VERO細胞衍生株,；SVP說明書【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研,，不可用于臨床診斷和治療。

細胞名稱 VERO細胞衍生株,；SVP說明書
形態(tài)特性  成纖維細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性  SVP細胞是Vero細胞系的衍生株。除具有Vero細胞的生物學(xué)特性外,，還表現(xiàn)為對多種人類病毒,，動物病毒的敏感性。常用作病毒宿主研究病毒的致病機制,，抗病毒物等,。 
培養(yǎng)條件  DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  10%FBS
傳代方法  1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C112
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR 
同工酶 同工酶鑒定
染色體 
使用權(quán)限 A類

細胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),，90%,；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%,。
2,、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%,；二氧化碳,，5%。 溫度：37攝氏度,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基,，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存,。
二,、細胞處理：
1、復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基,，培養(yǎng)）,。第二天換液并檢查細胞密度。
2,、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng),。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出,，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞,，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式,，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3,、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存,。貼壁細胞凍存時,，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后,，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,，再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,，應(yīng)將細胞收集,，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細胞吸走）,，加入部分新鮮培養(yǎng)基,，加入到凍存管中,，在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
質(zhì)量保證:    
我們的細胞株來源于ATCC,、ECACC,、DSMZ、JCRB等,，購買到貨后,，由我們實驗室擴增、凍存,，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,，100%進口來源,，100%保證5代以內(nèi),，活力>95%，無細菌,、真菌,、支原體污染。   細胞到達客戶手中,，1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,，導(dǎo)致細胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費再向客戶提供一次,。
操作步驟：
1）貼壁細胞傳代：提前將培養(yǎng)基,、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),，吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,，加少量PBS潤洗細胞，加入適量胰酶,，使胰酶的量能蓋住細胞,，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察,，待貼壁細胞間間隙變大,、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基,，晃動細胞瓶,，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細胞,，制成細胞懸液,。控制吹打的力度,，避免產(chǎn)生大量的氣泡,，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng),，隔天觀察貼壁生長情況,。
2）懸浮細胞傳代：將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min,，棄去上清,，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀,，制成細胞懸液,，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基,，置37℃溫箱培養(yǎng),。

多枝鐮孢
蘇云金芽胞桿菌達姆斯塔特亞種 Bacillus thuringiensis subsp. darmstadiensis
HL-60(人早幼粒急性白血病細胞)5×106cells/瓶×2
酸球菌 Lactococcus lactis
苜蓿中華根瘤菌
SH-SY5Y(人神經(jīng)母細胞瘤細胞)5×106cells/瓶×2
戊糖片球菌 Pediococcus pentosaceus
毛柄金錢菌(金針菇) Flammulina velutipes
發(fā)根土壤桿菌 Agrobacterium rhizogenes
769-P(人腎細胞腺細胞)5×106cells/瓶×2
挪威假絲酵母 Candida norvegensis
根瘤菌 Rhizobium sp.
PANC-1全細胞裂解液100ug100uggersion
赭曲霉 Aspergillus ochraceus
雙孢蘑菇 Agaricus bisporus
胰凝蛋白酶(含100mL酶解緩沖液)10mL
小鼠腸平滑肌細胞*培養(yǎng)基100mL
植物桿菌 Lactobacillus plantarum
費氏中華根瘤菌 Sinorhizobium fredii
mRTEC, 小鼠腎小管上皮細胞gersion
少根根霉 Rhizopus arrhizus
香栓菌 Trametes suaveloens
小鼠淋巴成纖維細胞*培養(yǎng)基100mL
胎兒表皮角化細胞*培養(yǎng)基100mL
口津假絲酵母 Candida melibiosica葡聚糖 T-500    CAS9004-54-0    10g
Rosetta-gami(DE3) 種    12-107    1mL
100 次    液相內(nèi)毒素清除劑    
1mL    JM109 種    
1g    芥子酸    
1g    pNPP 干粉    
氫化可    CAS50-23-7    5g
壯觀溶液 ,50mg/mL    131232-10    10mL
1g    吲哚 -3- 丁酸    
250g    聚乙二醇 4000    
100g    水解乳蛋白    
1mL    小牛胸 DNA 溶液    
聚乙二醇 8000    CAS25322-68-3    250g
福林酚試劑    100939-100    100mL
1mg    重組蛋白 A    
10 塊    LB 平板培養(yǎng)基 無抗    
100mg    纖維蛋白原    
50 次    雙染細胞凋亡檢測試劑盒（Annexin V- 熒光素 488·PI）     
蘇丹Ⅲ    CAS85-86-9    5g
蛋白膠微量回收試劑盒    90402-50    50 次
10g    α- 氰基 -4- 羥基肉桂酸    
10g    氯化銫    
10U    磷酸二酯酶Ⅱ    
24 T    肌酸激酶測試劑盒