人肝癌細胞,；Homo Spaniens cell line Hep B1.2圖片【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱 人肝癌細胞,；Homo Spaniens cell line Hep B1.2圖片
形態(tài)特性  上皮細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性  該細胞屬專利保藏,，其特征特性尚未公開。 
培養(yǎng)條件  DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  10%FBS
傳代方法  1:3傳代,，3-4天傳1次
傳代情況 C10
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR 
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 未定
細胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1,、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%,；優(yōu)質(zhì)胎牛血清,，10%。
2,、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%；二氧化碳,，5%,。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3,、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配,。液氮儲存。
二,、細胞處理：
1,、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基,，培養(yǎng)）,。第二天換液并檢查細胞密度。
2,、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出,，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞,，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式,，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3,、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存,。貼壁細胞凍存時,，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后,，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,，再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,，應將細胞收集,，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細胞吸走）,，加入部分新鮮培養(yǎng)基,，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存,。
質(zhì)量保證:    
我們的細胞株來源于ATCC,、ECACC,、DSMZ、JCRB等,，購買到貨后,，由我們實驗室擴增、凍存,，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,，100%進口來源，100%保證5代以內(nèi),，活力>95%,，無細菌、真菌,、支原體污染,。   細胞到達客戶手中，1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,，導致細胞在凍存前死亡,，我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
操作步驟：
1）貼壁細胞傳代：提前將培養(yǎng)基,、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預熱,，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi)，吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,，加少量PBS潤洗細胞,，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細胞,，37℃孵育,，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細胞間間隙變大,、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動細胞瓶,，終止胰酶作用,，用吸管小心吹打貼壁的細胞,，制成細胞懸液,。控制吹打的力度,，避免產(chǎn)生大量的氣泡,，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基,，置37℃溫箱培養(yǎng),，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細胞傳代：將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min,，棄去上清,，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀,，制成細胞懸液,，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基,，置37℃溫箱培養(yǎng),。

L- 組氨25g
β- 淀粉酶100g
山羊抗兔 IgG(H+L)，異硫氰酸熒光素標記100 μL
CAS50-70-4D- 山梨醇250g
81226-10Tricine-SDS-PAGE 陰極電泳液 ( 干粉 )10L
總抗氧化能力測試盒 ( 比色法 )24 T
綠如藍核酸染料 (UV)0.5mL
葡聚糖凝膠 G-25 中顆粒25g
鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶測試盒24 T
CAS9013-53-0微球菌核酸酶15KU
140598-1000山羊抗小鼠 IgG(H+L),，異硫氰酸熒光素標記1000 μL
101117-50柱式植物 RNA-DNA 雙提試劑盒50 次
NdeI400U
5(6)-TRITC10mg
支氣道上皮細胞生長因子5mL
X-Gal 干粉0.5g
21-0460-5滋養(yǎng)層細胞生長因子5mL
17-005-100010 μL RNase-free 白吸頭 ( 袋裝長尖 )1000 支
Protein A+G 瓊脂糖2mL
BLOTTO 溶液100mL小鼠三磷酸腺苷（ATP）ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠免疫球蛋白M(IgM)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠抗IVIgG抗體ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠花生四烯酸(AA)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠疊氮胸苷(AZT)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠白介素9(IL-9)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠P53(P53-ab)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
豚鼠基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP-9)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
兔子可溶性粘附分子(Sam)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
兔載脂蛋白B100(apo-B100)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
蘇云金芽孢桿菌蛋白(BT)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人瘤壞死因子β(TNF-β)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人異常凝血酶原(APT)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人血小板活化因子(PAF)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人胸腺非依賴性抗原(TI-Ag)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人戊型肝炎毒IgG(HEV-IgG)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人糖蛋白130(gp130)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人腎素(Renin)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝