白鰱尾鰭細(xì)胞系；SCF說明書【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研,，不可用于臨床診斷和治療,。

細(xì)胞名稱白鰱尾鰭細(xì)胞系；SCF說明書
形態(tài)特性  上皮細(xì)胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性  白鰱尾鰭細(xì)胞由長江水產(chǎn)所建立鑒定,，用于白鰱尾鰭魚基礎(chǔ)研究和病毒疾病防治研究,。 
培養(yǎng)條件  RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS
傳代方法  1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C15
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR 
同工酶 同工酶鑒定
染色體 
使用權(quán)限 A類

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),，90%,；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%,。
2,、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%,；二氧化碳,，5%。 溫度：37攝氏度,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基,，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存,。
二,、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基,，培養(yǎng)）,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出,，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞,，1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式,，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起,，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,，可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。貼壁細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,，細(xì)胞變圓脫落后,，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存,。懸浮細(xì)胞凍存時,，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走）,，加入部分新鮮培養(yǎng)基,，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存,。
質(zhì)量保證:    
我們的細(xì)胞株來源于ATCC,、ECACC、DSMZ,、JCRB等,，購買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增,、凍存,，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進(jìn)口來源,，100%保證5代以內(nèi),，活力>95%，無細(xì)菌,、真菌,、支原體污染。   細(xì)胞到達(dá)客戶手中,，1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次,。
操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基,、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),，吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,，加少量PBS潤洗細(xì)胞，加入適量胰酶,，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察,，待貼壁細(xì)胞間間隙變大,、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基,，晃動細(xì)胞瓶,，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,，制成細(xì)胞懸液,?？刂拼荡虻牧Χ龋苊猱a(chǎn)生大量的氣泡,，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi),，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng),，隔天觀察貼壁生長情況,。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min,，棄去上清,，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀,，制成細(xì)胞懸液,，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基,，置37℃溫箱培養(yǎng),。

植物桿菌 Lactobacillus plantarum
黑色鏈霉菌 Streptomyces niger
大鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
鞘氨醇桿菌屬 Sphingobacterium sp.
黑曲霉 Aspergillus niger
大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum
RBL-2H3(大鼠嗜堿性細(xì)胞白血病細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
桿菌屬 Lactobacillus sp.
根瘤菌 Rhizobium sp.
Tris(三羥甲基氨基甲烷)500g國產(chǎn)
酸球菌亞種 Lactococcus lactis subsp. lactis
冬擬多孔菌
枯草芽胞桿菌 Bacillus subtilis
HBL-100(人整合SV40基因的腺上皮細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
酸球菌霍氏亞種 Lactococcus lactis subsp. hordniae
苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti
Saos-2，人成骨肉瘤細(xì)胞
戊糖桿菌 Lactobacillus pentosus
毛柄金錢菌(金針菇) Flammulina velutipes
蘇云金芽胞桿菌蘇云金變種 Bacillus thuringeinsis subsp. thuringeinsis
中性蛋白酶(含100mL酶解緩沖液)10mLParaformaldehyde    多聚    30525-89-4
1-Bromo-3,5-dimethyladamantane    1-溴-3,5-二基金剛烷    941-37-7
Ethylenzene    乙基    100-41-4
5-Azacytidine    5-氮胞苷    320-67-2
2-Ethylimidazole    2-乙基咪唑    1072-62-4
2'-DEOXY-5-FLUOROCYTIDINE    5-脫氧胞苷    10356-76-0
(S)-(-)-2,2'-BIS(DI-P-TOLYLPHOSPHINO)-1,1'-BINAPHTHYL    (S)-(-)-2, 2-雙（二對基膦）-1,1-二聯(lián)萘    100165-88-6
N-ACETYL-L-TYROSINE ETHYL ESTER    N-乙酰-L-酪氨酸乙酯一水物    840-97-1
2-Acetamidoacrylic acid    2-乙酰氨基丙酸    5429-56-1
2,5-Dibromoterephthalic acid diethyl ester    2,5-二溴對二酸二乙酯    18013-97-3
Levodopa    左旋多巴    59-92-7
5-BROMOPYRIDINE-3-SULFONYL CHLORIDE    5-溴吡啶-3-磺酰    65001-21-0
Cellulose diacetate    二醋酸纖維素    9035-69-2
L-Threonic acid calcium salt    L-蘇糖酸鈣    70753-61-6
2-Amino-5-chloro-3-methylbenzoic acid    2-氨基-5--3-基酸    20776-67-4
4-Ethoxybenzoic acid    4-乙氧基酸    619-86-3
N-Hydroxy-5-norbornene-2,3-dicarboximide    N-羥基-5-降冰片-2,3-二酰亞胺    21715-90-2