人慢性髓系白血病細(xì)胞；K562圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研,，不可用于臨床診斷和治療,。
細(xì)胞名稱 人慢性髓系白血病細(xì)胞；K562圖片
形態(tài)特性  淋巴母細(xì)胞樣,；圓形
生長特性 懸浮生長
特征特性  該細(xì)胞系由Lozzio and Lozzio 于1975年從一名53歲慢性髓系白血病女性患者的胸水中分離建立,。此細(xì)胞株被廣泛用于自然殺傷方面的研究,。K-562母細(xì)胞是一種具多能性的造血系統(tǒng)的惡性腫瘤細(xì)胞,，能自發(fā)分化成可識別的紅系、粒系和單核系的祖細(xì)胞,；表達(dá)CD7,。 
培養(yǎng)條件  RPMI 1640 (w/o Hepes)   15%NBS
傳代方法  1：3傳代；3-5天一次
傳代情況 PN12
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法（-）
STR  Amelogenin：X,；D8S1179：12,；D21S11：29， 31,；D7S820：9,，11；CSF1PO：9,，10,；D3S1358：16,；TH01：9.3；D13S317：8,；D16S539：11,，12；D2S1338：17,；D19S433：14,14.2,；vWA：16；THOX：8, 9,；D18S51：15,16,；D5S818：11,12；FGA：21, 24,。
同工酶 
染色體  59-68
使用權(quán)限 A類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1,、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%,；優(yōu)質(zhì)胎牛血清,，10%。
2,、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%；二氧化碳,，5%,。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3,、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配,。液氮儲存。
二,、細(xì)胞處理：
1,、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
2,、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
對于貼壁細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次,。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出,，在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞,，1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,，將剩余細(xì)胞懸起,，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3,、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),，可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后,，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),，應(yīng)將細(xì)胞收集,，1000RPM條件下離心4分鐘,，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基,，加入到凍存管中,，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
質(zhì)量保證:    
我們的細(xì)胞株來源于ATCC,、ECACC,、DSMZ、JCRB等,，購買到貨后,，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,，100%進(jìn)口來源，100%保證5代以內(nèi),，活力>95%,，無細(xì)菌、真菌,、支原體污染,。   細(xì)胞到達(dá)客戶手中，1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基,、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,，加少量PBS潤洗細(xì)胞,，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,，37℃孵育,，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大,、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動細(xì)胞瓶,，終止胰酶作用,，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ?，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi),，加入新鮮培養(yǎng)基,，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況,。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),，1000rpm離心5min，棄去上清,，加入新鮮的培養(yǎng)基,，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液,，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi),，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng),。

雜交袋20 個
鏈霉親和素,，AP 標(biāo)記0.5mL
1000 μL RNase-free 藍(lán)吸頭 ( 盒裝 )100 支
5-Fluorouracil(5- 氟脲嘧啶 )1mL
UTP 溶液，100mM0.25mL
18-0690-100脂質(zhì)氧化 (MDA) 檢測試劑盒100 次
130905-10超雜交液 ( 芯片 )10mL
TE 緩沖液,，PH8.010mL
非凍型血液 DNA 保存液100mL
多聚 -L- 賴氨酸 (15-30 萬 )25mg
魚類種屬鑒定 PCR Mix100 次
CAS25988-63-0多聚 -L- 賴氨酸 (7-15 萬 )25mg
130528-1植物蛋白酶抑制劑1mL
柱式動物線粒體 DNAout,，測序15 次
冷凍型血液 RNA 保存液100mL
聚乙烯醇100g
微量 RNA 定量試劑盒1mL
CAS77-86-1三 ( 羥甲基 ) 氨基甲烷100g兔抗腦組織抗體(ABAb)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人總膽固醇（TC）ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人載脂蛋白A4（apo-A4）ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人胰蛋白酶原Ⅱ(Try-Ⅱ)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子B(VEGF-B)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人纖溶酶原(Plg)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人脫氫表雄酮(DHEA)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人輸血傳播毒/辛型肝炎毒((TTV)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人乳腺易感蛋白1(BRCA-1)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人破傷風(fēng)抗體(Tetanus Ab)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人免疫球蛋白輕鏈kappa抗體(κ-IgLC)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人鏈激酶(SK)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體(cANCA)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人抗類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎核抗原抗體(RANA)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人抗IVIgG抗體ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人甲種胎兒球蛋白/人甲胎蛋白(AFP)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人黑色素細(xì)胞抗體(MC Ab)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人肝細(xì)胞生長因子受體(HGFR/ c-MET)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
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