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詳細(xì)介紹
犬細(xì)支氣管上皮細(xì)胞,；CBE1價(jià)格質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來源于ATCC,、ECACC、DSMZ,、JCRB等,，購(gòu)買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增,、凍存,，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測(cè)，100%進(jìn)口來源,，100%保證5代以內(nèi),，活力>95%,，無細(xì)菌、真菌,、支原體污染,。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中，1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
犬細(xì)支氣管上皮細(xì)胞,；CBE1價(jià)格操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基,、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),，吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,，加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞，加入適量胰酶,，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察,，待貼壁細(xì)胞間間隙變大,、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基,，晃動(dòng)細(xì)胞瓶,，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,，制成細(xì)胞懸液,。控制吹打的力度,，避免產(chǎn)生大量的氣泡,，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基,，置37℃溫箱培養(yǎng),，隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),，1000rpm離心5min,，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基,，用吸管小心吹散沉淀,，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),，加入新鮮培養(yǎng)基,，置37℃溫箱培養(yǎng),。
【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療,。
細(xì)胞名稱
形態(tài)特性 上皮樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 該細(xì)胞屬專利保藏,，其特征特性尚未公開。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,，3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 未定
細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1,、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%,；優(yōu)質(zhì)胎牛血清,，10%。
2,、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%；二氧化碳,，5%。 溫度：37攝氏度,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基,，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存,。
二,、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基,，培養(yǎng)）,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2,、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺(tái),，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出,，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞,，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式,，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3,、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后,，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),，應(yīng)將細(xì)胞收集,，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走）,，加入部分新鮮培養(yǎng)基,，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
二苯胺磺酸鋇 分子式： 633.88 分子量： C24H20BaN2O6S2 英文名稱： Two aniline sulfonic acid CAS號(hào)： 6211-24-1
靛紅 分子式： 147.13 分子量： C8H5NO2 英文名稱： Isatin CAS號(hào)： 91-56-5
克利西丁 分子式： 137.18 分子量： C8H11NO,；CH3OC6H3(CH3)NH 英文名稱： Chris Shiden CAS號(hào)： 120-71-8
4-硝基-7-苯并氧雜惡二唑 分子式： 249.23 分子量： C10H11N5O3 英文名稱： 4- nitro -7- piperazine benzo oxa evil two triazole CAS號(hào)： 139332-66-4
異丙硫醇 分子式： 76.16 分子量： C3H8S 英文名稱： ISO - C CAS號(hào)： 75-33-2
叔丁基硫 分子式： 146.29 分子量： C8H18S 英文名稱： Tert butyl sulfide CAS號(hào)： 107-47-1
丁二酸 分子式： 118.09 分子量： C4H6O4 英文名稱： Succinate CAS號(hào)： 110-15-6
嘧啶肟草 分子式： 609.59 分子量： C32H27N5O8 英文名稱： Ether of the CAS號(hào)： 168088-61-7
克菌丹 分子式： 330.6 分子量： C9H8NSO2Cl3 英文名稱： Captan CAS號(hào)： 133-06-2
醋酸潑尼松 分子式： 400.46 分子量： C23H28O6 英文名稱： Prednisone acetate CAS號(hào)： 125-10-0
低載量 PCR 片段純化試劑盒 90211-100 100 次
100 次 雙熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)試劑盒
200mL 大鼠粒細(xì)胞分離液 1.119
0.1mL×10 DH5α 化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞
1mL 抗凝血酶Ⅲ,，10mg/mL
EcoRI 17-0050 2000U
DAB 法生物素雜交試劑盒 131214-5 5次
100μg Tth RecA 蛋白
50 次 端粒酶重復(fù)片段擴(kuò)增試劑盒 (TRAP)
5次 PCR 法 DNA 探針生物素標(biāo)記試劑盒
10U ATP 硫酸化酶
細(xì)種屬鑒定及分型 D026-1 1 個(gè)樣
T3 體外轉(zhuǎn)錄試劑盒 91108A-50 50 次
1g 維生素 D3
100mL 福林酚試劑
5g 8- 羥基喹啉硫
100mL 酵母產(chǎn)孢培養(yǎng)基
加拿大樹膠 CAS8007-47-4 100mL
去垢劑去除樹脂 131050-10 10mL
10 次 柱式探針純化試劑盒
5g 玫瑰紅鹽
1g 氨芐青干粉
1.5mL 非酶 RNA 清除劑 1.0
1mL Y2HGold 酵母種
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