人食管癌細(xì)胞,；TE-11圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療,。
細(xì)胞名稱(chēng) 人食管癌細(xì)胞,；TE-11圖片
形態(tài)特性  上皮樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性   
培養(yǎng)條件  RPMI 1640 (w/o Hepes)  胎牛血清，10%
傳代方法  消化3-5分鐘,。1:2,。3天內(nèi)可長(zhǎng)滿。
傳代情況 PN
凍存條件  *培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測(cè) 陰性
STR 
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 A類(lèi)
細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1,、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),，90%,；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%,。
2,、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%,；二氧化碳,，5%。 溫度：37攝氏度,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基,，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存,。
二,、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基,，培養(yǎng)）,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2,、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次,。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺(tái),，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式,，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起,，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),，可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,，細(xì)胞變圓脫落后,，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存,。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘,，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走）,，加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中,，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存,。
質(zhì)量保證:    
我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC,、DSMZ,、JCRB等，購(gòu)買(mǎi)到貨后,，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增,、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè),，100%進(jìn)口來(lái)源,，100%保證5代以?xún)?nèi),，活力>95%，無(wú)細(xì)菌,、真菌,、支原體污染。   細(xì)胞到達(dá)客戶(hù)手中,，1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問(wèn)題,，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶(hù)提供一次,。
操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基,、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),，吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,，加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞，加入適量胰酶,，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察,，待貼壁細(xì)胞間間隙變大,、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基,，晃動(dòng)細(xì)胞瓶,，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,，制成細(xì)胞懸液,。控制吹打的力度,，避免產(chǎn)生大量的氣泡,，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基,，置37℃溫箱培養(yǎng),，隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi),，1000rpm離心5min,，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基,，用吸管小心吹散沉淀,，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基,，置37℃溫箱培養(yǎng),。

一站式 His 標(biāo)記蛋白質(zhì)微量純化套裝20 次
Western 印跡膜封膜液 ( 尼龍膜 )100mL
碘代乙酰胺5g
Tris 緩沖鹽溶液 (TBS)10 包
101103B-1玻璃勻漿器 ,2mL1套
SP6 體外轉(zhuǎn)錄試劑盒50 次
可溶性?xún)尚?B25mg
DNA 電泳分子量標(biāo)準(zhǔn) (300-10000 bp)50 次
Ac-LEHD-FMK(Caspase9Inhibitor)20μL
Rosetta(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞0.1mL×10
30-100常用PCR引物100uL
Lambda 核酸外切酶1000U
PDTC(NF-κB 抑制劑 / 抗氧化劑 )1g
17-0120MboI500U
一站式 SDS-PAGE 電泳套裝30 次
130544-5AEBSF 溶液，10mg/mL5mL
兔抗山羊 IgG(H+L),，辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記100 μL
維生素 D31gYeast Protein Extraction Kit/酵母蛋白抽提試劑盒25次、100次國(guó)產(chǎn)
MDA-MB-231（ATCC來(lái)源）, 人腺細(xì)胞
Ammonium Persulfate(APS)20g國(guó)產(chǎn)
純化瓊脂粉/寒天/瓊脂/洋菜/石花菜/瓊膠/AgarBR,，強(qiáng)度400g/c㎡250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
亞硫酸鹽瓊脂/Sulfite Agar厭氧亞硫酸鹽還原桿菌試管計(jì)數(shù)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
MDA-MB-435S(人腺導(dǎo)管細(xì)胞)5×106cells/瓶×2gersion
BT-549(人腺管細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
BCIP/NBT堿性磷酸酶顯色試劑40ml國(guó)產(chǎn)
人咽鱗細(xì)胞英文名稱(chēng)：FaDu
TMP瓊脂培養(yǎng)基/TMP Agar金黃色葡萄球菌的分離培養(yǎng)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
四環(huán)素檢定瓊脂/Tetracyline Examination Agar副溶血性弧菌的選擇性分離培養(yǎng)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
TE-1(人食管細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
HEC-1-A(人子宮內(nèi)膜腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
小鼠卵巢上細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
3% NaC1V-P半固體發(fā)酵管BR20支國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
人卵巢細(xì)胞英文名稱(chēng)：HO-8910
ZR-75-1(人腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
MDA-MB-231, 人腺細(xì)胞gersion
Ana-1(小鼠巨噬細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
長(zhǎng)效期 SDS-PAGE 電泳液 ( 干粉 )(>30KD)20L