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產(chǎn)品型號(hào)
品 牌ATCC
廠商性質(zhì)經(jīng)銷商
所 在 地上海市
更新時(shí)間:2017-01-11 08:41:20瀏覽次數(shù):616次
聯(lián)系我時(shí),,請(qǐng)告知來自 化工儀器網(wǎng)人膀胱移行細(xì)胞癌細(xì)胞,;T-24價(jià)格
人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞,;HT-29價(jià)格質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來源于ATCC,、ECACC、DSMZ,、JCRB等,,購買到貨后,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增,、凍存,,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測(cè),100%進(jìn)口來源,,100%保證5代以內(nèi),,活力>95%,無細(xì)菌,、真菌,、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中,,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次,。
人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞,;HT-29價(jià)格操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基,、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),,吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,,加少量PBS潤洗細(xì)胞,加入適量胰酶,,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,,待貼壁細(xì)胞間間隙變大,、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,,制成細(xì)胞懸液,。控制吹打的力度,,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi),,加入新鮮培養(yǎng)基,,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況,。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),,1000rpm離心5min,棄去上清,,加入新鮮的培養(yǎng)基,,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi),,加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),。
【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,,不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱
形態(tài)特性 上皮樣,;多角
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細(xì)胞是1964年由Fogh J用移植培養(yǎng)方法和含15%FBS的F12培養(yǎng)液從原發(fā)性腫瘤分離的,。近來,已建株的培養(yǎng)細(xì)胞用含血清的McCoy's 5a培養(yǎng)基培養(yǎng),。 該細(xì)胞系在裸鼠中成瘤,,也能在類固醇處理的地鼠中成瘤,。該細(xì)胞可合成IgA、CEA,、TGFβ結(jié)合蛋白和黏液素,;表達(dá)尿激酶受體,但沒有檢測(cè)到血漿酶原活性,;不表達(dá)CD4,,但細(xì)胞表面表達(dá)半乳糖神經(jīng)酰胺(HIV的可能替代受體)。該細(xì)胞系癌基因c-myc,、K-ras,、H-ras、N-ras,、Myb,、sis、fos陽性,;p53基因過表達(dá),,并且在273位密碼子處發(fā)
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 15%NBS
傳代方法 1:3傳代;3-4天一次
傳代情況 不詳
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 熒光法(-)
STR Amelogenin:X,;D8S1179:10, 16,;D21S11:29,30;D7S820:10,;CSF1PO:11, 12,;D3S1358:15, 17;TH01:6, 9,;D13S317:11, 12,;D16S539:11, 12;D2S1338:19, 23,;D19S433:14,;vWA:17, 19;THOX:8, 9,;D18S51:13,;D5S818:11, 12;FGA:20, 22,。
同工酶
染色體 68-72
使用權(quán)限 A類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1,、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%,;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,,10%。
2,、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,,95%,;二氧化碳,5%,。 溫度:37攝氏度,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3,、凍存液:90%*培養(yǎng)基,,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,。液氮儲(chǔ)存,。
二、細(xì)胞處理:
1,、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,,加入約8ml培養(yǎng)基,,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
2,、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺(tái),,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,,1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,,將剩余細(xì)胞懸起,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3,、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存,。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,,1000RPM條件下離心4分鐘,,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,,加入到凍存管中,,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
120905-200人淋巴細(xì)胞分離液 1.077(FICOLL 配置 ) 200mL
80101-50一管式病毒 DNA-RNAout50 次
熱啟動(dòng) Taq DNA 聚合酶100U
磁珠法 mRNA 提取試劑盒25 次
一管式 DNA 膠回收試劑盒100 次
小鼠瘤細(xì)胞分離液 1.070200mL
18-0370-50活性氧 ( 羥自由基 ) 測(cè)試盒 ( 比色法 )50 T
100816-250堿性膠電泳液 ,10×250mL
山羊抗兔 IgG(Fc),,堿性磷酸酶標(biāo)記100μL
DNA EDTA 溶液 ,0.5M,PH8.01 100mL
非凍型細(xì)菌 RNA 保存液100mL
BL21(DE3)plysS 菌種1mL
130614-200Therminator DNA 聚合酶200U
90308-25親和硅烷 25mL
T4 DNA 連接酶1000U
蛋白磷酸酶抑制劑混合液 11mL
柱式昆蟲 RNAout50 次
小鼠抗 V5 標(biāo)簽單抗100μL
120508-0.063腸激酶 ( 輕鏈 )0.063μg植物細(xì)胞分裂素(Cytokinin)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
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小鼠纖溶酶/纖維蛋白溶酶(PL/Fbn)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
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