詳細(xì)介紹
人T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞;HuT 78圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,,不可用于臨床診斷和治療,。
細(xì)胞名稱 人T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞;HuT 78圖片
形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞樣,;圓形
生長(zhǎng)特性 懸浮生長(zhǎng)
特征特性 該細(xì)胞可產(chǎn)生IL-2,,TNF-α;表達(dá)IL-2受體,。H9 (ATCC HTB-176) 是HuT 78衍生出來(lái)的克隆,。
培養(yǎng)條件 IMDM: Iscove's Modiefied Dulbecco's Medium 胎牛血清,20%
傳代方法 1:2,。3天內(nèi)可長(zhǎng)滿,。
傳代情況
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 陰性
STR Amelogenin:X,Y;CSF1PO:11,12,;D13S317:8,12,;D16S539:11,12;D18S51:18,;D19S433:14,;D21S11:30;D2S1338:20,25,;D3S1358:15,16,;D5S818:11,12;D7S820:8,11,;D8S1179:12,14,;FGA:21,25;TH01:8,9,;TPOX:8,9,;vWA:14,15
同工酶
染色體
使用權(quán)限 B類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),,90%,;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,,10%。
2,、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,,95%;二氧化碳,,5%,。 溫度:37攝氏度,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,,10%DMSO,,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存,。
二,、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,,培養(yǎng)),。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2,、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次,。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3,、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),,應(yīng)將細(xì)胞收集,,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),,加入部分新鮮培養(yǎng)基,,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存,。
質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC,、ECACC、DSMZ,、JCRB等,,購(gòu)買(mǎi)到貨后,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增,、凍存,,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè),100%進(jìn)口來(lái)源,,100%保證5代以內(nèi),,活力>95%,,無(wú)細(xì)菌、真菌,、支原體污染,。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問(wèn)題,,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基,、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,,加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞,,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,,待貼壁細(xì)胞間間隙變大,、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,,制成細(xì)胞懸液,。控制吹打的力度,,避免產(chǎn)生大量的氣泡,,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,,置37℃溫箱培養(yǎng),,隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi),,1000rpm離心5min,,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,,用吸管小心吹散沉淀,,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),,加入新鮮培養(yǎng)基,,置37℃溫箱培養(yǎng),。
12-196NMY51 酵母菌種1mL
130608-30AMV cDNA *鏈合成試劑盒30 次
LY294002(PI3K 抑制劑 )1mg
Z-VAD-FMK(Caspase Inhibitor)1mg
130627-250核酸外切酶 T250U
伊紅 Y 二鹽,水溶性10g
3,3’,5,5’- 四甲基聯(lián)苯胺二鹽酸1g
DNA 電泳分子量標(biāo)準(zhǔn) 200-1500 bp)50 次
Tubulin-Tracker Red( 微管紅色熒光探針 )40μL
CAS28822-58-43- 異丁基 -1- 甲基黃嘌呤250g
3073-200一管式病毒 RNAout200 次
DNA 電泳分子量標(biāo)準(zhǔn) (3)λ/EcoR I+ Hind III50 次
Southern 血液 DNAout10 次
131060-1GST 固定試劑盒1套
柱式石蠟包埋組織 DNAout30 次
一管式病毒 RNAout200 次
固相 RNase 清除劑250mL
雙染細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒(Annexin V- 熒光素 647·7-AAD)20 次
23-0770-2TLR4 激活劑2mL
糖原Ⅲ型500mg
3,5 二硝基水楊酸25gSilver nitrate酸銀7761-88-8
Cyclobutyl chloride環(huán)丁基1120-57-6
NA內(nèi)切酶(BAMH Ⅰ)
2-Amino-5-methylbenzoic acid2-氨基-5-基酸2941-78-8
Triclopyr綠草定55335-06-3
Chlorogenic acid綠原酸327-97-9
7-Nitroindole7-基吲哚6960-42-5
CITRIC ACID TRI-N-PROPYL ESTER檸檬酸三丙酯1587-21-9
2-Amino-5-nitrobenzophenone2-氨基-5-基二1775-95-7
CHLOROPHOSPHONAZO III偶氮膦Ⅲ1914-99-4
2-Chlorobenzyl alcohol2-芐醇17849-38-6
Quinoline喹啉91-22-5
Mildronate米屈肼76144-81-5
2,6-Pyridinedimethanol2,6-吡啶二醇1195-59-1
N-Boc-L-tert-LeucineN-Boc-L-叔亮氨酸62965-35-9
N,O-Bis(trimethylsilyl)acetamideN,O-雙三硅基乙酰胺10416-59-8
Glycidaldehyde diethylacetal環(huán)氧丙縮二乙醇13269-77-7
4-Methoxybenzyl bromide4-氧基溴芐2746-25-0
5,6-Dimethylbenzimidazole5,6-二基并咪唑582-60-5
YPG 液體培養(yǎng)基100mL
Phusion DNA 聚合酶250U
131088-5熒光素 (FITC) 標(biāo)記親和素5mg