高背鯽魚(yú)尾鰭細(xì)胞,；GBJd說(shuō)明書(shū)【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療,。

細(xì)胞名稱(chēng) 高背鯽魚(yú)尾鰭細(xì)胞,；GBJd說(shuō)明書(shū)
形態(tài)特性  成纖維細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性  該細(xì)胞系來(lái)源于一高背鯽魚(yú)（滇池）的尾鰭組織。1985年由中國(guó)科學(xué)院昆明細(xì)胞庫(kù)建立,。 
培養(yǎng)條件  M-199: with Earle's Balanced Salts Solution (EBSS)   15%NBS
傳代方法  1：2傳代,；7-10天一次
傳代情況 P8
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 熒光法（-）
STR 
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 A類(lèi)

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),，90%,；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%,。
2,、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%,；二氧化碳,，5%。 溫度：37攝氏度,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基,，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存,。
二,、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次,。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀(guān)察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式,，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起,，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),，可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,，細(xì)胞變圓脫落后,，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),，應(yīng)將細(xì)胞收集,，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走）,，加入部分新鮮培養(yǎng)基,，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存,。
質(zhì)量保證:    
我們的細(xì)胞株來(lái)源于A(yíng)TCC,、ECACC、DSMZ,、JCRB等,，購(gòu)買(mǎi)到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增,、凍存,，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè)，100%進(jìn)口來(lái)源,，100%保證5代以?xún)?nèi),，活力>95%，無(wú)細(xì)菌,、真菌,、支原體污染。   細(xì)胞到達(dá)客戶(hù)手中,，1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問(wèn)題,，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶(hù)提供一次,。
操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基,、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),，吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,，加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞，加入適量胰酶,，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀(guān)察,，待貼壁細(xì)胞間間隙變大,、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基,，晃動(dòng)細(xì)胞瓶,，終止胰酶作用,，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液,?？刂拼荡虻牧Χ龋苊猱a(chǎn)生大量的氣泡,，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng),，隔天觀(guān)察貼壁生長(zhǎng)情況,。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min,，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基,，用吸管小心吹散沉淀,，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),，加入新鮮培養(yǎng)基,，置37℃溫箱培養(yǎng)。

馬克斯克魯維酵母 Kluyceromyces marxianus
Hepa 1-6(小鼠肝細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
純白鏈霉菌 Streptomyces candidus
大鼠神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
酸球菌亞種 Lactococcus lactis subsp.lactis
蘋(píng)果黑腐皮殼
小鼠畸胎瘤細(xì)胞英文名稱(chēng)：Pcc4
人氣管平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
嗜酸桿菌 Lactobacillus acidophilus
豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna
TSCCa(人舌鱗細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
糖丁酸梭菌 Clostridium saccharobutyricum
中慢生華癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii
IV型膠原酶(含10mL酶解緩沖液)1mL
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
小小鏈霉菌 Streptomyces parvullus
丹參酮IIA規(guī)格：1g/支,；98%
熱帶假絲酵母 Candida tropicalis
毛木耳 Auricularia polytricha4,4'-Diamino-2,2'-stilbenedisulfonic acid    4,4'-二氨基二乙-2,2'-二磺酸    1981/11/8
N-(2,4-DINITROPHENYL)-L-ALANINE    N-(2,4-二基)-L-丙氨酸    1655-52-3
Tetramethyl-1,3-diaminopropane    四基丙    110-95-2
dibutyl 2,2'-thiobisacetate    硫代二甘酸二正丁酯    4121/12/4
2-Octanone    仲    111-13-7
(S)-N-Boc-(4-Pyridyl)alanine    Boc-3-(4-吡啶基)-L-丙氨酸    37535-57-2
6-Aminoindazole    6-氨基吲唑    6967-12-0
GALLIUM(III) TRIFLUOROMETHANESULFONATE    三磺鎵    74974-60-0
Methyl 4-chloro-3-oxo-butanoate    4-乙酰乙酸酯    32807-28-6
Sanggenon C    桑根C    80651-76-9
4-Chloro-7-nitrobenzo-2-oxa-1,3-diazole    4--7-基-2,1,3-并氧雜惡二唑    10199-89-0
1,1'-Thiobisethane    乙硫    352-93-2
3-Ethynylthiophene    3-乙炔噻吩    67237-53-0
Calcium carbide    碳化鈣    75-20-7
Glycitin    黃豆黃苷    40246-10-4
cis-3-Hexenyl formate    酸葉醇酯    33467-73-1
Phenol    酚    108-95-2
1,4-Dibromobutane    1,4-二溴丁烷    110-52-1