詳細(xì)介紹
牛甲狀腺細(xì)胞系,;hTERT-BTY價(jià)格質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC,、ECACC、DSMZ,、JCRB等,,購(gòu)買到貨后,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增,、凍存,,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè),100%進(jìn)口來(lái)源,,100%保證5代以內(nèi),,活力>95%,無(wú)細(xì)菌,、真菌,、支原體污染,。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問(wèn)題,,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
牛甲狀腺細(xì)胞系,;hTERT-BTY價(jià)格操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基,、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),,吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,,加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞,加入適量胰酶,,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,,待貼壁細(xì)胞間間隙變大,、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,,制成細(xì)胞懸液,。控制吹打的力度,,避免產(chǎn)生大量的氣泡,,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,,置37℃溫箱培養(yǎng),,隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi),,1000rpm離心5min,,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,,用吸管小心吹散沉淀,,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),,加入新鮮培養(yǎng)基,,置37℃溫箱培養(yǎng)。
【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,,不可用于臨床診斷和治療,。
細(xì)胞名稱
形態(tài)特性 上皮樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 該細(xì)胞屬專利保藏,,其特征特性尚未公開。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,,3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 未定
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),,90%,;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%,。
2,、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%,;二氧化碳,,5%。 溫度:37攝氏度,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,,10%DMSO,,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存,。
二,、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,,培養(yǎng)),。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2,、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次,。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺(tái),,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3,、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),,應(yīng)將細(xì)胞收集,,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),,加入部分新鮮培養(yǎng)基,,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存,。
GBC-SD, 人膽囊細(xì)胞
小鼠外周血白細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
BCIP/NBT堿性磷酸酶顯色試劑 40ml 國(guó)產(chǎn)
小鼠成纖維細(xì)胞 英文名稱: NIH 3T3
Hanks’ Balanced Salt Solution 規(guī)格: 500ml
人胃順鉑耐藥株 英文名稱: SGC7901/DDP
M17肉湯/M17 Broth 牛奶和制品中酸菌檢測(cè)和分離培養(yǎng) 國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口 250克
人脈絡(luò)膜微血管細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
腸道菌增菌肉湯/腸道菌增菌液/EE肉湯/Enterobacteria Enrichment Broth 腸道菌的增菌培養(yǎng) 國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口 250克
人白血病細(xì)胞 英文名稱: U973
克雷伯氏顯色培養(yǎng)基 國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口 250克
大鼠腎小管平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
全胃蛋白胨 BR 國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口 250克
Western Blot封閉液Ⅰ(BSA,pH7.5)/Blocking Buffer(BSA) 500ml 100ml,、500ml
胰蛋白胨水培養(yǎng)基/Peptone Water Medium 用于靛基質(zhì)試驗(yàn) 國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口 250克
S-180(小鼠肉瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
KiMA(人胚腎上細(xì)胞系) 5×106cells/瓶×2 100 次 RAPD PCR 試劑盒 ( 含銀染 )
MM1-43(FM®1-43) 22-0470-1 1mg
微型離心管研磨杵 ( 無(wú)離心管 ) 80603A-50 50 只
48 T 羥脯氨酸測(cè)試盒 ( 消化法 )( 測(cè)培養(yǎng)細(xì)胞、培養(yǎng)液 )
100mL 病毒沉淀劑
250 次 植物 RNAout
20U Poly(A) 聚合酶
人中性粒細(xì)胞分離液 1.085 120907-200 200mL
柱式 BAC DNAout 90607-50 50 次
200mL 人 NK 細(xì)胞分離液 1.062
50 次 磁珠植物 DNAout
250 次 細(xì) DNAout
200mL 小鼠胰島細(xì)胞分離液 1.072
肌酸激酶測(cè)試劑盒 18-0390-24 24 T
RNA 電泳液 ,10× 3150-250 250mL
1000μL 山羊抗兔 IgG(H+L),,辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記
100g DNA GuSCN( 異硫氰酸胍 )
50 次 柱式凋亡 DNAout
1mL HB101 種
Therminator γ DNA 聚合酶 130617-200 200U
電泳二甲苯藍(lán) FF 溶液,,1% 100934-10 10mL
1000U T4 RNA 連接酶
25mg 蛋白酶 K