人肺巨細胞癌高轉(zhuǎn)移系,；PGBE1圖片【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療,。
細胞名稱 人肺巨細胞癌高轉(zhuǎn)移系；PGBE1圖片
形態(tài)特性  上皮細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性  PGBE1由朱偉勇和鄭杰于1995年建系,。源自人肺巨細胞癌系分離了多個單細胞克隆，經(jīng)體外侵襲實驗和裸鼠體內(nèi)接種相結(jié)合進行了初步鑒定后,，挑選其中３個克隆化細胞亞系之一,。該細胞在裸鼠體內(nèi)的成瘤率均為１００％,，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率為９４％,。 
培養(yǎng)條件  MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  10%FBS
傳代方法  1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C7
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR  STR鑒定
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 A類
細胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清,，10%,。
2,、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%,；二氧化碳,，5%,。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3,、凍存液：90%*培養(yǎng)基,，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配,。液氮儲存,。
二、細胞處理：
1,、復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）,。第二天換液并檢查細胞密度。
2,、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng),。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出,，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞,，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式,，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起,，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3,、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存,。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,，再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,，應(yīng)將細胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘,，少量保存上清液（防止細胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基,，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存,。
質(zhì)量保證:    
我們的細胞株來源于ATCC,、ECACC,、DSMZ,、JCRB等,，購買到貨后，由我們實驗室擴增,、凍存,，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進口來源,，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%,，無細菌,、真菌,、支原體污染。   細胞到達客戶手中,，1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,，導(dǎo)致細胞在凍存前死亡,，我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
操作步驟：
1）貼壁細胞傳代：提前將培養(yǎng)基,、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi)，吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,，加少量PBS潤洗細胞,，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細胞,，37℃孵育,，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細胞間間隙變大,、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動細胞瓶,，終止胰酶作用,，用吸管小心吹打貼壁的細胞，制成細胞懸液,?？刂拼荡虻牧Χ龋苊猱a(chǎn)生大量的氣泡,，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),，加入新鮮培養(yǎng)基,，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況,。
2）懸浮細胞傳代：將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min,，棄去上清,，加入新鮮的培養(yǎng)基,，用吸管小心吹散沉淀,，制成細胞懸液，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),，加入新鮮培養(yǎng)基,，置37℃溫箱培養(yǎng),。

先鋒溶液 ,100mg/mL1mL
古細菌種屬鑒定 PCR Mix 1100 次
土鹽10g
生物素標(biāo)記的 Oligo(dT)5μg
CAS9007-49-2鮭魚精 DNA100mg
12-244Novablue(DE3) 菌種1mL
鹽酸壯觀1g
IPTG 溶液,，200mg/mL1.5mL
蘇木色精10g
Western 封堵液500mL
CAS75277-39-3N-2- 羥乙基 -N’-2- 乙基磺酸25g
60203-1硫酸新干粉1g
乙酰水楊酸100g
金胺 O5g
D- 氨基葡萄糖鹽10g
一步法 96 孔板質(zhì)粒 DNAout( 真空法 )1次
CAS6342-17-21,4- 雙丙烯酰1g
131020-10Sephacryl S-400 基質(zhì)10mL
中草藥 DNAout100 次
lambda(λ)DNA5μg
過氧化氫酶 ( 牛肝 )1g
雙染細胞凋亡檢測試劑盒（Annexin V-PE·7-AAD） 20 次人尿肌酐(UCR)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人硫酸褪黑色素(MS)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人可溶性血纖蛋白單體復(fù)合物(SFMC)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人抗髓鞘相關(guān)糖蛋白抗體(MAG)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人抗核膜糖蛋白210抗體(gp210)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人解脲脲原體抗體(UU-Ab)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人基質(zhì)金屬蛋白酶12（MMP-12）ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人骨橋素(OPN)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人風(fēng)疹毒抗體(RV-Ab)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人的牛血清白蛋白殘留檢測ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
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人CXC趨化因子受體1(CXCR1)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人4羥基壬烯酸（4-HNE）ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
犬白細胞分化抗原8(CD8)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
牛膽酸(Cholic acid)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
雞瘦素(LEP)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝