詳細介紹
SV40轉化的非洲綠猴腎細胞,;COS-7*直銷操作步驟:
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中,將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片,,待細胞長至80%時取出爬片,。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,,再次用PBS浸洗玻片3次,,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,,使細胞通透,。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),,PBS沖洗3次,,每次3min,。
5. 封閉血清室溫孵育20min,,PBS沖洗3次,每次3min,。
6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,,每次3min,。
7. 二抗孵育:選與一抗對應的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,,37°C濕盒中孵育30min,,PBS沖洗3次,每次3min,。
8. 將爬片周圍水漬吸干,,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,,當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色,。
9. 復染:用Harris蘇木素復染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍,。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側,再用蓋玻片蓋上,,先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側,,以免產(chǎn)生氣泡,封好的爬片平放置于通風廚中晾干,。
11. 鏡檢觀察,。
SV40轉化的非洲綠猴腎細胞;COS-7*直銷現(xiàn)貨直銷,,免費快遞送貨上門,。公司供應各種細胞株,細胞系,,種類齊全,,現(xiàn)貨,質(zhì)量保證,,公司所有產(chǎn)品僅供科研使用,,不得用于醫(yī)學診斷。使用前仔細閱讀本說明書,。
產(chǎn)品名稱 | |
用途 | 僅用科研 |
保存條件 | 4℃保存一年;-20℃長期保存 |
細胞名稱
形態(tài)特性 成纖維細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞株源自CV-1細胞株,,經(jīng)轉染起始點缺失的SV40病毒突變體得到;編碼表達野生型T抗原,,所以該細胞適合作為需要SV40 T抗原表達的載體的轉染宿主,。該細胞表達T抗原,允許SV40病毒的溶解性生長,,支持40℃時溫度敏感性A209病毒的復制,,支持起始區(qū)域缺陷的SV40突變體的復制,。因含有SV40病毒的DNA序列,該細胞需要在2級生物安全柜中操作,。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 15%NBS
傳代方法 1:3傳代,;3-4天一次
傳代情況 PN2
凍存條件 基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法(-)
STR -
同工酶
染色體 51-129
使用權限 A類
運輸保存:
采用干冰保存運輸。收到細胞時,,若干冰已經(jīng)*融化,,請立即將細胞復蘇培養(yǎng);若尚留有干冰,,請立即將細胞放入液氮中保存待用,,請按條件貯存細胞,切不可將細胞置于高溫環(huán)境,。
保存條件:4℃保存一年;-20℃長期保存
用途:只可用于科研,。
儲存:液氮。
運輸:干冰(第二代培養(yǎng)末期液氮凍存),。
細胞一般2-3天更換一次培養(yǎng)基,,這取決于細胞生長的速度。許多細胞培養(yǎng)實驗室通常在周一,,周三,,周五更換培養(yǎng)基。
注意:*次植入后,,在6-16小時內(nèi)更換培養(yǎng)基,,以去除殘留的二甲基亞楓和死亡細胞。到達客戶手中,,出現(xiàn)任何問題(人為或者非人為),,導致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次,。對于細胞的真實性,,支持客戶檢測對應的biomarker,(如證明細胞錯誤,,全額退款,。)公司針對每株細胞,鑒定gene background,,鑒定完成的細胞可以提供數(shù)據(jù),,用于證明細胞的真實性,并且?guī)椭蛻舾嗟牧私饧毎匦浴?/p>
枯草芽胞桿菌 Bacillus subtilis
GNM(人口腔鱗頸淋巴結轉移細胞)5×106cells/瓶×2
酸球菌亞種 Lactococcus lactis subsp. Lactis
苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti
RWPE1(人前列腺上皮細胞)5×106cells/瓶×2
戊糖桿菌 Lactobacillus pentosus
毛柄金錢菌(金針菇) Flammulina velutipes
蘇云金芽胞桿菌柏氏變種 Bacillus thuringiensis var. berliner
小鼠胰腺導管上皮細胞*培養(yǎng)基100mL
戊糖桿菌 Lactobacillus pentosus
香菇 Lentinula edodes
786-O(人腎透細胞細胞)5×106cells/瓶×2
糖化酵母 Saccharomyces diastaticus
苜蓿中華根瘤菌
RL1(大鼠肺成纖維樣細胞)5×106cells/瓶×2
圣堡羅沙門氏菌 Salmonella saintpaul
苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti
人前列腺上皮細胞*培養(yǎng)基100mL
人絨毛膜間充質(zhì)基質(zhì)細胞 Human
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
臘狀芽胞桿菌 Bacillus cereus4次 大提柱式細 DNAout
500U 尿嘧啶 -DNA 糖基化酶
溴酚藍 CAS115-39-9 5g
Y2HGold 酵母種 12-194 1mL
20 次 一站式 His 標記蛋白質(zhì)微量純化套裝
10 次 克必隆 eTS 超敏 PCR 法 cDNA 合成試劑盒
250mg 直鏈淀粉
100mL PRMI1640 培養(yǎng)基 ( 含 10% 胎牛血清 )
100g DNA CTAB( 十六烷基*基溴化銨 )
雙染細胞凋亡檢測試劑盒(Annexin V-APC·7-AAD) 140625-20 20 次
DNA 電泳分子量標準 (3)φX174 DNA/Hae Ⅲ 90602H-50 50 次
100g 十二烷基硫酸
100mL 動物 DNAout
1g 6- 芐基氨基嘌呤
0.5mL 鏈霉親和素,,AP 標記
L-(+) 乳酸鋰鹽 CAS27848-80-2 5g
E-64 蛋白酶抑制劑,,20mg/mL 130541-10 10mL
50 次 柱式昆蟲 DNAout
100mg Monensin ( 蛋白轉運抑制劑 )
200 次 ATP 發(fā)光法細胞活力檢測試劑盒
250mL 動物 DNAout
10mL DNA 稀釋液
蝦堿性磷酸酶 120403-300 300U