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當前位置:上海谷研實業(yè)有限公司>>ATCC細胞>>腫瘤細胞>> 人胃癌細胞;NCI-N87圖片
參 考 價 | 面議 |
產(chǎn)品型號
品 牌ATCC
廠商性質(zhì)經(jīng)銷商
所 在 地上海市
更新時間:2017-01-09 14:19:34瀏覽次數(shù):339次
聯(lián)系我時,,請告知來自 化工儀器網(wǎng)人胃癌細胞,;NCI-N87圖片【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,,不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱 人胃癌細胞,;NCI-N87圖片
形態(tài)特性 上皮細胞
生長特性 貼壁生長
特征特性 NCI-N87細胞表達表面糖蛋白癌胚抗原(CEA)和TAG 72, 并且沒有左旋多巴胺脫羧酶(DDC)活性。 它們的血管活性的腸肽(VIP)受體活性極低并缺乏胃泌激素受體,。 它們表達蕈毒堿膽堿受體,。 沒有證據(jù)表明存在N-myc, L-myc, myb和EGF受體基因的重組。 這個細胞株表達的c-myc和c-erb-B 2 RNA水平與其它細胞株相當,。以下基因不表達: N-myc, L-myc, c-cis, IGF-2, 或胃泌激素釋放肽,。 報道NCI-N87 細胞的植板率為4.3%。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 優(yōu)質(zhì)胎牛血清,,10%
傳代方法 消化15-20分鐘,。1:2。4-5天長滿,。
傳代情況 P(21+5)
凍存條件 *培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1,、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%,;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,,10%。
2,、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,,95%;二氧化碳,,5%,。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3,、凍存液:90%*培養(yǎng)基,,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,。液氮儲存,。
二、細胞處理:
1,、復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,,加入約8ml培養(yǎng)基,,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細胞密度,。
2,、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng),。
對于貼壁細胞,,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,,1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,,可進行細胞凍存,。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,,細胞變圓脫落后,,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存,。懸浮細胞凍存時,,應(yīng)將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,,少量保存上清液(防止細胞吸走),,加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存,。
質(zhì)量保證:
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC,、DSMZ、JCRB等,,購買到貨后,,由我們實驗室擴增、凍存,,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,,100%進口來源,100%保證5代以內(nèi),,活力>95%,,無細菌、真菌,、支原體污染,。 細胞到達客戶手中,1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,,導(dǎo)致細胞在凍存前死亡,,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養(yǎng)基,、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),,吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細胞,,加入適量胰酶,,使胰酶的量能蓋住細胞,37℃孵育,,每隔2~3min顯微鏡下觀察,,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,,加入新鮮培養(yǎng)基,,晃動細胞瓶,終止胰酶作用,,用吸管小心吹打貼壁的細胞,,制成細胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),,加入新鮮培養(yǎng)基,,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況,。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),,1000rpm離心5min,棄去上清,,加入新鮮的培養(yǎng)基,,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),,加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),。
18-0600-24胃蛋白酶測試盒24 T
纖維二糖5g
膠原酶Ⅰ型100mg
SP6 RNA 聚合酶1000U
130809-1定影粉1袋
甲酰胺100mL
動態(tài)濁度法內(nèi)毒素定量試劑盒1.7mL×10 支
C600 菌種1mL
小鼠抗 Tag-100 標簽蛋白單抗100μL
60302-1硫酸卡那干粉1g
Nile Red25mg
甜菜堿溶液,,5M,PCR 1.5mL
CAS1390-65-4洋紅1g
23-0190-50Cisplatin(DNA 交聯(lián)劑 / 細胞凋亡誘導(dǎo)劑 )50mg
80813-50Western 印跡膜抗體清除劑50mL
山羊抗小鼠 IgG(H+L),,異硫氰酸熒光素標記100 μL
1,4- 雙 (5- 苯基 -2- 噁唑基 ) 苯1gQGY-7701(人肝細胞)5×106cells/瓶×2gersion
GoldCassette-GST/GST重組標簽蛋白快速檢測試劑盒(精裝)2次,、10次2次、10次
Elek氏培養(yǎng)基/Elek Medium致瀉大腸艾希氏菌毒素測定用250克國產(chǎn)/進口
明膠發(fā)酵管BR20支國產(chǎn)/進口
COLO 320DM(人結(jié)直腸腺細胞)5×106cells/瓶×2
小鼠支氣管成纖維細胞*培養(yǎng)基100mL
人臍靜脈內(nèi)細胞*培養(yǎng)基100mL
大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞(BMSCs)
Multi-tagged Protein Lysate(E.coli)/多標簽蛋白裂解液(E.coli)100ug100uggersion
BT-549(人腺管細胞)5×106cells/瓶×2
人氣管上細胞*培養(yǎng)基100mL
大鼠淋巴成纖維細胞*培養(yǎng)基100mL
NCI-H2452(人間瘤細胞)5×106cells/瓶×2gersion
HT-29(人結(jié)腸細胞)5×106cells/瓶×2
COLO 320(人結(jié)腸細胞)5×106cells/瓶×2
細胞周期與細胞凋亡檢測試劑盒規(guī)格:500次
McCown Woody Plant MediumBR10升國產(chǎn)/進口
人膽囊細胞英文名稱:GBC-SD
牛奶蛋白胨/蛋白胨C/Peptonized milkBR100/500克國產(chǎn)/進口
CAS6106-21-4琥珀酸,,六水25g
130990-50酵母 DNAout50 次
端粒酶重復(fù)片段擴增試劑盒 (TRAP)50 次
尿苷5g
L- 精氨酸鹽酸鹽25g
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