人結直腸腺癌上皮細胞,；DLD-1圖片【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研,，不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱 人結直腸腺癌上皮細胞,；DLD-1圖片
形態(tài)特性  上皮細胞
生長特性 貼壁生長
特征特性  DLD-1 是1977-1979年間D.L. Dexter和同事分離的兩株結直腸腺癌細胞株中的一株,。 在ATCC和其它地方進行的DNA fingerprinting和染色體組型分析表明這株細胞與HCT-15 (CCL-225)相似，說明這兩者是來自同一個人的不同克隆。 他們的遺傳起源可通過DNA fingerprinting證實,，但染色體組型分析顯示它們?nèi)狈θ旧w標記*改變或數(shù)目上*改變,。 細胞的CSAp陰性(CSAp-)。 DLD-1 細胞的 p53 抗原表達呈陽性(p53 抗原產(chǎn)生了一個C ->  
培養(yǎng)條件  RPMI 1640 (w/o Hepes)  優(yōu)質(zhì)胎牛血清,，10%
傳代方法  消化3-5分鐘,。1:2。3天內(nèi)可長滿,。
傳代情況 PN5
凍存條件  *培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR  Amelogenin:X,Y,；CSF1PO:11,12；D13S317:8,11,；D16S539:12,13,；D18S51:11,17；D19S433:14,16,；D21S11:29,32.2,；D2S1338:17,25；D3S1358:17,；D5S818:13,；D7S820:10,12；D8S1179:15,；FGA:22,；TH01:7,9.3；TPOX:8,11,；vWA:18,19
同工酶 
染色體 
使用權限 A類
細胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1,、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%,；優(yōu)質(zhì)胎牛血清,，10%。
2,、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%；二氧化碳,，5%,。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3,、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配,。液氮儲存,。
二、細胞處理：
1,、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,，加入約8ml培養(yǎng)基,，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細胞密度,。
2、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng),。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出,，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞,，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式,，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,，將剩余細胞懸起,，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3,、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時,，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,，再添加10%DMSO后進行凍存,。懸浮細胞凍存時，應將細胞收集,，1000RPM條件下離心4分鐘,，少量保存上清液（防止細胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基,，加入到凍存管中,，在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
質(zhì)量保證:    
我們的細胞株來源于ATCC,、ECACC,、DSMZ、JCRB等,，購買到貨后,，由我們實驗室擴增、凍存,，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,，100%進口來源，100%保證5代以內(nèi),，活力>95%,，無細菌、真菌,、支原體污染,。   細胞到達客戶手中，1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,，導致細胞在凍存前死亡,，我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
操作步驟：
1）貼壁細胞傳代：提前將培養(yǎng)基,、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預熱,，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi)，吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,，加少量PBS潤洗細胞,，加入適量胰酶,，使胰酶的量能蓋住細胞，37℃孵育,，每隔2~3min顯微鏡下觀察,，待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,，加入新鮮培養(yǎng)基,，晃動細胞瓶，終止胰酶作用,，用吸管小心吹打貼壁的細胞,，制成細胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ?，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),，加入新鮮培養(yǎng)基,，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況,。
2）懸浮細胞傳代：將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min,，棄去上清,，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀,，制成細胞懸液,，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基,，置37℃溫箱培養(yǎng),。

PVDF 膜，0.45μm,，13×20cm1張
非變性法蛋白沉淀試劑盒10 次
CAS59-30-3葉酸5g
胰蛋白酶干粉50g
131085-10親和素10mg
抑制與產(chǎn)生超氧陰離子自由基測試盒 ( 比色法 )50 T
6- 羥基多巴胺5g
K802 菌種1mL
121112-10Stbl3 感受態(tài)細胞0.1 mL×10
Tricine-SDS-PAGE 配膠液1000mL
乳酸過氧化物酶10mg
DNA ,，pH5.2，3M 100mL
柱式血清血漿 RNAout50 次
100829-30中 pH 緩沖液套裝30 次
RNase-free CTAB 溶液 ,20%100mL
RNA  GuSCN( 異硫氰酸胍 )100g
DNA  SDS( 十二烷基硫酸 )100g
CAS66-22-8尿嘧啶5g
131134-100Percoll100mL
土壤 DNAout30 次
L- 賴氨酸鹽酸鹽25g
RNase-free Sarkosyl 溶液 ,10%100mLRaw264.7, 小鼠單核巨噬細胞白血病細胞gersion
H9c2(2-1) (大鼠心肌細胞)5×106cells/瓶×2
TE-10(人食管細胞)5×106cells/瓶×2
WI38/VA13(SV-40Z轉(zhuǎn)化肺成纖維細胞)5×106cells/瓶×2
Romas(人淋巴瘤細胞)5×106cells/瓶×2
A-498(人腎細胞)5×106cells/瓶×2
HFL1(人肺成纖維細胞)5×106cells/瓶×2
小鼠腺英文名稱：EMT-6
Poly-D-lysine溶液規(guī)格：2mg
人胚肺成纖維細胞英文名稱：MRC-5
緩沖李氏菌增菌肉湯基礎添加劑/Buffered Listeria Enrichment Broth Supplement加入225ml緩沖李氏菌增菌肉湯基礎中5毫升國產(chǎn)/進口
大鼠頜下腺上細胞*培養(yǎng)基100mL