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人黑色瘤細胞系,;A375價格

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更新時間:2017-01-10 16:28:04瀏覽次數(shù):278

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,,謝謝!

產(chǎn)品簡介

人黑色瘤細胞系,;A375價格售后:收到細胞后7天,如發(fā)現(xiàn)細胞有質量問題(如污染,,死亡,,快遞運輸?shù)仍颍r,應出具書面質量問題報告并及時傳真致銷售人員,,我們將盡快為您解決,。

詳細介紹

人黑色瘤細胞系,;A375價格質量保證:    
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC,、DSMZ,、JCRB等,購買到貨后,,由我們實驗室擴增,、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,,100%進口來源,,100%保證5代以內,活力>95%,,無細菌,、真菌、支原體污染,。 細胞到達客戶手中,,1個月內出現(xiàn)任何問題,導致細胞在凍存前死亡,,我們公司都可以免費再向客戶提供一次,。

人黑色瘤細胞系;A375價格操作步驟:

1)貼壁細胞傳代:提前將培養(yǎng)基,、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內,吸除或倒掉細胞瓶內舊培養(yǎng)液,,加少量PBS潤洗細胞,,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細胞,,37℃孵育,,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大,、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細胞瓶,,終止胰酶作用,,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液,??刂拼荡虻牧Χ龋苊猱a(chǎn)生大量的氣泡,,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,,加入新鮮培養(yǎng)基,,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況,。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉移到無菌離心管內,,1000rpm離心5min,棄去上清,,加入新鮮的培養(yǎng)基,,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,,加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),。

【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,,不可用于臨床診斷和治療
細胞名稱
形態(tài)特性  成纖維細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性  該細胞源于一位54歲女性黑色素瘤患者的皮膚組織,,由Giard DJ建系,。其染色體為超三倍體,帶有62條染色體,。其中九條標志染色體普遍存在于A375細胞中,,而普通染色體N2, N6和N22在細胞中只有一條。該細胞是與中國醫(yī)學科學院基礎醫(yī)學研究所細胞中心交換并保藏,。 
培養(yǎng)條件  DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  10%FBS
傳代方法  1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C165
凍存條件  基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR  STR鑒定
同工酶 
染色體 
使用權限 A類
細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1,、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%,;優(yōu)質胎牛血清,,10%。
2,、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,,95%;二氧化碳,,5%,。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,,10%DMSO,,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存,。
二,、細胞處理:
1,、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或將細胞懸液加入10cm皿中,,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)),。第二天換液并檢查細胞密度,。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,,即可進行傳代培養(yǎng),。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3,、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,,再添加10%DMSO后進行凍存,。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,,1000RPM條件下離心4分鐘,,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,,加入到凍存管中,,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。

固綠5g
接頭 DNA(Sal I-Sma I)5nmol
CAS9004-54-0葡聚糖 T-200010g
12-131Rosetta-gami(DE3)plysS 菌種1mL
液相內毒素清除劑500 次
JM109(DE3) 菌種1mL
L- 阿拉伯糖10g
DNA 包被溶液100mL
CAS636-00-06- 羥基多巴胺5g
120701-10鏈脲佐菌素溶液 ,10mg/mL10mL
吲哚 -3- 1g
聚乙二醇 6000250g
二硫赤蘚醇1g
DNA 探針變性液10mL
CAS113-98-4青 G 鹽1Mu
90610-1卵白蛋白標準品,,2mg/mL1mL
重組蛋白 A/G1mg
LBA4404 農(nóng)桿菌感受態(tài)細胞10×100μL
葡萄糖氧化酶10Ku
雙染細胞凋亡檢測試劑盒(Annexin V- 熒光素 555·7-AAD)20 次
CAS4197-25-5蘇丹 B5g
90403-5蛋白膠中量回收試劑盒5次
α- 乳糖100g小鼠透明質酸結合蛋白(HABP)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠卵巢標志物CA125ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠巨噬細胞炎性蛋白1β(MIP-1β/CCL4)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠核因子κB亞基p65親和肽(NF-κB p65)ELISA試劑盒48T/96T試劑盒組裝/原裝
小鼠抵抗素(Resistin)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠白介素-33(IL-33)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠NOD樣受體-1(NOD-1)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
豚鼠超氧化物歧化酶(SOD)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
兔子可溶性E選擇素(sE-selectin)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
兔氧化低密度脂蛋白抗體(OLAb)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
山羊生長激素釋放多肽(GHRP)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人中性粒細胞堿性磷酸酶(NAP)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人乙型肝炎病毒核心抗原(HBcAg) ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人血吸蟲(schistosoma)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人信號轉導分子(Smad1)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人胃泌素細胞抗體(GCA)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人肽聚糖(PG)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝

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