詳細介紹
人急性早幼粒白血病細胞;HL-60價格質(zhì)量保證:
我們的細胞株來源于ATCC,、ECACC,、DSMZ、JCRB等,,購買到貨后,,由我們實驗室擴增、凍存,,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,,100%進口來源,100%保證5代以內(nèi),,活力>95%,,無細菌、真菌,、支原體污染,。 細胞到達客戶手中,1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,,導致細胞在凍存前死亡,,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
人急性早幼粒白血病細胞,;HL-60價格操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養(yǎng)基,、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),,吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,,加少量PBS潤洗細胞,加入適量胰酶,,使胰酶的量能蓋住細胞,,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,,待貼壁細胞間間隙變大,、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,,晃動細胞瓶,,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,,制成細胞懸液,。控制吹打的力度,,避免產(chǎn)生大量的氣泡,,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,,置37℃溫箱培養(yǎng),,隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),,1000rpm離心5min,,棄去上清,,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,,制成細胞懸液,,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,,置37℃溫箱培養(yǎng),。
【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療,。
細胞名稱
形態(tài)特性 淋巴母細胞樣
生長特性 懸浮生長
特征特性 該細胞由Collins SJ從一位患有急性早幼粒細胞性白血病的36歲白人女性的外周血中分離建立,;可自發(fā)分化,或在丁酸鹽,、次黃嘌呤,、佛波醇肉豆蔻酸(PMA,TPA)、DMSO(1% to 1.5%),、放線菌素D和視黃酸的刺激下發(fā)生分化,;PMA刺激后可分泌TNF-α。該細胞具有吞噬活性和趨化反應(yīng),,癌基因myc陽性,,表達補體受體和FcR(來源于藥物所)。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C49
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶 同工酶鑒定
染色體
使用權(quán)限 A類
細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1,、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,,10%,。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,,95%,;二氧化碳,5%,。 溫度:37攝氏度,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3,、凍存液:90%*培養(yǎng)基,,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,。液氮儲存,。
二、細胞處理:
1,、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,,培養(yǎng)),。第二天換液并檢查細胞密度,。
2,、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng),。
對于貼壁細胞,,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,,1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,,將剩余細胞懸起,,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3,、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,,可進行細胞凍存,。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,,細胞變圓脫落后,,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存,。懸浮細胞凍存時,,應(yīng)將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,,少量保存上清液(防止細胞吸走),,加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存,。
P004-1蛋白質(zhì)表達與純化技術(shù)服務(wù)一個蛋白
131218-2GTP 溶液,2.5mM2mL
無機焦磷酸酶,,熱穩(wěn)定250U
GS200 酵母菌種1mL
制霉菌素100mg
dCTP 溶液,,100mM0.5mL
CAS528-50-7纖維素 DE-52100g
121112-10Stbl3 感受態(tài)細胞0.1 mL×10
心肌黃酶1KU
核苷酸類似物法易錯 PCR 試劑盒15 次
亞精胺三鹽酸鹽1g
脫氧膽酸5g
CAS26177-86-6D- 果糖 -6- 磷酸二100mg
100885-0.5X-Gal 干粉0.5g
一站式磁珠法全血 mRNA 提取試劑盒50 次
間充質(zhì)干細胞成骨細胞分化生長因子5mL
α- 乳糖100g
Ficoll-Paque 介質(zhì)100mL
CAS145224-94-82-(N- 嗎啡啉 ) 乙磺酸10g
100202-100兔抗 His 標簽多抗,HRP 標記100μL
真菌種屬鑒定 PCR Mix 7100 次
克必隆平末端克隆試劑盒(組成型)20 次
赤霉素250mg
Forskolin( 苷酸環(huán)化酶激活劑 )1mg
陶瓷研缽 ( 直徑 75 mm)1個
131031-100人基因組 DNA,,男性100μg
100930B-1硝酸纖維素膜,,13×20cm1張
Tricine-SDS-PAGE 配膠液1000mL真菌總蛋白質(zhì)微量提取試劑盒50 次
CAS1772-03-8D- 氨基半乳糖鹽酸鹽250mg
101122-1尼龍膜,13×20cm1張
60608-100固相內(nèi)毒素清除劑100g
TB1 菌種1mL
纖維素 DE-52100g
CAS66676-43-5金黃色葡萄菌 V8 蛋白酶1mg
101204-100DNA Tris HCl,,1M,,pH7.0100mL
GSH 和 GSSG 試劑盒共 100 次
BL21-CodonPlus(DE3) 感受態(tài)細胞10×100μL
PLPD 固定液250 mL
柱式鼠尾 DNAout50 次
60107-20DNA 粘轉(zhuǎn)平試劑盒20 次
lambda(λ)DNA5μg
PMA/TPA (PKC 激活劑 )1mg
17-0160NotI150U
一站式 Tricine-SDS-PAGE 套裝30 次
TMB 法地高雜交試劑盒5次
青霉素 G 鹽1g
SURE 化學感受態(tài)細胞0.1mL×10
CAS9045-22-1肝素鋰1g
120504-5大提柱式藻類 RNAout5次
DMEM 培養(yǎng)基 ( 高糖,含 10% 胎牛血清 )100mL