人肺鱗癌細(xì)胞,；SK-MES-1圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研,，不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱 人肺鱗癌細(xì)胞,；SK-MES-1圖片
形態(tài)特性  上皮細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性  該細(xì)胞源于一位65歲的白種男人,，分離自由肺癌轉(zhuǎn)移到的胸膜積液中。 
培養(yǎng)條件  MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  10%FBS
傳代方法  1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 PN5
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 陰性
STR 
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 A類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1,、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清,，10%,。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%,；二氧化碳，5%,。 溫度：37攝氏度,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3,、凍存液：90%*培養(yǎng)基,，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配,。液氮儲(chǔ)存,。
二、細(xì)胞處理：
1,、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基,，培養(yǎng)）,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2,、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次,。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式,，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起,，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),，可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,，細(xì)胞變圓脫落后,，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),，應(yīng)將細(xì)胞收集,，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走）,，加入部分新鮮培養(yǎng)基,，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存,。
質(zhì)量保證:    
我們的細(xì)胞株來源于ATCC,、ECACC、DSMZ,、JCRB等，購(gòu)買到貨后,，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增,、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測(cè),，100%進(jìn)口來源,，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%,，無細(xì)菌,、真菌、支原體污染,。   細(xì)胞到達(dá)客戶手中,，1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次,。
操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),，吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞,，加入適量胰酶,，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育,，每隔2~3min顯微鏡下觀察,，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,，加入新鮮培養(yǎng)基,，晃動(dòng)細(xì)胞瓶,，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,，制成細(xì)胞懸液,。控制吹打的力度,，避免產(chǎn)生大量的氣泡,，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基,，置37℃溫箱培養(yǎng),，隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),，1000rpm離心5min,，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基,，用吸管小心吹散沉淀,，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),，加入新鮮培養(yǎng)基,，置37℃溫箱培養(yǎng)。

鏈親和素0.1mg
SalI1000U
CAS9024-52-6醛縮酶100mg
140592-1000PCNA 小鼠單抗1000 μL
80601-250非凍型細(xì)菌 RNA 保存液250mL
免 RNA 提取 RT-PCR 試劑盒 100 次
3-( 環(huán)己胺 )-1- 丙磺酸10g
間充質(zhì)干細(xì)胞生長(zhǎng)因子5mL
胰蛋白酶抑制劑,，10mg/mL10mL
21-0160-5 角膜上皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子5mL
60401-250RNase-free 75% 乙醇250mL
PCR Mix 染料10mL
氨基磁珠2mL
大提柱式土壤 DNAout4次
Afu 尿嘧啶 -DNA 糖基化酶200U
CAS6131-99-3二甲基酸5g
70602-100DNA 快速連接試劑盒100 次
一站式 MBP 標(biāo)簽蛋白純化套裝20 次
克必隆 eTS 細(xì)菌基因組差減雜交試劑盒7次
卵清蛋白 10g
成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子5mL
DNA  EDTA 2Na100g
140628-20雙染細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒（Annexin V- 熒光素 488·PI） 20 次
120654A-20 Southern DNA Marker( 生物素 )20 次
石蠟包埋組織 DNAout30 次
動(dòng)物 RNAout(TRIzol) 100mL人類白C抗原DR（HLA-DR）ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人抗心磷脂抗體IgM(ACA-IgM)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人抗甲狀腺過氧化物酶抗體(TPO-Ab)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
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人基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1（SDF-1）ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人過氧化氫酶(CAT)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人干擾素α2a(IFN-α2a)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人凋亡相關(guān)因子配體(FASL)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人促黃體激素(LH)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
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人白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人α突觸核蛋白(α-SYN)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人FMS樣酪氨酸激酶3(Flt3)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人2,3Dinor血栓烷B2(2,3-dinor-TXB2)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
犬腎上腺髓質(zhì)素(ADM)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
牛磷酸果糖激酶(PFK)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
雞瘤壞死因子α（TNF-α）ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
雞白介素4(IL-4)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
鵝褪黑素（MT/MLT）ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠載脂蛋白A(apo-A)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠血管生長(zhǎng)素(ANG)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）ELISA試劑盒96T\48T試劑盒組裝/原裝
大鼠熱休克蛋白27(HSP-27)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝