人肝癌細(xì)胞；Hep-3B價(jià)格質(zhì)量保證:    
我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC,、ECACC、DSMZ,、JCRB等,，購(gòu)買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增,、凍存,，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè)，100%進(jìn)口來(lái)源,，100%保證5代以內(nèi),，活力>95%，無(wú)細(xì)菌,、真菌,、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中,，1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問(wèn)題,，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次,。

人肝癌細(xì)胞,；Hep-3B價(jià)格操作步驟：

1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),，吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞,，加入適量胰酶,，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察,，待貼壁細(xì)胞間間隙變大,、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基,，晃動(dòng)細(xì)胞瓶,，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,，制成細(xì)胞懸液,。控制吹打的力度,，避免產(chǎn)生大量的氣泡,，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基,，置37℃溫箱培養(yǎng),，隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi),，1000rpm離心5min,，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基,，用吸管小心吹散沉淀,，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),，加入新鮮培養(yǎng)基,，置37℃溫箱培養(yǎng)。

【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研,，不可用于臨床診斷和治療,。
細(xì)胞名稱
形態(tài)特性  上皮細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性  Hep-3b細(xì)胞建系于1979年。該細(xì)胞產(chǎn)生甲胎蛋白（alpha-fetoprotein),、乙肝表面抗原（BHsAg) ,、白蛋白、巨球蛋白,、α- 抗胰蛋白酶（alphal-antitrypsin),、轉(zhuǎn)鐵蛋白、補(bǔ)體（C3),、C3活性載體,，纖維原等，具有廣泛的研究?jī)r(jià)值,。Hep-3b為專利貯存細(xì)胞系,，僅限于研究使用，不能用于商業(yè)目的。 
培養(yǎng)條件  MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  10%FBS
傳代方法  1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C155
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 陰性
STR  STR鑒定
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 A類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1,、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清,，10%,。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%,；二氧化碳，5%,。 溫度：37攝氏度,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3,、凍存液：90%*培養(yǎng)基,，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配,。液氮儲(chǔ)存,。
二、細(xì)胞處理：
1,、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái),，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出,，在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞,，1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,，將剩余細(xì)胞懸起,，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3,、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存,。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集,，1000RPM條件下離心4分鐘,，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基,，加入到凍存管中,，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。

91104A-100Denhardt 溶液,，50×100mL
Therminator γ DNA 聚合酶200U
非酶 DNA 清除劑 -215 次
L- 谷胱甘肽 ( 氧化型 )1g
植物種屬鑒定 PCR Mix 7100 次
CAS7447-40-7氯化100g
81223-100增強(qiáng)型 DAB 顯色試劑盒100mL
90802-5大提柱式 DNA 清除劑5次
Oligo dT12-18 引物,，0.5μg/μL5μg
Carboxy-PTIO( 一氧化氮清除劑 )50mg
一步式廣譜 DNAout10mL
SP 交換介質(zhì)50mL
131101-0.5生物素化蛋白 L0.5mg
130987C-5接頭 DNA(Hind Ⅲ -Sma I)5nmol
小鼠白細(xì)胞分離液 1.093200mL
即用型多重 PCR 試劑盒50 次
5- 溴 -4- 氯 -3- 吲哚 -β-D- 半乳糖苷100mg
Klenow 片段 (3´ → 5´ exo-)200U
CAS25988-63-0多聚 -L- 賴氨酸 (15-30 萬(wàn) )25mg
130526-10細(xì)菌蛋白酶抑制劑10mL
柱式動(dòng)物 RNAout50 次
酪蛋白溶液 (PBS)100mL
黃嘌呤氧化酶5u
非變性蛋白分子量標(biāo)準(zhǔn)25mgAMPPD100mg
Protein A 磁珠1mL
130420-1Protein G 瓊脂糖1mL
嘌呤霉素干粉25mg
大提無(wú)內(nèi)毒素質(zhì)粒 DNAout10 次
CAS26177-86-6D- 果糖 -6- 磷酸二100mg
130565-30β-Actin 小鼠單抗30μL
130887-50植物葉綠體蛋白提取試劑盒50 次
Taq DNA 聚合酶500U
姬姆色素染料1g
CAS9001-78-9堿性磷酸酶 ( 大腸桿菌 )5mg
100902-100DNA 異硫氰酸胍溶液，5M100mL
Glucosamine( 胰島素抵抗誘導(dǎo)劑 )5g
四硼酸,，十水100g
蛋白酶 K 溶液,，10mg/mL1.5mL
雜交管 (35×300mm)1個(gè)
131131D-100草桿菌 PCR Mix 4100 次
L-(+) 乳酸鋰鹽5g
Okadaic acid 鹽 (PP1 和 PP2A 抑制劑 )10μg
17-0090HinfI 2000U
60911-50硅膠膜離心吸附柱系列 ( 小提 )50 套
90904-50膜結(jié)合 DNA 清除試劑盒50 次