人源性腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞舒尼替尼耐藥株；ACSuR圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研,，不可用于臨床診斷和治療,。
細(xì)胞名稱 人源性腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞舒尼替尼耐藥株；ACSuR圖片
形態(tài)特性  上皮樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性  該細(xì)胞屬專利保藏,，其特征特性尚未公開(kāi),。 
培養(yǎng)條件  MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  10%FBS
傳代方法  1:3傳代，3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 陰性
STR 
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 未定
細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1,、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清,，10%,。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%,；二氧化碳，5%,。 溫度：37攝氏度,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3,、凍存液：90%*培養(yǎng)基,，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配,。液氮儲(chǔ)存,。
二、細(xì)胞處理：
1,、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,，加入約8ml培養(yǎng)基,，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
2,、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次,。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式,，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起,，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),，可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,，細(xì)胞變圓脫落后,，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存,。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走）,，加入部分新鮮培養(yǎng)基,，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存,。
質(zhì)量保證:    
我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC,、ECACC、DSMZ,、JCRB等，購(gòu)買到貨后,，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增,、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè),，100%進(jìn)口來(lái)源,，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%,，無(wú)細(xì)菌,、真菌、支原體污染,。   細(xì)胞到達(dá)客戶手中,，1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問(wèn)題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次,。
操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),，吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞,，加入適量胰酶,，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育,，每隔2~3min顯微鏡下觀察,，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,，加入新鮮培養(yǎng)基,，晃動(dòng)細(xì)胞瓶，終止胰酶作用,，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,，制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度,，避免產(chǎn)生大量的氣泡,，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基,，置37℃溫箱培養(yǎng),，隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi),，1000rpm離心5min,，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基,，用吸管小心吹散沉淀,，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),，加入新鮮培養(yǎng)基,，置37℃溫箱培養(yǎng)。

柱式軟體動(dòng)物 DNAout50 次
22-0610-40Tubulin-Tracker Red( 微管紅色熒光探針 )40μL
3671-50血液 DNAout50 次
青 G 鹽溶液 ,200mg/mL1 Mu
C41(DE3) 菌種1mL
RNA 電泳液 ,10×250mL
革氏陽(yáng)性細(xì)菌質(zhì)粒 DNAout50 次
131134-100Percoll100mL
130994-196 孔板質(zhì)粒 DNAout( 真空法 )1次
人培養(yǎng)細(xì)胞基因組 DNA30μg
D- 果糖250g
RNase-free Tris HCl,1M,pH 7.0100mL
雜交管 (35×300mm)1個(gè)
18-0530-100神經(jīng)氨酸酶抑制劑篩選試劑盒100 次
100875-1.5DNA 非變性 PAGE 上樣液1.5mL
山羊抗小鼠 IgG,，熒光素 488 標(biāo)記0.1mg
DNA  Tris HCl,，1M，pH8.5100mL
蛋白酶抑制劑混合液2×0.5mL
克必隆 eTS cDNA 文庫(kù)構(gòu)建試劑盒1套
120307-1000SP6 RNA 聚合酶1000U
90605A-5TdT 加尾法 DNA 標(biāo)記試劑盒5次
T7 核酸外切酶1000U
低 pH 緩沖液套裝30 次人通用轉(zhuǎn)錄復(fù)合體(GTC)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白Eotaxin 1(Eotaxin 1/CCL11)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人乳頭瘤毒16（HPV-16）ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人皮膚淋巴細(xì)胞相關(guān)抗原(CLA)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人免疫球蛋白G Fc段受體Ⅰ(FcγRⅠ/CD64)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人利鉀尿肽(KP)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人抗乙型肝炎毒核心IgM抗體(HBcAb-IgM)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人抗巨噬細(xì)胞抗體(anti-macrophage Ab)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人抗BB抗體(BB-Ab)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人集落刺激因子(CSF)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人核因子κB受體活化因子配基(RANKL)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人甘露糖結(jié)合蛋白/甘露糖結(jié)合凝集素(MBP/MBL)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人對(duì)環(huán)磷酰胺(CTX)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人促性腺激素釋放激素(GnRH)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人丙肝抗原（HCV-Ag）ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人白介素2可溶性受體α鏈(IL-2sRα/CD25)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人β2微球蛋白(BMG/β2-MG)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人L苯丙氨酸解氨酶(PAL)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人Ⅲ型前膠原氨基端肽(PⅢNT)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
犬血管性血友因子（VWF）ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
牛熱休克蛋白27（HSP-27）ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝