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人結(jié)直腸腺癌細胞;HT-29價格

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更新時間:2017-01-11 08:41:20瀏覽次數(shù):565

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,,謝謝!

產(chǎn)品簡介

人結(jié)直腸腺癌細胞,;HT-29價格售后:收到細胞后7天,如發(fā)現(xiàn)細胞有質(zhì)量問題(如污染,,死亡,,快遞運輸?shù)仍颍r,應(yīng)出具書面質(zhì)量問題報告并及時傳真致銷售人員,,我們將盡快為您解決,。

詳細介紹

人結(jié)直腸腺癌細胞;HT-29價格質(zhì)量保證:    
我們的細胞株來源于ATCC,、ECACC,、DSMZ、JCRB等,,購買到貨后,,由我們實驗室擴增、凍存,,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,,100%進口來源,100%保證5代以內(nèi),,活力>95%,,無細菌、真菌,、支原體污染,。 細胞到達客戶手中,1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,,導(dǎo)致細胞在凍存前死亡,,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。

人結(jié)直腸腺癌細胞,;HT-29價格操作步驟:

1)貼壁細胞傳代:提前將培養(yǎng)基,、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),,吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,,加少量PBS潤洗細胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細胞,,37℃孵育,,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大,、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細胞瓶,,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,,制成細胞懸液,。控制吹打的力度,,避免產(chǎn)生大量的氣泡,,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,,置37℃溫箱培養(yǎng),,隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),,1000rpm離心5min,,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,,用吸管小心吹散沉淀,,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),,加入新鮮培養(yǎng)基,,置37℃溫箱培養(yǎng)。

【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,,不可用于臨床診斷和治療,。
細胞名稱
形態(tài)特性  上皮樣;多角
生長特性 貼壁生長
特征特性  該細胞是1964年由Fogh J用移植培養(yǎng)方法和含15%FBS的F12培養(yǎng)液從原發(fā)性腫瘤分離的,。近來,,已建株的培養(yǎng)細胞用含血清的McCoy's 5a培養(yǎng)基培養(yǎng)。 該細胞系在裸鼠中成瘤,,也能在類固醇處理的地鼠中成瘤,。該細胞可合成IgA、CEA,、TGFβ結(jié)合蛋白和黏液素,;表達尿激酶受體,但沒有檢測到血漿酶原活性;不表達CD4,,但細胞表面表達半乳糖神經(jīng)酰胺(HIV的可能替代受體),。該細胞系癌基因c-myc、K-ras,、H-ras,、N-ras、Myb,、sis,、fos陽性;p53基因過表達,,并且在273位密碼子處發(fā) 
培養(yǎng)條件  RPMI 1640 (w/o Hepes)  15%NBS
傳代方法  1:3傳代,;3-4天一次
傳代情況 不詳
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法(-)
STR  Amelogenin:X;D8S1179:10, 16,;D21S11:29,30,;D7S820:10;CSF1PO:11, 12,;D3S1358:15, 17,;TH01:6, 9;D13S317:11, 12,;D16S539:11, 12,;D2S1338:19, 23;D19S433:14,;vWA:17, 19,;THOX:8, 9;D18S51:13,;D5S818:11, 12,;FGA:20, 22。
同工酶 
染色體  68-72
使用權(quán)限 A類
細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1,、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,,10%,。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,,95%,;二氧化碳,5%,。 溫度:37攝氏度,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,,10%DMSO,,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存,。
二,、細胞處理:
1、復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,,培養(yǎng)),。第二天換液并檢查細胞密度,。
2,、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng),。
對于貼壁細胞,,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,,1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,,可進行細胞凍存,。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,,細胞變圓脫落后,,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存,。懸浮細胞凍存時,,應(yīng)將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,,少量保存上清液(防止細胞吸走),,加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存,。

120905-200人淋巴細胞分離液 1.077(FICOLL 配置 ) 200mL
80101-50一管式病毒 DNA-RNAout50 次
熱啟動 Taq DNA 聚合酶100U
磁珠法 mRNA 提取試劑盒25 次
一管式 DNA 膠回收試劑盒100 次
小鼠瘤細胞分離液 1.070200mL
18-0370-50活性氧 ( 羥自由基 ) 測試盒 ( 比色法 )50 T
100816-250堿性膠電泳液 ,10×250mL
山羊抗兔 IgG(Fc),堿性磷酸酶標記100μL
DNA  EDTA 溶液 ,0.5M,PH8.01 100mL
非凍型細菌 RNA 保存液100mL
BL21(DE3)plysS 菌種1mL
130614-200Therminator DNA 聚合酶200U
90308-25親和硅烷 25mL
T4 DNA 連接酶1000U
蛋白磷酸酶抑制劑混合液 11mL
柱式昆蟲 RNAout50 次
小鼠抗 V5 標簽單抗100μL
120508-0.063腸激酶 ( 輕鏈 )0.063μg植物細胞分裂素(Cytokinin)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠胰蛋白酶原激活肽(TAP)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠纖溶酶/纖維蛋白溶酶(PL/Fbn)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠鼠痘毒(MPV)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠皮質(zhì)醇(Cortisol)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠可溶性E選擇素(sE-selectin)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白(AFP)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠高遷移率族蛋白1(HMG-1)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠穿孔素/成孔蛋白(PF/PFP)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠β內(nèi)酰胺酶抑制劑(BLI)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠25羥基維生素D3(25(OH)D3/25 HVD3)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
兔子細胞間粘附分子3(ICAM-3/CD50)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
兔子表皮生長因子(EGF)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
兔抗平滑肌抗體(ASMA) ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人總膽汁酸(TBA)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人載脂蛋白B1(apo-B1)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人胰蛋白酶原激活肽(TAP)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人血管內(nèi)皮細胞生長因子C(VEGF-C)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人纖溶酶原激活劑(PLGA)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人脫氫表雄酮S7(DHEA-S7)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人鼠嗜酸粒細胞趨化因子(ECF)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人乳腺易感蛋白2(BRCA-2)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝

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