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詳細(xì)介紹
人肝癌細(xì)胞,；Homo Spaniens cell line Hep B1.2圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研,，不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱 人肝癌細(xì)胞,；Homo Spaniens cell line Hep B1.2圖片
形態(tài)特性 上皮細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 該細(xì)胞屬專利保藏,，其特征特性尚未公開(kāi)。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,，3-4天傳1次
傳代情況 C10
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 未定
細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1,、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),，90%,；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%,。
2,、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%,；二氧化碳，5%,。 溫度：37攝氏度,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3,、凍存液：90%*培養(yǎng)基,，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配,。液氮儲(chǔ)存,。
二、細(xì)胞處理：
1,、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,，加入約8ml培養(yǎng)基,，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
2,、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺(tái),，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出,，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞,，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,，將剩余細(xì)胞懸起,，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后,，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),，應(yīng)將細(xì)胞收集,，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走）,，加入部分新鮮培養(yǎng)基,，加入到凍存管中,，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存,。
質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC,、DSMZ,、JCRB等，購(gòu)買到貨后,，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增,、凍存,，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè)，100%進(jìn)口來(lái)源,，100%保證5代以內(nèi),，活力>95%，無(wú)細(xì)菌,、真菌,、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中,，1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問(wèn)題,，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次,。
操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基,、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),，吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,，加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞，加入適量胰酶,，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察,，待貼壁細(xì)胞間間隙變大,、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基,，晃動(dòng)細(xì)胞瓶,，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,，制成細(xì)胞懸液,。控制吹打的力度,，避免產(chǎn)生大量的氣泡,，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基,，置37℃溫箱培養(yǎng),，隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi),，1000rpm離心5min,，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基,，用吸管小心吹散沉淀,，制成細(xì)胞懸液,，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基,，置37℃溫箱培養(yǎng),。
L- 組氨25g
β- 淀粉酶100g
山羊抗兔 IgG(H+L)，異硫氰酸熒光素標(biāo)記100 μL
CAS50-70-4D- 山梨醇250g
81226-10Tricine-SDS-PAGE 陰極電泳液 ( 干粉 )10L
總抗氧化能力測(cè)試盒 ( 比色法 )24 T
綠如藍(lán)核酸染料 (UV)0.5mL
葡聚糖凝膠 G-25 中顆粒25g
鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶測(cè)試盒24 T
CAS9013-53-0微球菌核酸酶15KU
140598-1000山羊抗小鼠 IgG(H+L),，異硫氰酸熒光素標(biāo)記1000 μL
101117-50柱式植物 RNA-DNA 雙提試劑盒50 次
NdeI400U
5(6)-TRITC10mg
支氣道上皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子5mL
X-Gal 干粉0.5g
21-0460-5滋養(yǎng)層細(xì)胞生長(zhǎng)因子5mL
17-005-100010 μL RNase-free 白吸頭 ( 袋裝長(zhǎng)尖 )1000 支
Protein A+G 瓊脂糖2mL
BLOTTO 溶液100mL小鼠三磷酸腺苷（ATP）ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠免疫球蛋白M(IgM)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠抗IVIgG抗體ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠花生四烯酸(AA)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠疊氮胸苷(AZT)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠白介素9(IL-9)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠P53(P53-ab)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
豚鼠基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP-9)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
兔子可溶性粘附分子(Sam)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
兔載脂蛋白B100(apo-B100)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
蘇云金芽孢桿菌蛋白(BT)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人瘤壞死因子β(TNF-β)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人異常凝血酶原(APT)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人血小板活化因子(PAF)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人胸腺非依賴性抗原(TI-Ag)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人戊型肝炎毒IgG(HEV-IgG)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人糖蛋白130(gp130)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人腎素(Renin)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
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