詳細(xì)介紹
人腎腺癌細(xì)胞,;ACHN圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療,。
細(xì)胞名稱 人腎腺癌細(xì)胞,;ACHN圖片
形態(tài)特性 上皮細(xì)胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 ACHN細(xì)胞系建系于1979年,衍生于一個患惡性腎癌的22歲男性白人病料,。細(xì)胞系在MNM培養(yǎng)液中穩(wěn)定傳代150天,,然后大量增殖接種裸鼠,4周后產(chǎn)生明顯的局部浸染性腫瘤,。干擾素可抑制該細(xì)胞系增殖,,因此,,ACHN細(xì)胞可用于人干擾素和干擾素誘導(dǎo)劑的抗細(xì)胞增殖研究。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS,;1%NEAA
傳代方法 1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C31
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶 同工酶鑒定
染色體
使用權(quán)限 A類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1,、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%,;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,,10%。
2,、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,,95%;二氧化碳,,5%,。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3,、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,,現(xiàn)用現(xiàn)配,。液氮儲存。
二,、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,,培養(yǎng)),。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2,、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次,。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3,、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。貼壁細(xì)胞凍存時,,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時,,應(yīng)將細(xì)胞收集,,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),,加入部分新鮮培養(yǎng)基,,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存,。
質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來源于ATCC,、ECACC、DSMZ,、JCRB等,,購買到貨后,,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,,100%進(jìn)口來源,100%保證5代以內(nèi),,活力>95%,,無細(xì)菌、真菌,、支原體污染,。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基,、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,,加少量PBS潤洗細(xì)胞,,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,,37℃孵育,,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大,、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細(xì)胞瓶,,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,,制成細(xì)胞懸液,。控制吹打的力度,,避免產(chǎn)生大量的氣泡,,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,,置37℃溫箱培養(yǎng),,隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),,1000rpm離心5min,,棄去上清,,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,,制成細(xì)胞懸液,,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,,置37℃溫箱培養(yǎng),。
Zinquin 乙酯5mg
β- 瓊脂糖酶Ⅰ500U
18-0670-48游離脂肪酸測試盒48 T
80915B-100超雜交液 B(含甲酰胺)100mL
TE 緩沖液,PH7.010mL
非凍型細(xì)菌 RNA 保存液100mL
硼氫化氰5g
HRP 標(biāo)記的抗地高抗體10μL
CAS92-71-72,5- 二苯基惡唑5g
12-219Tuner(DE3)plysS 菌種1mL
一步式胞漿蛋白微量制備試劑盒30 次
即用型 PCR 檢測試劑盒系列50T
氯5g
動物種屬鑒定 PCR Mix 3100 次
CAS146-68-9碘硝基四唑紫嘌呤250mg
90613-100動物細(xì)胞核蛋白微量制備試劑盒100 次
魚精蛋白硫1g
Karnovsky 固定液250 mL
L- 鹽酸半胱氨酸25g
Carnoy 固定液250 mL
CAS329-98-6苯甲基磺1g
131077-10組氨酸標(biāo)簽蛋白染色試劑盒10 次
柱式 RNA 純化試劑盒50 次
Lyso-Tracker Red( 溶酶體紅色熒光探針 )50μL雞免疫球蛋白M(IgM)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
猴子血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子受體-3(VEGFR-3)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠組蛋白H2b(histon-H2b)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白3(IGFBP-3)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠心肌肌鈣蛋白Is(cTnI)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠雙氫睪酮(DHT)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠凝血因子Ⅱ(FⅡ)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠顆粒酶B(Gzms-B)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子4(TIMP-4)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠高敏甲狀腺素(u-T4)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠雌二醇受體(ER)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠β羥丁酸(βOHB)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠Ⅳ型膠原(Col Ⅳ)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
豬熱休克蛋白20(HSP-20)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
豬白介素2(IL-2)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
羊促黃體激素(LH)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠游離睪酮(F-TESTO)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子受體1(VEGFR-1)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠糖原磷酸化酶同工酶MM(GP-MM)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠熱休克蛋白糖蛋白96(HSP gp96)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝