荷斯坦奶牛胎兒成纖維細(xì)胞,；pCSN2-HLZ價(jià)格質(zhì)量保證:    
我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC,、ECACC、DSMZ,、JCRB等,，購(gòu)買(mǎi)到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增,、凍存,，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè)，100%進(jìn)口來(lái)源,，100%保證5代以?xún)?nèi),，活力>95%，無(wú)細(xì)菌,、真菌,、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶(hù)手中,，1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問(wèn)題,，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶(hù)提供一次,。

荷斯坦奶牛胎兒成纖維細(xì)胞；pCSN2-HLZ價(jià)格操作步驟：

1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基,、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,，加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞,，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,，37℃孵育,，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大,、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,，加入新鮮培養(yǎng)基,，晃動(dòng)細(xì)胞瓶，終止胰酶作用,，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,，制成細(xì)胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ?，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),，加入新鮮培養(yǎng)基,，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況,。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi),，1000rpm離心5min，棄去上清,，加入新鮮的培養(yǎng)基,，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液,，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng),。

【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研,，不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱(chēng)
形態(tài)特性  成纖維細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性  該細(xì)胞屬專(zhuān)利保藏,，其特征特性尚未公開(kāi),。 
培養(yǎng)條件  DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  10%FBS
傳代方法  1:3傳代，3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 陰性
STR 
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 未定
細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1,、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清,，10%,。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%,；二氧化碳，5%,。 溫度：37攝氏度,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基,，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存,。
二,、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基,，培養(yǎng)）,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2,、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次,。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞,，1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式,，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起,，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),，可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,，細(xì)胞變圓脫落后,，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存,。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘,，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走）,，加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中,，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存,。

彈性蛋白酶(含10mL酶解緩沖液)    1mL            
牛膽鹽/Bile salt from ox    BR，60%    國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口    25克    
大鼠肺動(dòng)脈成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基    100mL            
細(xì)菌總數(shù)顯色培養(yǎng)基配套平皿/Total Genes Chromogenic Medium Dish        國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口    9㎝/塊    
Sp2/0-Ag14(小鼠骨髓瘤細(xì)胞)    5×106cells/瓶×2            
P3X63Ag8.653(小鼠骨髓瘤細(xì)胞)    5×106cells/瓶×2            
PA317(小鼠成纖維細(xì)胞)    5×106cells/瓶×2    gersion        
MKN-28(人胃高轉(zhuǎn)移細(xì)胞)    5×106cells/瓶×2            
MDA-MB-468(人腺細(xì)胞)    5×106cells/瓶×2    gersion        
MDA-MB-453(人腺細(xì)胞)    5×106cells/瓶×2            
HIC(人小腸細(xì)胞)    5×106cells/瓶×2            
A673(人橫紋肌瘤細(xì)胞)    5×106cells/瓶×2            
CRFK(貓腎細(xì)胞)    5×106cells/瓶×2            
小鼠內(nèi)臟脂肪細(xì)胞*培養(yǎng)基    100mL            
A549/DDP, 人肺腺耐藥細(xì)胞株                
食管鱗    英文名稱(chēng)：        KYSE150    
5%糖發(fā)酵管/5% Lactose Ferment Broth    糖遲發(fā)酵菌種的鑒別    國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口    250克    
人軟骨細(xì)胞*培養(yǎng)基    100mL            
PLET瓊脂基礎(chǔ)/多粘菌素B溶菌酶乙二胺四乙酸乙酸亞瓊脂基礎(chǔ)/PLET Agar Base    炭疽桿菌的分離鑒別    國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口    250克    
人回盲腸細(xì)胞    英文名稱(chēng)：        HCT-8   100mL    RNase-free  ,3M,pH 5.2    
200mL    人淋巴細(xì)胞分離液 1.077(FICOLL 配置 )     
過(guò)氧化氫定量分析試劑盒 ( 脂兼容性 )    18-0330-250    250 T
TAE 電泳液 ,50×    100211-250    250mL
5g    傘形酮    
100mL    DNA  CTAB 溶液,，20%    
50 次    柱式 OLIGO 回收試劑盒    
1mL    Rosetta-gami B(DE3)plysS 種    
WarmStart Bst DNA 聚合酶    131162-1600    1600U
電泳過(guò)硫酸銨    100879-1    0.1gx10
10000U    T3 RNA 聚合酶    
25mg    彈性蛋白酶 ( 豬胰 )    
50 次    微量蛋白沉淀試劑盒    
100μL    小鼠抗 HA 標(biāo)簽單抗    
蛋白酶 K 溶液,，10mg/mL    80911-1.5    1.5mL
dNTP 溶液，100mM     51208C-5     5mL
1.5mL    甜菜堿溶液,，5M,，PCR     
100μL    Etoposide( *泊苷 / 鬼臼乙叉苷 )    
50 次    SP6 體外轉(zhuǎn)錄試劑盒    
500 次    阿爾瑪藍(lán)細(xì)胞增殖與細(xì)胞毒檢測(cè)試劑    
嘌呤硫    CAS321-30-2    5g
植物種屬鑒定 PCR Mix 6    131129F-100    100 次
20 次    細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒（Annexin V- 熒光素 594）    
1mL    桿肽溶液 ,100mg/mL