詳細(xì)介紹
人急性淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞;CEM/C1價(jià)格質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC,、ECACC,、DSMZ、JCRB等,,購(gòu)買到貨后,,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè),,100%進(jìn)口來(lái)源,100%保證5代以內(nèi),,活力>95%,,無(wú)細(xì)菌、真菌,、支原體污染,。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問(wèn)題,,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
人急性淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞,;CEM/C1價(jià)格操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基,、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),,吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,,加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞,加入適量胰酶,,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,,待貼壁細(xì)胞間間隙變大,、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止胰酶作用,,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產(chǎn)生大量的氣泡,,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,,置37℃溫箱培養(yǎng),,隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi),,1000rpm離心5min,,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,,用吸管小心吹散沉淀,,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),,加入新鮮培養(yǎng)基,,置37℃溫箱培養(yǎng)。
【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,,不可用于臨床診斷和治療,。
細(xì)胞名稱
形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞
生長(zhǎng)特性 懸浮生長(zhǎng)
特征特性 CEM/C1是人T細(xì)胞白血病細(xì)胞株CCRF-CEM(見(jiàn)ATCC CCL-119)具有喜樹堿抗性的衍生株。 1991年細(xì)胞株選擇并亞克隆了對(duì)CPT的抗性,。 細(xì)胞表現(xiàn)出對(duì)CPT類似物水溶性的托泊替康和非水溶性的9-氨基-CPT及10,11-亞甲二氧基-CPT具有交叉抗性,。 CEM/C1細(xì)胞對(duì)CPT的敏感性較母系CEM細(xì)胞低31倍。 CEM/C1細(xì)胞表現(xiàn)非典型的多藥抗性和轉(zhuǎn)換拓補(bǔ)異構(gòu)酶I催化活性,。 對(duì)CPT的抗性維持6個(gè)月以上,。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%
傳代方法 1:2,。3天內(nèi)可長(zhǎng)滿,。
傳代情況 PN5
凍存條件 *培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測(cè) 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),,90%,;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%,。
2,、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%,;二氧化碳,,5%。 溫度:37攝氏度,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,,現(xiàn)用現(xiàn)配,。液氮儲(chǔ)存。
二,、細(xì)胞處理:
1,、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)),。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺(tái),,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3,、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),,應(yīng)將細(xì)胞收集,,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),,加入部分新鮮培養(yǎng)基,,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存,。
120631-100Aminoally-dUTP 溶液,,10mM100μL
JM105 菌種1mL
琥珀酸脫氫酶測(cè)試盒48 T
18-0060-50GSH—PX 測(cè)試盒50 T
無(wú)機(jī)焦磷酸酶,熱穩(wěn)定250U
赤250mg
氯化鋰 ( 無(wú)水 )100g
cDNA *鏈合成試劑盒10 次
CAS1397-89-3可溶性兩性 B25mg
中草藥 DNAout20 次
Bst DNA 聚合酶,,大片段800U
AEBSF 溶液,,10mg/mL5mL
130681-0.83通用 miRNA 克隆接頭0.83nmol
130957-100免 RNA 提取 RT-PCR 試劑盒 100 次
3671-50血液 DNAout50 次
低 pH 緩沖液套裝30 次
生物素化蛋白 A1mg
140599-100山羊抗兔 IgG(H+L),異硫氰酸熒光素標(biāo)記100 μL
Southern 真菌 DNAout10 次
8- 氮雜鳥嘌呤1Vial
Carboxy-PTIO( 一氧化氮清除劑 )5mg
0.5 mL RNase-free 離心管1000 支Diethyl azodicarboxylate偶氮二酸二乙酯1972-28-7
2',7'-DICHLOROFLUORESCIN DIACETATE2′7′-二熒光素二乙酸2044-85-1
Cyclohexylamine hydrochloride環(huán)己胺酸4998-76-9
SODIUM METHACRYLATE基丙酸5536-61-8
4-Methoxybenzylchloride4-氧基芐824-94-2
Sesamol芝麻酚533-31-3
CHLORO(DIMETHYL)PHOSPHINE(二基)膦811-62-1
FLUCYTHRINATE菊酯70124-77-5
4-Acetoxybenzoic acid4-乙酰氧基酸2345-34-8
Indirubin靛玉紅479-41-4
Sodium tetrachloroaurate (III) dihydrate金酸13874-02-7
2,2'-(Phenylimino)diethanolN-基二乙醇胺120-07-0
Adriamycin阿霉素23214-92-8
Sodium chlorite亞酸7758-19-2
N-METHYL-N-PHENYLCARBAMOYL CHLORIDEN-基-N-基氨基酰4285-42-1
PALLADIUM(II) TRIFLUOROACETATE三乙酸鈀(II)42196-31-6
L-BUTHIONINE-(S,R)-SULFOXIMINE丁硫氨酸-亞砜亞胺83730-53-4
β-hydroxynorleucineβ-羥基正亮氨酸
18-0480-24醛縮酶測(cè)試盒24 T