制備含有如下抗生素的 LB 固體平板:50 μ g/mL Kanamycin,7 μ g/mL gentamicin,,10 μg/mL tetracycline,,100 μg/mL X-gal,40 μg/mL IPTG,。
2. 取感受態(tài)細胞置于冰浴中,。一次轉(zhuǎn)化感受態(tài)細胞的建議用量為 50-100 μL,可以根據(jù)實際情況分裝使用,。以下實驗以 100 μL 感受態(tài)細胞為例,。
3. 待感受態(tài)細胞融化后,向感受態(tài)細胞懸液中加入 1-10 ng 重組質(zhì)粒,,用移液器輕輕吹打混勻,,冰浴 30 分鐘。
4. 42℃熱擊 90 秒,,迅速將離心管轉(zhuǎn)移到冰浴中,,冰上靜置 2-3 分鐘。
5. 每個離心管中加入 900 μL 無菌的 SOC(不含抗生素),,混勻后置于 37℃ 搖床,, 200rpm 振蕩培養(yǎng) 4 小時。
6. 用 SOC 培養(yǎng)基進行 10 倍梯度稀釋,,如分成 3 個稀釋梯度 10-1,10-2,10-3,。
7. 取 100 μL 的各個梯度的培養(yǎng)物用于涂布。等平板中的液體*吸收后,,倒置平板,, 37℃培養(yǎng) 24-48 小時。 8. 保留剩余的菌液保存于 4℃,,視平板上菌落生長情況決定去留,。

鏈霉菌 Streptomyces sp.
貂肺上皮細胞英文名稱:Mv 1 lu
熱帶假絲酵母 Candida tropicalis
毛鬼傘,雞腿菇 Coprinus comatus
小鼠胃細胞英文名稱:MFC
人腎足突細胞*培養(yǎng)基100mL
葡萄汁酵母 Saccharomyces uvarum
稻黃桿菌 Flovobacterium oryzae
293FT(人胚腎細胞)5×106cells/瓶×2
串珠菌 Leuconostoc lactis人胃蛋白酶(PP)ELISA Kit
人心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISA Kit
人血清/糖皮質(zhì)激素調(diào)節(jié)激酶2(SGK2)ELISA kit
人乙醇脫氫酶(ADH)ELISA Kit
人脂質(zhì)運載蛋白2(LCN2)ELISA Kit
山羊白介素4(IL-4)ELISA Kit
兔血栓素B2(TXB2)ELISA Kit
兔子堿性成纖維細胞生長因子(bFGF)ELISA Kit
兔子組織因子(TF)ELISA Kit
小鼠N-乙?;?絲氨酰-天門冬酰-賴氨酰-脯氨酸(AcSDKP)ELISAKit
小鼠白介素6(IL-6)ELISA Kit
小鼠干細胞因子/肥大細胞生長因子(SCF/MGF)ELISA Kit
小鼠巨噬細胞炎性蛋白1β(MIP-1β/CCL4)ELISA Kit
小鼠內(nèi)皮脂肪酶(EL)ELISA Kit
小鼠髓過氧化物酶特異性抗中性粒細胞胞質(zhì)抗體IgG(MPO-ANCAIgG)ELISA Kit
小鼠血小板衍生生長因子AB(PDGF-AB)ELISA Kit
小鼠組胺(HIS)ELISA Kit
豌豆根瘤菌 Rhizobium leguminosarum
XL10-Gold 感受態(tài)細胞0.1 mL×10供應(yīng)MDA-MB-435(人腺高轉(zhuǎn)移細胞)5×106cells/瓶×2gersion
異常漢遜酵母 Hansenula anomala
蝙蝠蛾擬青霉 Paecilomyces hepialus
鼠李糖桿菌 Lactobacillus rhamnosus
蘇云金芽孢桿菌 Bacillus thuringiensis
UM-UC-3(人膀胱移行細胞)5×106cells/瓶×2

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