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產(chǎn)品型號(hào)
品 牌ATCC
廠商性質(zhì)經(jīng)銷商
所 在 地上海市
更新時(shí)間:2017-01-10 17:21:47瀏覽次數(shù):321次
聯(lián)系我時(shí),,請(qǐng)告知來自 化工儀器網(wǎng)人膀胱移行細(xì)胞癌細(xì)胞,;T-24價(jià)格
人源肝癌細(xì)胞,;LIXC-004圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,,不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱 人源肝癌細(xì)胞;LIXC-004圖片
形態(tài)特性 上皮細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 該細(xì)胞屬專利保藏,,其特征特性尚未公開,。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,3-4天傳1次
傳代情況 C2
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 未定
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1,、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,,10%,。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,,95%,;二氧化碳,5%,。 溫度:37攝氏度,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3,、凍存液:90%*培養(yǎng)基,,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,。液氮儲(chǔ)存,。
二、細(xì)胞處理:
1,、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,,加入約8ml培養(yǎng)基,,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
2,、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次,。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存,。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,,1000RPM條件下離心4分鐘,,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,,加入到凍存管中,,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來源于ATCC,、ECACC,、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增,、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測(cè),,100%進(jìn)口來源,,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,,無細(xì)菌,、真菌、支原體污染,。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中,,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次,。
操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),,吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細(xì)胞,,加入適量胰酶,,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,,每隔2~3min顯微鏡下觀察,,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,,加入新鮮培養(yǎng)基,,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止胰酶作用,,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),,加入新鮮培養(yǎng)基,,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況,。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),,1000rpm離心5min,,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,,用吸管小心吹散沉淀,,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),,加入新鮮培養(yǎng)基,,置37℃溫箱培養(yǎng)。
131128K-100鳥類種屬鑒定 PCR Mix100 次
XL10-Gold 感受態(tài)細(xì)胞0.1 mL×10
肝 / 肌糖元測(cè)試盒 48 T
8- 羥基喹啉5g
百萬堿基真菌 DNAout10 次
CAS11028-71-0刀豆蛋白 A IV25mg
12-42BL21(DE3)plysS 菌種1mL
血液 DNAout50 次
色素細(xì)胞生長(zhǎng)因子 - 不含 TPA5mL
蛋白酶 K25mg
牛血清 γ 球蛋白標(biāo)準(zhǔn)品,,2mg/mL1mL
CAS9001-22-3β- 葡萄糖苷酶100UN
130895-100YPD 液體培養(yǎng)基100mL
衣5mg
膠回收及 PCR 片段純化兩用試劑盒100 次
麗春紅 S10g
山羊抗兔 IgG,,異硫氰酸熒光素標(biāo)記0.1mg
CAS830-81-9#NAME?5g
130579-100小鼠抗 MBP 標(biāo)簽單抗100μL雌酮E(ESTRONE)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人表面膜免疫球蛋白A(mIgA)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人白介素1β轉(zhuǎn)換酶(ICE)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人α羥基丁酸脫氫酶(αHBDH)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人EJ抗體/抗甘氨酰tRNA合成酶抗體(EJ/GlyRS)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人Ⅰ型膠原吡啶交聯(lián)終肽(ICTP)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
犬內(nèi)皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
牛可溶性白細(xì)胞分化抗原86(B7-2/sCD86)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
雞乙酰乙酸檢測(cè)(ACAC)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
雞白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
鵝免疫球蛋白M(IgM)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠游離脂肪酸(FFA)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體1(VEGFR-1)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠糖原磷酸化酶同工酶BB(GP-BB)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠醛固酮(ALD)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠磷酸化細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶(pERK)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠膠原酶II(Collagenase II)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠胱硫醚β合成酶(CBS)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠蛋白激酶C(PKC)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
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