人肺癌細胞(大細胞肺癌),；NCI-H460圖片【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研,，不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱 人肺癌細胞(大細胞肺癌),；NCI-H460圖片
形態(tài)特性  上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性  該細胞p53 mRNA陽性,，致瘤性陽性。 
培養(yǎng)條件  RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS
傳代方法  1:3~1:8,，每周換液2次
傳代情況 P18
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法（-）
STR 
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 A類
人肺癌細胞(大細胞肺癌),；NCI-H460圖片細胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清,，10%,。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%,；二氧化碳，5%,。 溫度：37攝氏度,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3,、凍存液：90%*培養(yǎng)基,，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配,。液氮儲存,。
二、細胞處理：
1,、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基,，培養(yǎng)）,。第二天換液并檢查細胞密度。
2,、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,，若細胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
對于懸浮細胞,，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式,，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起,，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時,，可進行細胞凍存,。貼壁細胞凍存時,，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后,，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,，再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,，應(yīng)將細胞收集,，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細胞吸走）,，加入部分新鮮培養(yǎng)基,，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存,。
人肺癌細胞(大細胞肺癌),；NCI-H460圖片質(zhì)量保證:    
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC,、DSMZ,、JCRB等，購買到貨后,，由我們實驗室擴增,、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,，100%進口來源,，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%,，無細菌,、真菌、支原體污染,。   細胞到達客戶手中,，1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,，導致細胞在凍存前死亡,，我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
人肺癌細胞(大細胞肺癌),；NCI-H460圖片操作步驟：
1）貼壁細胞傳代：提前將培養(yǎng)基,、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),，吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,，加少量PBS潤洗細胞，加入適量胰酶,，使胰酶的量能蓋住細胞,，37℃孵育,，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細胞間間隙變大,、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動細胞瓶,，終止胰酶作用,，用吸管小心吹打貼壁的細胞，制成細胞懸液,?？刂拼荡虻牧Χ龋苊猱a(chǎn)生大量的氣泡,，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng),，隔天觀察貼壁生長情況,。
2）懸浮細胞傳代：將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min,，棄去上清,，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀,，制成細胞懸液,，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基,，置37℃溫箱培養(yǎng),。

SDS-PAGE 電泳液 ( 干粉 )5L
Okadaic acid 鹽 (PP1 和 PP2A 抑制劑 )10μg
凝血酶1000U
T4 RNA 連接酶1000U
51208B-5dNTP 溶液 ,10mM5mL
膠原酶Ⅰ型100mg
卵巢上皮細胞生長因子5mL
CAS7240-90-65- 溴 -4- 氯 -3- 吲哚 -β-D- 半乳糖苷100mg
CAS8002-43-5卵磷脂 ( 蛋黃 )10g
90613-25動物細胞核蛋白微量制備試劑盒25 次
尿苷 -5'- 二磷酸25mg
柱式糞便 DNAout50 次
CAS9007-34-5膠原蛋白Ⅰ型1g
柱式藻類 RNAout50 次
糞便 DNAout100 次
DNA 稀釋液10mLHEL(人紅白細胞白血病細胞)5×106cells/瓶×2
5%糖發(fā)酵管BR20支國產(chǎn)/進口
硫檸膽蔗瓊脂培養(yǎng)基/TCBS瓊脂/TCBS Agar用于霍亂、副溶弧菌的分離培養(yǎng)250克國產(chǎn)/進口
LLC-WRC 256(大鼠腹水細胞)5×106cells/瓶×2
中性蛋白酶(含10mL酶解緩沖液)1mL
胎兒真成纖維細胞*培養(yǎng)基100mL
MKTTN肉湯/MKTTN Broth食品中沙門氏菌檢驗選擇性增菌250克國產(chǎn)/進口
人成骨肉瘤細胞英文名稱：MG-63
葡萄糖銨發(fā)酵管BR20支國產(chǎn)/進口
SuperPolymer Rabbit&Mouse HRP Kit/Super Polymer-二步法IHC試劑盒3ml,、18ml國產(chǎn)
Calu-6(人肺退行性細胞)5×106cells/瓶×2
Jurkat全細胞裂解液100μg國產(chǎn)
RGC-5, 小鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞gersion
改良CAMP-BAP氏瓊脂基礎(chǔ)/改良CAMP-BAP氏培養(yǎng)基基礎(chǔ)/CAMP-BAP Agar Base Modified彎曲桿菌選擇性分離培養(yǎng)250克國產(chǎn)/進口
大鼠神經(jīng)小膠質(zhì)細胞*培養(yǎng)基100mL
S180/小鼠腹水瘤株國產(chǎn)
Hela S3(人宮頸細胞)5×106cells/瓶×2
4-甲基傘形酮葡糖苷酸培養(yǎng)基(配套靛基質(zhì))/MUG培養(yǎng)基/MUG-Medium（with Kovacs）大腸埃希氏菌快速熒光測定培養(yǎng)基20g+靛基質(zhì)20m國產(chǎn)/進口
亮綠糖培養(yǎng)基/Brilliant Green Lactose Medium飲用天然礦泉水中大腸桿菌檢驗250克國產(chǎn)/進口
MCF 7B(人腺細胞)5×106cells/瓶×2
人肺癌細胞(大細胞肺癌),；NCI-H460圖片中性紅染色液(活細胞染色用)規(guī)格：100ml
聚乙二醇 8000250g
CAS76-05-1三氟100mL
130951-10Southern 細菌 (G+)DNAout10 次
EcoRV1500U
山羊抗小鼠 IgG(H+L)，辣根過氧化物酶標記100μL