詳細(xì)介紹
豚鼠皮膚細(xì)胞,;GP-S1價(jià)格質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來源于ATCC,、ECACC,、DSMZ、JCRB等,,購(gòu)買到貨后,,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測(cè),,100%進(jìn)口來源,100%保證5代以內(nèi),,活力>95%,,無細(xì)菌、真菌,、支原體污染,。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
豚鼠皮膚細(xì)胞,;GP-S1價(jià)格操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基,、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),,吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,,加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞,加入適量胰酶,,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,,待貼壁細(xì)胞間間隙變大,、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),,加入新鮮培養(yǎng)基,,置37℃溫箱培養(yǎng),,隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),,1000rpm離心5min,,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,,用吸管小心吹散沉淀,,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),,加入新鮮培養(yǎng)基,,置37℃溫箱培養(yǎng)。
【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,,不可用于臨床診斷和治療,。
細(xì)胞名稱
形態(tài)特性 成纖維細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 該細(xì)胞系來源于一雌性豚鼠的皮膚組織。2001年由中國(guó)科學(xué)院昆明細(xì)胞庫(kù)建立,。
培養(yǎng)條件 M-199: with Earle's Balanced Salts Solution (EBSS) 15%NBS
傳代方法 1:2傳代,;3-4天一次
傳代情況 P3
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 熒光法(-)
STR -
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),,90%,;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%,。
2,、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%,;二氧化碳,,5%。 溫度:37攝氏度,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,,10%DMSO,,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存,。
二,、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)),。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺(tái),,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3,、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),,應(yīng)將細(xì)胞收集,,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),,加入部分新鮮培養(yǎng)基,,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存,。
茵陳色原酮 分子式: 316.26 分子量: C16H12O7 英文名稱: Capillarisin CAS號(hào): 56365-38-9
它勃寧 分子式: 336.43 分子量: C21H24N2O2 英文名稱: It 40 CAS號(hào): 4429-63-4
2,3-羥基白樺酸 分子式: 472.71 分子量: C30H48O4 英文名稱: 2,3- hydroxybetulinic acid CAS號(hào): 85999-40-2
連翹脂苷A 分子式: 624.58714 分子量: C29H36O15 英文名稱: Forsythiaside A CAS號(hào): 79916-77-1
甘草酸單銨鹽 分子式: 839.96 分子量: C42H65NO16 英文名稱: Mono ammonium salt CAS號(hào): 53956-04-0
兒茶素 分子式: 290.26806 分子量: C15H14O6 英文名稱: Er CAS號(hào): 154-23-4
白頭翁素 分子式: 192.17 分子量: C10H8O4 英文名稱: Anemonin CAS號(hào):
鄰苯三酚紅 分子式: 400.36 分子量: C19H12O8S 英文名稱: The adjacent benzene three phenol red CAS號(hào): 32638-88-3
溴氯酚蘭 分子式: 581.06 分子量: C19H10Br2Cl2O5S 英文名稱: Bromochlorophenol blue CAS號(hào): 2553-71-1
酸性紅18 分子式: 604.47 分子量: C20H11N2Na3O10 英文名稱: Acid red 18 CAS號(hào): 2611-82-7
香豆素 498 分子式: 319.38 分子量: C16H17NO4S 英文名稱: 498 CAS號(hào): 87331-48-4
單細(xì)胞裂解液 (RNA) 130804-1 1mL
10mL 戊二醛,,25% 水溶液
0.25mL GTP 溶液,100mM
10g 植酸
50 支 鼻腔采樣拭子
氯化銨 T CAS149358-73-6 5g
AH109 酵母感受態(tài)細(xì)胞 140386-10 10×100μL
5mL 星形細(xì)胞生長(zhǎng)因子
750U 核酸外切酶 I
500mg 葡萄糖 -6- 磷酸二
48 管 DTT,,免稱量蛋白
D- 半乳糖 CAS59-23-4 25g
干粉型 SB 培養(yǎng)基 100822-250 250g
25 次 一站式動(dòng)物 mRNAout
5mg 堿性磷酸酶 ( 大腸桿 )
1g 環(huán)磷酰胺
100μL 山羊抗兔 IgG(Fc),,堿性磷酸酶標(biāo)記
甲基橙 CAS547-58-0 5g
一站式 MBP 標(biāo)簽蛋白純化套裝 130871-20 20 次