斑馬魚尾鰭細胞,；AB.9說明書【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研,，不可用于臨床診斷和治療,。

細胞名稱 斑馬魚尾鰭細胞；AB.9說明書
形態(tài)特性 
生長特性 貼壁生長
特征特性   
培養(yǎng)條件   
傳代方法 
傳代情況39
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR 
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 B類

細胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1,、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清,，10%,。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%,；二氧化碳，5%,。 溫度：37攝氏度,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3,、凍存液：90%*培養(yǎng)基,，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配,。液氮儲存,。
二、細胞處理：
1,、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,，加入約8ml培養(yǎng)基,，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細胞密度,。
2,、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng),。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出,，在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞,，1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,，將剩余細胞懸起,，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3,、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時,，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,，再添加10%DMSO后進行凍存,。懸浮細胞凍存時，應將細胞收集,，1000RPM條件下離心4分鐘,，少量保存上清液（防止細胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基,，加入到凍存管中,，在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
質(zhì)量保證:    
我們的細胞株來源于ATCC,、ECACC,、DSMZ、JCRB等，購買到貨后,，由我們實驗室擴增,、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,，100%進口來源,，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%,，無細菌,、真菌、支原體污染,。   細胞到達客戶手中,，1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題，導致細胞在凍存前死亡,，我們公司都可以免費再向客戶提供一次,。
操作步驟：
1）貼壁細胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預熱,，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),，吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細胞,，加入適量胰酶,，使胰酶的量能蓋住細胞，37℃孵育,，每隔2~3min顯微鏡下觀察,，待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,，加入新鮮培養(yǎng)基,，晃動細胞瓶，終止胰酶作用,，用吸管小心吹打貼壁的細胞,，制成細胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ?，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),，加入新鮮培養(yǎng)基,，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況,。
2）懸浮細胞傳代：將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),，1000rpm離心5min，棄去上清,，加入新鮮的培養(yǎng)基,，用吸管小心吹散沉淀，制成細胞懸液,，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng),。

大豆慢生根瘤菌
人結(jié)直腸腺細胞英文名稱：Caco-2
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
固囊酵母 Trichoderma longibrachiatum
蘇云金芽胞桿菌巴基斯坦亞種 Bacillus thuringiensis subsp. pakistani
小鼠氣管平滑肌細胞*培養(yǎng)基100mL
香菇 Lentinula edodes
香菇 Lentinula edodes
30%丙烯酰胺-甲叉雙丙烯酰胺溶液(29:1)200ml國產(chǎn)
藤倉赤霉 Gibberella fujikuroi
苜蓿中華根瘤菌
rCSC, 大鼠心肌細胞gersion
屎腸球菌 Enterococcus faecium
苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti
人臍靜脈血管內(nèi)皮細胞英文名稱：HUVEC
mRTEC, 小鼠腎小管上皮細胞 Mouse
宇佐美曲霉 Aspergillus usamii
褐球固氮菌 Azotobacter chrooccum
小鼠軟骨細胞*培養(yǎng)基100mL
威爾酵母 Saccharomyces willianus
香菇 Lentinula edodes
Bacterial Protein Extration Kit/細菌蛋白抽提試劑盒25次,、100次國產(chǎn)
粉擬青霉 Paecilomyces farinosus
人黑色素瘤細胞英文名稱：M14N6-Cbz-L-Lysine benzyl ester hydrochloride    Nε-CBZ-L-賴氨酸芐酯酸    6366-70-7
4,4'-(Hexafluoroisopropylidene)diphthalic anhydride    六二酐    1107-00-2
2-CYANOETHYLTRICHLOROSILANE    三-2-碳硅烷    1071-22-3
2,2'-AZOBIS[2-(2-IMIDAZOLIN-2-YL)PROPANE]    偶氮二咪唑啉基丙烷    20858-12-2
phellodendrine    黃柏    6873-13-8
5-Bromo-4-chloro-3-indolyl-beta-D-galactoside    5-溴-4-3吲哚基β-D 半乳糖    7240-90-6
alpha-Asarone    α-細腦    2883-98-9
TRIS[4-(PERFLUOROOCTYL)PHENYL]PHOSPHINE    三[4-(十七基)基]磷化氫    284472-92-0
(SP-4-2)-((2E,7R,11R)-3,7,11,15-Tetramethyl-2-hexadecenyl (3S,4S,21R)-9-ethenyl-14-ethyl-13-formyl-21-(methoxycarbonyl)-4,8,18-trimethyl-20-oxo-3-phorbinepropanoato(2-)-N23,N24,N25,N26]-magnesium    葉綠素 B    519-62-0
Gomisin A    五味子醇    58546-54-6
AZOMETHINE H    亞胺-H    32266-60-7
Ethoxyethyne    乙氧基乙炔    927-80-0
Zinc iodide    碘化鋅    10139-47-6
2-Amino-3,5-dinitrothiophene    2-氨基-3,5-二基噻吩    2045-70-7
Astragaloside III    黃芪皂苷 III    84687-42-3
Iodopropynyl butylcarbamate    丁基氨基酸碘代酯    55406-53-6
NA    10X分子篩    
FLUOROTRIBROMOMETHANE    三溴烷    353-54-8