長尾綠猴腎細胞,；4647說明書【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療,。

細胞名稱 長尾綠猴腎細胞,；4647說明書
形態(tài)特性  上皮細胞樣為主
生長特性 貼壁生長
特征特性   
培養(yǎng)條件  MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  優(yōu)質胎牛血清，10%
傳代方法  消化3-5分鐘,。1:2,。3天內可長滿。
傳代情況 PN5
凍存條件  *培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR 
同工酶 
染色體 
使用權限 A類

細胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1,、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),，90%；優(yōu)質胎牛血清,，10%,。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%,；二氧化碳，5%,。 溫度：37攝氏度,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3,、凍存液：90%*培養(yǎng)基,，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配,。液氮儲存,。
二、細胞處理：
1,、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或將細胞懸液加入10cm皿中,，加入約8ml培養(yǎng)基,，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細胞密度,。
2,、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,，若細胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
對于懸浮細胞,，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式,，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起,，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時,，可進行細胞凍存,。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,，細胞變圓脫落后,，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存,。懸浮細胞凍存時,，應將細胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘,，少量保存上清液（防止細胞吸走）,，加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中,，在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存,。
質量保證:    
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC,、DSMZ,、JCRB等，購買到貨后,，由我們實驗室擴增,、凍存，凍存的產品全部經過QC檢測,，100%進口來源,，100%保證5代以內，活力>95%,，無細菌,、真菌、支原體污染,。   細胞到達客戶手中,，1個月內出現(xiàn)任何問題，導致細胞在凍存前死亡,，我們公司都可以免費再向客戶提供一次,。
操作步驟：
1）貼壁細胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內,，吸除或倒掉細胞瓶內舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細胞,，加入適量胰酶,，使胰酶的量能蓋住細胞，37℃孵育,，每隔2~3min顯微鏡下觀察,，待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,，加入新鮮培養(yǎng)基,，晃動細胞瓶，終止胰酶作用,，用吸管小心吹打貼壁的細胞,，制成細胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ?，避免產生大量的氣泡,，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內，加入新鮮培養(yǎng)基,，置37℃溫箱培養(yǎng),，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細胞傳代：將細胞懸液轉移到無菌離心管內,，1000rpm離心5min,，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基,，用吸管小心吹散沉淀,，制成細胞懸液，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,，加入新鮮培養(yǎng)基,，置37℃溫箱培養(yǎng)。

人前脂肪細胞*培養(yǎng)基    100mL            
TE-11(人食管細胞)    5×106cells/瓶×2            
TBX培養(yǎng)基/TBX Agar/Tryptone Bile X-glucuronide Agar    檢測大腸菌群,，大腸菌群培養(yǎng)24小時,，顯蘭色    國產/進口    1升    
人肝動脈內細胞*培養(yǎng)基    100mL            
哥倫比亞血瓊脂基礎/Columbia Blood Agar Base    各種細菌的基礎培養(yǎng)基    國產/進口    250克    
貂肺上細胞    英文名稱：        Mv 1 lu    
腦心浸液/無瓊脂腦心浸液/腦心浸液肉湯/BHI    用于金黃色葡萄球菌的培養(yǎng)    國產/進口    250克    
大鼠肝動脈平滑肌細胞*培養(yǎng)基    100mL            
西蒙氏檸檬酸鹽培養(yǎng)基/西蒙氏枸櫞酸鹽瓊脂/Simmons Citrate Agar    用于腸道菌的檸檬鹽利用試驗    國產/進口    250克    
Stripping Buffer/蛋白印跡膜再生液    500ml        100ml、500ml    
QG-56(人肺扁平上細胞)    5×106cells/瓶×2            
PBS    規(guī)格：    gersion    500ml    
NCI-H460(人肺細胞)    5×106cells/瓶×2            
mEPC, 小鼠內祖細胞-骨髓        gersion        
MLTC-1(小鼠睪間質細胞瘤細胞)    5×106cells/瓶×2            
HL-60, 人早幼粒白血病細胞                
Anglne(人卵巢細胞)    5×106cells/瓶×2   5次    隨機引物法 DNA 探針標記試劑盒    
1個    帶柄尼龍篩    
20L    半干法電轉液 ( 干粉 )    
30μL    α-Tubulin 小鼠單抗    
核酸內切酶 VIII    130642-1000    1000U
MnCl2溶液,，25mM,，PCR     130307-5    5mL
20 次    天凈沙 Ribo-SPIA cDNA 擴增試劑盒    
1500U    EcoRV    
200mL    體內毒素清除劑    
1mL    胚胎裂解液    
ELISA 試劑盒    33    48/96T
動物種屬鑒定 PCR Mix 4    131128D-100    100 次
25μg    Xa 因子蛋白酶    
10mL    鈣蛋白酶抑制劑Ⅱ溶液，10mg/mL    
10g    2-(N- 啡啉 ) 乙磺酸    
10 次    Southern 血液 DNAout    
氯化膽堿    CAS67-48-1    100g
AG1 種    12-284    1mL
100 次    溴化乙錠清除劑    
25mg    核糖核酸酶 A,，牛胰    
100mg    透明質酸酶    
1套    GST 固定試劑盒    
姬姆色素染料    CAS51811-82-6    1g
LB 平板培養(yǎng)基 無抗    130848A-10    10 塊
30 次    一站式長效期 SDS-PAGE 電泳套裝 (>30KD)