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人成巨核細(xì)胞白血病細(xì)胞,;MEG-01圖片

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更新時(shí)間:2017-01-09 15:11:22瀏覽次數(shù):330

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人成巨核細(xì)胞白血病細(xì)胞,;MEG-01圖片售后:收到細(xì)胞后7天,,如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有質(zhì)量問(wèn)題(如污染,死亡,,快遞運(yùn)輸?shù)仍颍r(shí),,應(yīng)出具書面質(zhì)量問(wèn)題報(bào)告并及時(shí)傳真致銷售人員,我們將盡快為您解決,。

詳細(xì)介紹

人成巨核細(xì)胞白血病細(xì)胞,;MEG-01圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療,。
細(xì)胞名稱 人成巨核細(xì)胞白血病細(xì)胞,;MEG-01圖片
形態(tài)特性  淋巴母細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 懸浮生長(zhǎng)
特征特性  MEG-01細(xì)胞株源自一位CML患者成巨核細(xì)胞轉(zhuǎn)換期的骨髓細(xì)胞。 細(xì)胞質(zhì)因子VIII和表面球蛋白IIb/IIIa,,高碘酸-Schiff(PAS)反應(yīng),,α醋酸萘酯酶和酸性磷酸酶陽(yáng)性。 髓過(guò)氧化物酶,,α丁酸萘酯酶,,氯化醋酸AS-D萘苯酚酯酶和堿性磷酸酶陰性,。 用單克隆抗體BA-1(抗B細(xì)胞,粒性白細(xì)胞),,HPL-3(抗球蛋白IIb/IIIa)和20.3(抗單核細(xì)胞,,血小板)染色成陽(yáng)性。 其他淋巴和骨髓類抗體成陰性,。 
培養(yǎng)條件  RPMI 1640 (w/o Hepes)  優(yōu)質(zhì)胎牛血清,,10%
傳代方法  1:2。3天內(nèi)可長(zhǎng)滿,。
傳代情況 PN5
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 陰性
STR 
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 B類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1,、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%,;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%,。
2,、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%,;二氧化碳,,5%。 溫度:37攝氏度,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,,10%DMSO,,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存,。
二,、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,,培養(yǎng)),。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2,、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺(tái),,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3,、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),,應(yīng)將細(xì)胞收集,,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),,加入部分新鮮培養(yǎng)基,,加入到凍存管中,,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
質(zhì)量保證:    
我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC,、ECACC,、DSMZ、JCRB等,,購(gòu)買到貨后,,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè),,100%進(jìn)口來(lái)源,100%保證5代以內(nèi),,活力>95%,,無(wú)細(xì)菌、真菌,、支原體污染,。   細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問(wèn)題,,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次,。
操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基,、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),,吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,,加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞,加入適量胰酶,,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,,待貼壁細(xì)胞間間隙變大,、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,,制成細(xì)胞懸液,。控制吹打的力度,,避免產(chǎn)生大量的氣泡,,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),,加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),,隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況,。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,,棄去上清,,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,,制成細(xì)胞懸液,,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,,置37℃溫箱培養(yǎng),。

一管式病毒 RNAout50 次
120507-25Xa 因子蛋白酶25μg
遺傳100mg
4mL DNA 離心超濾管 (30-50 KD)1個(gè)
X33 酵母菌種1mL
CAS58-58-2嘌呤鹽酸鹽25mg
CAS3483-12-3二硫蘇糖醇 (DTT)5g
81028-25一站式植物 mRNAout25 次
DNA  CTAB 溶液,20%100mL
Southern 細(xì)菌 (G-)DNAout10 次
81203-20SDS-PAGE 電泳液 ( 干粉 )20L
RNA  DEPC ( 焦碳酸二乙酯 )10mL
動(dòng)物上皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子5mL
D/F12 培養(yǎng)基 ( 含 10% 胎牛血清 )100mL
魯米諾血跡鑒定試劑盒100mL
120895-200大鼠白細(xì)胞分離液 1.084200mL
天凈沙細(xì)胞蛋白質(zhì) -RNA 雙提取試劑盒 50 次
交聯(lián)瓊脂糖凝膠 6B100mL
嘌呤干粉25mg
23-0240-100Etoposide( *泊苷 / 鬼臼乙叉苷 )100μL
81224-100BCIP/NBT 顯色試劑盒100mL
油紅 O5gBenzene in Toluene氣相色譜儀檢定用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(-溶液)
Pepstatin胃蛋白酶抑制劑26305-03-3
5-Acetylamido-2-chloroaniline3-氨基-4-乙酰胺51867-83-5
101 White support101白色擔(dān)體
Sodium gluconateD-葡萄糖酸527-07-1
N-BOC-ETHYLENEDIAMINE HYDROCHLORIDEN-BOC-乙酸79513-35-2
Homophthalic acid鄰羧基乙酸89-51-0
6-Aminopyridine-3-carboxamide6-氨基煙酰胺329-89-5
Basic protease性蛋白酶
2'-Chloroacetophenone鄰乙2142-68-9
N-NITROSO-DI-ISO-PROPYLAMINEN-亞基二異丙胺601-77-4
3-Indolepropionic acid吲哚-3-丙酸830-96-6
6-Nitroindole6-基吲哚4769-96-4
2-BROMO-5-IODOBENZOIC ACID2-溴-5-碘酸25252-00-0
2,2'-THENOIN2-羥基-1,2-二(2-噻吩基)乙烷-1-27761-02-0
Methyl L-tyrosina-酪氨酸酯1080-06-4
1,1-Bis(hydroxymethyl)cyclopropane1,1-環(huán)丙烷二醇39590-81-3
4-Chloroindole4-吲哚25235-85-2
N-(3-chloropropyl)dibutylamineN-(3-丙基)二正丁胺36421-15-5
96 孔板病毒 DNAout( 真空法 )1次

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