詳細(xì)介紹
大耳山羊腎細(xì)胞;LDG-2價格質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來源于ATCC,、ECACC,、DSMZ、JCRB等,,購買到貨后,,由我們實驗室擴(kuò)增、凍存,,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,,100%進(jìn)口來源,100%保證5代以內(nèi),,活力>95%,,無細(xì)菌,、真菌,、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中,,1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次,。
大耳山羊腎細(xì)胞,;LDG-2價格操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),,吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細(xì)胞,,加入適量胰酶,,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,,每隔2~3min顯微鏡下觀察,,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,,加入新鮮培養(yǎng)基,,晃動細(xì)胞瓶,終止胰酶作用,,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,,置37℃溫箱培養(yǎng),,隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),,1000rpm離心5min,,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,,用吸管小心吹散沉淀,,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi),,加入新鮮培養(yǎng)基,,置37℃溫箱培養(yǎng)。
【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,,不可用于臨床診斷和治療,。
細(xì)胞名稱
形態(tài)特性 上皮樣,多角形
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細(xì)胞系來源于一雄性大耳山羊的腎組織。1990年由中國科學(xué)院昆明細(xì)胞庫建立,。
培養(yǎng)條件 M-199: with Earle's Balanced Salts Solution (EBSS) 15%NBS
傳代方法 1:2傳代,;3-4天一次
傳代情況 P3
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法(-)
STR -
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),,90%,;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%,。
2,、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%,;二氧化碳,,5%。 溫度:37攝氏度,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,,10%DMSO,,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存,。
二,、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)),。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
對于懸浮細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,,可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。貼壁細(xì)胞凍存時,,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時,,應(yīng)將細(xì)胞收集,,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),,加入部分新鮮培養(yǎng)基,,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存,。
500mL L-15 培養(yǎng)基 ( 含 1% 雙抗 +10% 小牛血清 )
100mL DNA Tris HCl,,1M,pH6.5
雙染細(xì)胞凋亡檢測試劑盒(Annexin V-FITC·PI) 81025-25 25 次
DNA 電泳分子量標(biāo)準(zhǔn) (3)pBR322/MspI 90602B-50 50 次
5mg 生物素化兔 IgG
50mL 丁基硫介質(zhì)
5mg 5- 溴 -4- 氯 -3- 吲哚葡萄糖苷
200U Klenow 片段
卵磷脂 ( 蛋黃 ) CAS8002-43-5 10g
胰蛋白酶抑制劑,,10mg/mL 100834-10 10mL
30 次 柱式腐殖酸清除劑
1mg MM1-43(FM®1-43)
10μL AP 標(biāo)記的抗地高抗體
400U RNase 抑制劑 ( 人源 )
5次 天凈沙非同位素探針雜交試劑盒
T4 聚核苷酸激酶 120506-200 200U
AMV cDNA *鏈合成試劑盒 130608-30 30 次
100U Vent DNA 聚合酶
1mL 鮭魚精 DNA 溶液
10g 馬來酸
10μL AP 標(biāo)記的抗生物素抗體
3,5 二硝基水楊酸 CAS609-99-4 25gM17瓊脂/M17 Agar 牛奶和制品中酸菌檢測和分離培養(yǎng) 國產(chǎn)/進(jìn)口 250克
人脈絡(luò)膜血管細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
腸道菌計數(shù)瓊脂/結(jié)晶紫中性紅膽鹽葡聚糖瓊脂/VRBDA 腸道菌計數(shù)和腸桿菌科鑒別 國產(chǎn)/進(jìn)口 250克
人鼻咽母系細(xì)胞 英文名稱: CNE-2Z
抗生素Ⅷ號培養(yǎng)基/抗生素8號培養(yǎng)基/Antibiotic Agar NO.8 去甲萬古霉素的效價測定 國產(chǎn)/進(jìn)口 250克
大鼠腎小管上細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
去氧膽酸鹽瓊脂/脫氧膽酸鈉瓊脂/DCLA 大腸菌群的平板測定以及腸道菌的選擇性培養(yǎng) 國產(chǎn)/進(jìn)口 250克
Western Blot封閉液Ⅱ(奶粉,pH7.5)/Blocking Buffer(milk) 100ml,、500ml 100ml、500ml
胰蛋白胨膽鹽瓊脂/Tryptone Bile Agar 大腸桿菌的膜過濾法選擇性培養(yǎng) 國產(chǎn)/進(jìn)口 250克
S180/小鼠腹水瘤 株 國產(chǎn)
KP-N-NS(人腎上腺神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞(腦轉(zhuǎn)移)) 5×106cells/瓶×2
NCI-H520(人肺鱗細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 gersion